四、 衣原体——介于立克次体&病毒之间的原核微生物
课本P25~本章小结! 小结: 细菌的鉴别:1.革兰氏染色法2.菌毛3.鞭毛4.芽孢 名词解释:1.间体:是胞膜凹入胞质内形成的一种囊状、管状或层状的结构。 5. 荚膜:某些细菌可在细胞外周产生一种粘液样的物质,包围整个菌体,称为荚膜。 6. 菌胶团:当多个细菌的荚膜融合形成一大的胶状物,内含多个细菌细胞时,则称为菌胶团。 7. 芽孢:某些革兰氏阳性菌,在一定条件下,可在菌体内形成一个圆形或卵圆形的内生孢子,称为芽胞。 8. 繁殖体(营养体):未形成芽胞的菌体称为繁殖体或营养体。 第二章 真核微生物
真核微生物是一大类细胞具有细胞核,能进行有丝分裂,细胞质中有线粒体或叶绿体等细胞器的微生物,包括真菌、藻类&原生动物。
第一节 真菌
真菌是一大类真核微生物,不含叶绿素,无根、茎、叶,营腐
生或寄生生活,仅少数类群为单细胞,其余为多细胞,大多数呈分支或不分支的丝状体,能进行有性和无性繁殖。从形态上分为酵母菌、霉菌和担子菌。 一、 酵母菌
结构简单,多为单细胞的一类真菌。 1.形态结构
比细菌大,有典型的细胞结构(真核微生物),细胞壁很厚 2.生长&繁殖
以无性繁殖为主,主要有芽殖、裂殖(横分裂)和子囊孢子形成。 在无性繁殖中,又以出芽生殖(芽殖)为主。 3.酵母菌菌落特征
单独的酵母菌细胞无色,固体培养基上形成的菌落多数是乳白色,少数是黄色或红色。 二、霉菌
1.形态&结构
霉菌菌丝按功能可分为:营养菌丝(基质菌丝)、气生菌丝&繁殖菌丝。 霉菌菌丝按结构分为无隔菌丝&有隔菌丝两种。 2.菌落特征
在营养基质上,能形成绒毛状、蛛网状或絮状菌丝体的真菌。 霉菌的菌落比细菌、酵母菌的要大。 3.繁殖方式
霉菌以无性繁殖&有性繁殖进行,以无性繁殖为主。
无性繁殖是不经过两性细胞的结合而形成新个体的过程。无性孢子包括芽孢子、节孢子、厚垣孢子、孢子囊孢子、分生孢子。 有性繁殖是经两性细胞的质配与核配后,产生有性孢子来实现的。有性孢子包括卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子等。 三、真菌生长繁殖的条件
1.营养需要 真菌大多数为异养菌,但它们的碳素利用能力强,不仅能利用单糖和双糖,而且也能利用淀粉、纤维素、木质素等多糖。 真菌对氮素营养要求不严,除氨基酸、蛋白质外,还可利用尿素、铵盐,亚硝酸盐、硝酸盐作为氮源。 2.温度 属嗜温菌,最适生长温度的范围为20-30℃。动物病原真菌最适温度为37℃。 3.pH 真菌在pH 1.5-10.0之间可生长,最适pH为3-6,属微酸性环境。 4.湿度 喜湿耐干。在高湿(多数在湿度95%-100%)条件下生长良好。
5.光线 可见光对孢子的形成和释放有重要作用,紫外光可使真菌发生变异和损伤。 6.气体 多数真菌为需氧菌,少数为兼性或严格厌氧。 四、真菌的分离&培养
1.真菌的分离方法 可分为菌丝分离法、孢子分离法和组织分离法三类。 2.真菌的培养
①固体培养 进行菌种分离繁殖,用琼脂斜面、平板作固体培养,形成菌落,观察和分离。 ②液体培养 一般有浅层培养和深层培养两类。
第二节 藻类 第三节 原生动物
课本P40本章小结
