缺点：操作程序复杂
动物接种：优点：结果易观察，可建立动物模型
缺点：有饲养条件要求，费用高，动物体内常带有潜伏病毒 2、差速离心和密度梯度离心的原理 差速离心和密度梯度离心
差速离心：交替使用高速和低速离心
高速离心（40000~80000g）使病毒沉淀，取沉淀
低速离心（约4000g）仅去除大的细胞碎片等杂质，取上清 密度梯度离心：部分或完全根据颗粒在一个无对流介质中的密度而获得分离，蔗糖10%~40% CsCl等
3、免疫扩散实验、补体结合实验反应 免疫扩散实验：可溶性抗原与相应抗体在含适量电解质的琼脂糖凝胶板的对应孔中各自向四周自由扩散,若两者分子比例适当,则在扩散的一定时间后在两孔之间相遇并生成白色沉淀线.
补体结合实验反应：
补体结合反应：是指在补体的参与下，以绵羊红细胞（SRBC）和溶血素（抗SRBC的抗体）作为指示系统的抗原抗体反应。 补反中包括两个系统五种成分：
待检系统：已知Ag或Ab、待检Ab或Ag及仅供一组Ag-Ab系统反应的定量补体。 指示系统：绵羊红细胞和溶血素
4、ELISA原理及几种方法的反应过程。
用酶标记抗原或抗体检测液体（血液、细胞液）中未知抗体或抗原的方法。 分类：间接法（Indirect ELISA）：
将已知抗原吸附于固相载体，酶标记二抗 检测液相中未知抗体
双抗体夹心法（Sandwich ELISA)：
将已知抗体吸附于固相载体，酶标记一抗 检测液相中的可溶性抗原
竞争法（Competitive ELISA) ：
将已知抗体或抗原吸附于固相载体，酶标记抗原或抗体 检测液相中的可溶性抗原或抗体
1、简述植物病毒核酸类型。什么是单分体、双分体和多分体病毒？ （1）正单链RNA（+ssRNA）。单链RNA具有侵染性，可以直接翻译，起mRNA的作用。大部分重要植物病毒的基因组属这一类型。 70%，TMV，CMV，PVY；多分体病毒。 （2）负单链RNA（-ssRNA）。病毒粒体中的单链RNA不具侵染性，必需先产生互补链，才能翻译蛋白。植物弹状病毒的基因组属这一类型。如小麦丛矮病。
（3）双链RNA（dsRNA）其中一ac条链具有mRNA的作用。负链变正链才能作为mRNA。植物呼肠孤病毒的基因组属这一类型。 水稻矮缩病。
（4）单链DNA（ssDNA）联体病毒科（Geminiviridae）病毒含有这种类型基因组，复制时单链DNA先合成双链DNA，再以常规途径转录生成mRNA。
（5）双链DNA（dsDNA）核酸类型与高等动、植物的相同，为互补的双链DNA，花椰菜花叶病毒属（Caulimovirus）、杆状DNA病毒属（Badnavirus）具有这种类型基因组
单分体病毒：遗传信息存在于1条核酸链上，包被在一个病毒粒体内的病毒。烟草花叶病毒(TMV)
双分体病毒：遗传信息存在于2条核酸链上，分别包被在2个病毒粒体内的病毒。烟草脆裂病毒（TRV）
多分体病毒：遗传信息存在于3~4条核酸链上，分别包被在3个或4个病毒粒体内的病毒。苜蓿花叶病毒（AMV）
2、什么是植物病毒的稀释限点、钝化温度及体外存活期？ 钝化温度（TIP）：含病毒的病植物提取液，被处理10分钟使病毒丧失活性的最低温度。 2、稀释限点（DEP）：含病毒的病植物提取液，经若干倍数的稀释后仍能保持其侵染力的最大稀释倍数，用10-1，10-2，10-3??表示。 3、体外存活期（LIV）：含病毒的病植物提取液，在20℃~22 ℃室温下，保持侵染力的最长时间。多数病毒的LIV在数天或数月
1.植物病毒侵染过程中有哪几个关键步骤？ 侵入，脱壳，复制，装配，释放，吸附
2.以正单链RNA病毒为例，简述植物病毒增殖的过程。
正单链RNA 病毒 （+ssRNA）RNA极性与 mRNA相同，可直接作为mRNA翻译蛋白。 寄主作用：物质、能量、场所、酶 3.植物病毒的翻译策略有哪几种？
1、亚基因组RNAs策略（subgenomic RNAs） 2、多聚蛋白策略（polyprotein synthesis） 3、多分体基因组策略（multigenome） 4、通读蛋白策略（read-through） 5、核糖体移码策略（transframe） 6、遗漏扫描（leaky scanning）
4.植物病毒在植物体内的转移有哪几种类型？ 细胞内的转移：随细胞质环流而移动。
细胞间的转移：主要通过胞间连丝（Plasmodesmata, PD）转移，病毒编码的蛋白常常参与胞内及胞间移动。
长距离转移：主要通过韧皮部及木质部上下转移，速度快。 1、植物病毒的传染方式有哪些？
非介体传播：汁液（机械方式）种子、花粉及无性繁殖材料，嫁接 介体传播：昆虫螨类线虫真菌 菟丝子土壤农杆菌 2、传播植物病毒的介体有哪些类型？ 昆虫螨类线虫真菌 菟丝子土壤农杆菌 3、非介体传播方式有哪几种？
汁液（机械方式）种子、花粉及无性繁殖材料，嫁接