粗 蛋 白 含 量 检 测
(GB/T6432)
一、原理：
凯氏法测定样中的含氮量、即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。
二、仪器设备：
1. 高速粉碎机，粉碎时间1分钟。 2. 分样筛； 0.45mm、40目 3. 分析天平；感量0.0001g 4. 消化炉
5. 滴定管；酸式50mL 6. 锥形瓶；250mL
7. 定氮仪；以凯氏原理制造的半自动蛋白测定仪
三、试剂
1. 硫酸：含量98%
2. 氢氧化钠：40%水溶液（m/V） 3. 硼酸：2%水溶液（m/V）
4. 混合催化剂：0.4g硫酸铜(5个结晶水)，6g硫酸钾或硫酸钠，磨碎混匀。
5. 混合指示剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。
6. 0.1mol/L盐酸标准溶液：8.3 mL盐酸注入1000 mL蒸馏水中。
标定：减量法称取0.8g左右在270-300℃灼烧2h的无水NaCO3，加水50mL溶解，加10滴混合指示剂，用配好的盐酸滴定成暗红色，煮沸2min，冷却(水中)后再滴至暗红色，同时作空白试验(不加Na2C03)。 计算：
m×1000
C=
(V1-V2)M
式中: C——硫代硫酸钠标准溶液之物质的量浓度（mol/L）
m——无水碳酸钠的质量，g V1 ——盐酸溶液的用量，mL V2——空白试验盐酸溶液的用量，mL
M——无水碳酸钠的摩尔质量数值，单位为克每摩尔（g/mol）〔M(1/2NaCO3)=52.994〕 7. 蔗糖
8. 硫酸铵：分析纯，干燥
四、分析步骤：（国标推荐法）
1. 试样的消煮
2. 称取试0.5g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入消化管中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸，于420℃消化炉中消化3小时。冷却后，加入蒸馏水20ml，待用。 3. 氨的蒸馏；
采用半自动定氮仪，将带消化液的消化管插在蒸馏装置上，以25mL硼酸为吸收液，加入2-3滴混合指示剂，蒸馏装置的冷凝管末端要浸入装有吸收液的锥形瓶内，然后向消化管中加入氢氧化钠溶液，以溶液变黑为宜，即当生成黑色的氢氧化铜时，加碱量已够。若加碱量不足或过量，分解液呈蓝色而不显黑色，若加碱不够，需再增加氢氧化钠用量，直到分解液呈黑色为止。蒸馏，蒸馏时间以吸收液体积达到150mL以上时为宜，降下锥形瓶，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内。
4. 滴定：用0.1mol/L的标准盐酸溶液滴定吸收液，溶液由蓝绿色变淡紫色为终点。 5. 空白测定：
称取蔗糖0.5g，代替试样，按以上分析步骤进行测定，消耗0.1mol/L的标准盐酸溶液的体积不得超过0.2mL，消耗0.02mol/L的标准盐酸溶液的体积不得超过0.3mL。
五、计算：
（V-V）?CHCl?6.25?0.014粗蛋白（%）?10?100
m式中：V1——滴定试样时所需标准酸溶液体积，mL
V0——滴定空白时所需标准酸溶液体积，mL CHCL——盐酸标准溶液浓度，mol/L m——试样质量，g
0.014——每毫克当量氮的克数 6.25——氮换算成蛋白质的平均系数
1
水 分 检 测
(GB/T6435—2006)
一、适用范围：
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和各种单一饲料中水分的测定，但用作饲料的奶制品、动物和植物油脂、矿物质除外。
二、原理：
试样在105℃烘箱内，在大气压下烘干，直至恒重，逸失的重量为水分。
三、试剂和仪器设备：
1．高速粉碎机，粉碎时间1分钟。 2．分析筛 孔径0.25mm（60目）。 3．分析天平 感量0.0001g
4．电热恒温箱（烘箱） 可控制温度在105±2℃ 5．称样皿 玻璃或铝质,直径40mm以上,高25mm以下 6．干燥器 以氯化钙或变色硅胶为干燥剂
四、试样的选取和制备：
选取具有代表性的试样，其原始样量应在1000g以上，用四分法缩减至500g，风干后粉碎至全部通过40目筛，再用四分法缩减至200g，装于密封容器中，防止试样成分的变化或变质。
如试样为多汁的鲜样，或无法粉碎时，应预先干燥处理，称取试样200～300g，在105℃烘箱中烘15min，立即降至65℃，烘干5～6h。取出后，在室内空气中冷却4h，称重，即得风干试样。 分析步骤：
1. 洁净称样皿，在103℃烘箱内烘1h，取出，在干燥器中冷却30min，称准至0.0002g，再烘干30min，同样冷却，称重，直至两次重量之差小于0.0005g为恒重。
2. 用已恒重称样皿称取两份平行试样，每份2～2.5g（含水重0.1g以上，样品厚度4mm以下）。准确至0.0002g，不盖称样皿盖，在105℃烘箱内烘3.5h，取出，盖好称样 皿盖，在干燥器中冷却30min，称重。
五、计算
水分含量（%）按下式计算：
W1－W2
水分（%）＝
W1－W0
式中：W1——105℃烘干前试样及称样皿重，g
2
×100%
W2——105℃烘干后试样及称样皿重，g W0——已恒重的称样皿重，g
3
粗 灰 分 检 测
(GB/T6438)
一、原理：
饲料样品在550℃灼烧后所得残渣，用质量百分率表示。残渣中主要是氧化物、盐类等矿物质，也包括混入饲料中的砂石、土等，故称粗灰分。
二、仪器设备：
1. 高速粉碎机：粉碎时间1分钟。 2. 分样筛：孔径0.25mm（60目） 3. 分析天平：感量0.0001g
4. 高温炉：有高温计且可控制炉温在550±20℃ 5. 坩埚：瓷质，容积50mL
6. 干燥器：用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶作干燥剂
三、试样的选取和制备：
选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化或变质。
四、分析步骤：
将干净坩埚放入高温炉，在550±2℃下灼烧30min。取出，在空气中冷却约1min，放入干燥器冷却30min，称其质量。再重复灼烧、冷却、称量，直至两次质量之差小于0.0005g为恒质。
在恒质的坩埚中称取2～2.5g试料（灰分质量在0.05g以上），准确至0.0002g，在电炉中碳化至无烟状态(夏季和冬季，可适当延长时间20min)，于550±20℃下灼烧3.5h至灰白色，冷却到200℃。取出，在空气中冷却约1min，放入干燥器中冷却至室温，称取质量。
五、计算：
粗灰分含量（%）按下式计算：
m2－m0
粗灰分（%）＝
m1－m0
式中：m2——为灰化后坩埚加灰分的的质量，g m1——为坩埚加试料的质量，g m0——为恒质空坩埚，g 所得结果应表示至0.01%
×100
4