发酵工艺实验(4)

2019-04-09 10:44

(5)滤器消毒阀

消毒时关闭G-02阀,开启此阀,蒸汽通入过滤器进行消毒,同时将蒸汽经过过滤器通入罐内。

(6)夹套蒸汽阀

消毒时开启此阀和W-11阀,关闭W-02,W-03和W-05阀,蒸汽通过夹套,对罐内培养基进行预热,防止在蒸汽直接通入罐内培养基中时由于产生过多的冷凝水而造成培养基体积增加。

(7)底阀消毒阀

消毒时,开启此阀和M-01,对取样、放样阀(底阀)及取样管道进行灭菌。

(8)滤气排气阀

消毒时排去过滤器中的冷凝水,又可在培养过程中防止可能出现的回流管道的倒流现象出现。

(9)蒸汽过滤器排水阀

使用前开启此阀,排去冷凝水。

(10)水泵进口阀

发酵过程中用于循环泵往夹套通入循环水的阀门,消毒时关闭此阀以防止蒸汽进入泵内。

(11)冷水旁路阀

当水泵出现故障时,开启此阀,保证管路系统充满水。

(12)水泵出水阀

消毒时,关闭此阀,防止蒸汽进入水泵;快速冷却或培养过程中,开启此阀,冷凝水由水泵进入夹套,进行温度控制。

发酵过程中用于循环泵往夹套通入循环水的阀门,消毒时关闭此阀以防止蒸汽进入泵内。

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(13)冲洗阀

培养过程结束后,用皮管连接此阀,可对反应器内、外及环境进行冲洗。

(14)夹套回流阀

消毒时,关闭此阀,防止蒸汽经加热器进入水泵;快速冷却或培养过程中,开启此阀,冷却水或恒温水经加热器排入下水道或通入水泵进行循环以控制温度。

(15)冷凝水阀

消毒或培养过程中,为减少培养液的损失,可开启此阀对排气进行冷却,使冷凝液返回罐内。

(16)加热器底阀

快速冷却或排污时,将加热器内的水排入下水道。

(17)温控切换阀

在培养过程中,开启此阀。而一旦温控电磁阀W-09失灵时,可关闭此阀,打开或关闭W-10,即可维持手动冷却控温,又可对W-09进行维修或更换。

(18)温控电磁阀

培养过程中,当罐内温度高于设定值时,自控系统开启此阀,冷却水加入夹套并流经此阀,使温度恒温。

(19)温控旁路阀

培养过程中,关闭此阀。而一旦温控电磁阀W-09出现故障时,关闭W-08,开启此阀,可代替W-09阀,进行手动冷却控温。

(20)夹套排污阀

用于排放夹套内的水进入下水道。亦可在S-05阀下面的疏水器出现故障时,排放夹套内的冷凝水。

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(21)排料排气阀

消毒时,开启此阀,蒸汽形成回路,对取样放料阀(底阀)及取样管路进行消毒,罐内液体由此口排放。

(22) 底阀

对取样放料阀(底阀)和取样管路消毒结束后,关闭此阀,防止由于冷却时,取样管路内压力剧降,出现倒吸(抽真空)现象而产生污染。

(二)发酵罐的灭菌操作

简介:反应器的消毒灭菌在微生物发酵培养过程中非常重要,前期污染的主要原因就是消毒不彻底,为确保培养过程在无污染的情况下进行,必须严格按实罐消毒灭菌程序进行操作。反应器的消毒灭菌分为实消和冷却两步进行。

(一) 实消步骤

1、 2、 3、 4、 5、 6、

关闭所有阀门。

向罐内注入待消毒的料液至一定体积(消后体积控制在10L)

打开电源总开关,及“搅拌”开关,并设置一定的搅拌速度(宜在200rpm左右)。 将控制机箱面板上的“手动/自动”开关处于关闭状态(即控制器处于检测状态)。 开启尾气排气阀G--04和冷凝水阀W--06。