第三章 非细胞型微生物——病毒
病毒(Virus):指一类具有一定形态、结构,只含有一种核酸(或DNA,或RNA),必须在活的宿主细胞内以复制方式增殖的非细胞微生物。
特点:非细胞结构;以复制方式增殖;非常小显微镜才能观察到;每种病毒只含一种核酸(或DNA或RNA);只能在活的宿主细胞内复制成新的子代
病毒;抗生素对病毒的作用都不大;干扰素可抑制多数病毒的复制。
病毒按化学结构&组成分为病毒&亚病毒。按感染对象的不同分为动物病毒、植物病毒、细菌病毒(噬菌体)三大类。
第一节 病毒的形态、大小和结构
一、病毒的形态&大小
病毒颗粒的形态有球状、杆状、丝状、子弹状、砖块状(痘病毒)或多形性(如副黏病毒)。 病毒颗粒极其微小,测量单位用纳米(nm)。【PS.细菌用微米(μm)】大多数细菌能通过细菌滤器。 二、病毒的结构
完整的病毒颗粒主要由核酸和蛋白质组成。
病毒颗粒的基本结构如右图所示:中心为一团核酸,称为芯髓,它含有病毒的基因组&遗传信息;核酸的外周包有蛋白质外壳,称为衣壳。衣壳由一定数量的壳粒构成。不同病毒衣壳所含的壳粒数目不同,壳粒排列形式&数目可作为病毒鉴别分类的依据之一。核酸&衣壳统称核衣壳。仅有核衣壳的病毒称为裸病毒。有的病毒核衣壳外还包有一层或几层外膜,称为囊膜,此类病毒称为囊膜病毒。
1.核酸芯髓 核酸构成病毒的基因组,是病毒复制、遗传和变异等的遗传信息载体,一种病毒只含一种核酸。(下图) 2. 衣壳 指核酸的外周包有的蛋白质外壳,由一定数量的壳粒排列而成。(下图)
功能:①保护病毒核酸;②介导病毒核酸进入宿主细胞;③具有抗原性,能引起免疫应答。
3. 囊膜 有些病毒在核衣壳外面还有囊膜。囊膜是病毒在成熟过程中从宿主细胞获得的,含有宿主细胞膜或核膜的成分。有的囊膜表面有突起,称为纤突或膜粒。囊膜与纤突构成病毒颗粒的表面抗原,与宿主细胞嗜性、致病性和免疫原性有密切关系。有囊膜的病毒称为囊膜病毒,无囊膜的病毒称裸露病毒。(上图)
第二节 病毒的化学组成
裸病毒由核酸&蛋白质组成,囊膜病毒除核酸&蛋白质外,还含有脂类&糖类等。 一、核酸
1.核酸类型 病毒的核酸包括DNA或RNA。
核酸可分单股或双股、线状或环状、分节段或不分节段。DNA病毒多数为双股线状,RNA病毒多数为单股线状。 2.病毒的基因组——较小
最小的DNA病毒圆环病毒的基因组仅1.7kb,最大的DNA病毒痘病毒为275kb。一般RNA病毒的基因组较小,仅1.7kb -27kb。 3.感染性核酸
将某些病毒的核酸注入易感细胞内即能引起感染,并产生完整的病毒颗粒。这样的核酸称为感染性核酸。 二、蛋白质
1. 结构蛋白 指组成病毒成分的蛋白,约占30%-70%,包括衣壳蛋白、囊膜蛋白、(基质蛋白)和酶。 2. 非结构蛋白 指病毒组分之外的蛋白,在病毒复制过程中的某些中间产物,具有酶的活性或其他功能。 三、脂类
均来自宿主细胞,脂类主要存在于囊膜,主要是磷脂(50%-60%),其次是胆固醇(20%-30%)。用脂溶剂(如氯仿、乙醚)可去除囊膜中的脂类,使病毒灭活。 四、糖类
核酸中有核糖或脱氧核糖。嚢膜中的糖类一般以糖蛋白的形式存在,是某些病毒纤突的成分。如流感病毒的血凝素和神经氨酸酶。
第三节 病毒的抵抗力