开启夹套蒸汽阀S--02、蒸汽虑气排水阀S--05,将蒸汽(约0.3-0.4Mpa)通入夹套,预热罐内液体。

7、 当罐内温度达到85~95℃左右时,开启滤器消毒阀S--01、滤气排气阀S--04,关闭冷凝水阀W--06,使蒸汽通入过滤器,并经由滤器排气阀S--04和疏水器排放过滤器中的冷凝水。

8、 待过滤器中的冷凝水排尽后,(触摸滤器排气阀S—04下端的管子烫手即可),关闭滤器排气阀S--04,然后开启无菌空气阀G--03,使蒸汽通入罐内。

9、 当温度高于100℃时,罐内产生鼓泡翻腾,此时应关闭“搅拌”开关停止搅拌。蒸汽经排气冷凝器通过尾气排放阀G--04向外排放。此时应调节尾气排气阀G--04到至略有

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少量蒸汽排出即可。 10、

当罐内温度上升至121℃(0.11Mpa),适当开启底阀消毒阀S--03、排料取样阀M--01,使少量蒸汽经过排料取样阀M--01排出,由“活”蒸汽对取样放料管路进行消毒灭菌。待排放适当时间后(约20分钟),先关闭排料取样阀M--01和底阀消毒阀M--03。 11、

通过调节夹套蒸汽阀G--04、尾气排放阀S--02或蒸汽进量,使反应器保温、保压(121℃,0.11Mpa)30分钟,实消工作即告完成。

注意:在消毒灭菌过程中切记:

(1)相关管道或区域均应有蒸汽的进和出,使蒸汽形成活路,不能留有死角。

(2)经常开启滤器排气阀S--04,排放过滤器中的冷凝水,随后即关闭此阀。

(3)当罐内温度超过121℃时,应尽量减少蒸汽进量,关闭或关小夹套蒸汽阀S--02,而不应加大排气,以免液体携带而导致液体体积减少。

(4)液体体积在实消结束后,会出现增加或减少现象,这是在消毒过程中由于蒸汽的冷凝或携带造成的。

(5)在消毒灭菌过程中应尽量避免蒸汽压力剧跌,一旦蒸汽压力低于罐内压力,罐内液体会倒压进入管道和过滤器内。当这种情况出现时,应尽快关闭底阀消毒阀S--03,防止料液倒压入过滤器内。

(二)冷却步骤

当实消灭菌结束后,应关闭底阀消毒阀S--03、切断蒸汽源,开启“搅拌”开关,待压力降至0.8Mpa左右时充入气体方可冷却,否则易造成罐内压力剧降,出现罐压跌零甚至倒吸现象,由此而带来污染。具体步骤如下:

1、 检查空气源并将进入装置的空气压力调节至0.12~0.14Mpa,开启“搅拌”开关(200rpm左右)。

2、 3、

开启冷凝水阀W—06. 按下列顺序关闭各阀门:

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(1)无菌空气阀G—03; (2)排料取样阀M—01; (3)底阀消毒阀S—03; (4)滤器消毒阀S—01; (5)夹套蒸汽阀S--02。 4、

按下列顺序开启各阀门,将无菌空气通入罐内:

1) 气体调节阀G—01; 2) 滤器进气阀G—02; 3) 无菌空气阀G--03。

注意:待罐内压力降至0.08Mpa左右时,方可开启无菌空气阀G--03,避免罐压高于空气压力造成倒压。

5、 6、

调节空气调节阀G--01和尾气排放阀G--04,保持一定的罐压。(0.05Mpa) 罐内通入无菌空气后关闭夹套排水阀S—05,开启下列各阀,和机箱面板上的分路控制开关,即可进行快速冷却:

(1)水泵出口阀W—03; (2)夹套回流阀W—05; (3)温控切换阀W—08; (4)“冷却”开关; (5)“水泵”开关。

注意:在冷却过程中罐压的波动比较大,须密切注意观察,切不可使罐压跌零。

1、

当罐温降至接近培养工艺所需的设定温度(相差约3~4℃)时,将温度手动控制

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