病毒对外界因素的抵抗力一般比细菌小。病毒喜冷怕热,高温(60-65℃ 20~30 min)即可杀死,一般用低温冰箱(-20℃~-80℃ )或液氮罐( -196℃ )保存病毒。紫外线、消毒剂(碱类、70%乙醇、石碳酸等)易将病毒杀死。囊膜含有类脂质,有囊膜病毒对有机溶剂(脂溶剂)如乙醚等敏感。病毒对甘油、抗生素抵抗力强,因此常用50%甘油生理盐水保存病毒。用抗菌素抑杀病毒材料中污染的细菌。
★第四节 病毒的增殖与人工培养
一、病毒的增殖
病毒只在活细胞内进行复制。利用宿主细胞的酶系统,在病毒基因组控制下合成病毒核酸和蛋白质,并装配成成熟的子代病毒,释放到细胞外,再感染其他易感细胞的过程称复制。病毒复制周期,包括吸附、侵入、脱壳、生物合成、装配和释放5个连续的阶段。 (一)吸附(adsorption)
吸附易感细胞是病毒复制的第一步。这一过程包含两步:
①静电吸附:细胞及病毒颗粒表面都带负电荷,Ca2+、Mg2+等阳离子能降低负电荷,促进静电吸附,是可逆的,非特异的。 ②特异性吸附:病毒颗粒的表面分子与细胞膜上的受体结合,是不可逆的,特异的。
抗病毒治疗
(二)侵入(penetration)
最早了解的是某些噬菌体的侵入与脱壳,它们依靠尾端的溶菌酶在细菌细胞壁开一小孔,尾鞘收缩,尾髓刺入,注入头部的核酸,衣壳则留在细胞外。动物病毒侵入宿主细胞并脱壳的过程有所不同,可发生在胞浆膜、内吞小体及核膜。 ①整病毒穿过细胞膜的方式 如:呼肠孤病毒 ②病毒囊膜与细胞质膜的融合 如:疱疹病毒 ③细胞的内吞功能 如:牛痘病毒 (三)脱壳
病毒进入细胞后迅速在蛋白水解酶的作用下脱掉衣壳,释放出核酸,称为脱壳。 (四)生物合成(biosynthesis)
在病毒感染细胞之后的一个短时间内,病毒完全消失,甚至在细胞内也找不到传染性的病毒颗粒,直至感染数小时后子代病毒出现为止,这阶段称为隐蔽期 ,一般持续2-12h。
部位:一般DNA病毒在胞核中复制,RNA病毒在胞浆中复制。 生物合成即在病毒遗传信息的控制下合成病毒的各种组成成分。 早期:病毒特异性酶的合成 病毒核酸的复制
病毒结构蛋白质的合成
各类病毒生物合成的基本步骤:由亲代病毒早期转录mRNA 由早期mRNA翻译“早期蛋白”(复制所需蛋白) 亲代病毒核酸复制子代病毒核酸 子代核酸晚期转录mRNA,翻译为“晚期蛋白” (五)装配和释放(assembly and release)
新合成的核酸和蛋白质在宿主细胞内合成感染性病毒颗粒称为装配,又称成熟。DNA病毒在核内,RNA病毒在胞浆内装配。 成熟病毒从宿主细胞游离出来称为释放。释放包括 ①破胞释放(无囊膜病毒) ②出芽释放。 二、病毒的人工培养 鸡胚培养法
三大培养方法 组织培养法
实验动物培养法 (以下三部分内容阅读为主) (一) 鸡胚培养
1、接种途径:尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊、绒毛尿囊膜 2、培养数天后,观察鸡胚情况或取培养物进一步鉴定 (二)组织培养(最常用细胞培养) 1、优点:(1)可直接观察细胞变化(如细胞出现病变);(2)可对病毒的复制进行基础性研究;
(3)可进行空斑纯化病毒克隆;(4)可滴定病毒含量。
2、细胞种类: