组织胚胎学试验

2019-04-09 16:39

前 言

一、实验目的

《组织胚胎学》属于一门微观形态学学科。其中《组织学》是研究机体微细结构的科学,《胚胎学》是研究水产生物个体发生和发展规律的科学,二者有密切联系。通过《组织胚胎学》实验对各种基本组织和器官组织切片的观察,使学生掌握各种基本组织和器官组织的结构组成与构造特点,借以加深对理论知识的理解和掌握。并通过实验训练学生的显微镜操作技能和镜下观察能力,培养学生的逻辑思维能力和分析问题能力,了解组织胚胎学的常用技术和研究方法。

二、实验要求

1、实验前必须认真复习理论内容,并预习《实验指导》,了解实验的目的和具体内容,以便在实验时理论联系实际,保证实验效果。

2、实验时需携带教材、实验指导、实验报告书、绘图笔(普通HB铅笔和红蓝铅笔)、橡皮擦和直尺等。

3、调整好升降凳,养成良好的坐姿与观察姿势,左眼观察,右眼配合右手进行绘图。

4、实验时必须集中注意力,首先是认真听取和领会实验教师示教的讲解,然后对照实验指导进行认真观察和思考,并认真完成作业。注意及时参考教材中的有关插图,并观察相关示教片。观察示教片时不得随意移动示教片,以免影响其他同学的观察。

5、严格遵守课堂纪律和实验室规则。 三、实验室规则

1、保持实验室安静和整洁,不得在室内喧哗、打闹和吸烟。禁止随地吐痰、乱扔纸屑秽物、禁止在实验台、显微镜以及切片盒等处乱写乱画。进入实验室必须穿戴整齐,不得穿拖鞋、背心进入实验室。

2、按安排的座位就座,按指定号码使用显微镜和切片,不得擅自拿用他人的显微镜或切片,不得擅自拆卸和更换显微镜的部件。

3、损坏或丢失显微镜、切片、模型等或显微镜出现故障均应立即报告老师,酌情处理。

4、实验完毕,将切片按号码插入切片盒,并把显微镜和切片盒放回原处。

5、值日生负责打扫卫生,关好水、电灯和门窗。 四、实验方法

1、观察切片应从肉眼、低倍、高倍,循序进行;

2、观察前应注意制片的种类与染色方法(一般切片多为石蜡切片、HE染色),注意切片的不同切面(如纵切、横切、斜切等)与整体的关系,形成立体的概念。 3、实验时参照《实验指导》,认真仔细的观察切片,独立思考,注意分析、归纳和比较。

4、掌握各种基本组织和器官组织的结构组成与构造特点,并进一步联系其功能。

5、在正确辨别组织和器官结构的基础上,找出能代表其结构特点的视野,进行绘图并注释,标注制片种类、染色方法、放大倍数等。

生物显微镜的基本结构

显微镜的基本结构可分为光学系统、光源照明系统和机械装置三部分。下面分别对它们予以介绍。 一、生物显微镜的光学系统

显微镜的光学系统主要包括物镜、目镜、聚光镜和光源系统四个主要部件。其次还包括滤光片、载玻片和盖玻片。 (一)物镜

物镜一般都是在物镜转换器上旋着。它是显微镜的最主要部件。显微镜的放大及分辨作用主要由它来担当。其优劣直接决定了显微镜的主要光学性能。普通物镜的结构如图10-2-1所示。

为了校正像差和色差(所谓像差是指所成的像与原物在形状上的差别,色差是指所成的像与原物在颜色上的差别),物镜都由多块透镜组成,而且放大倍数越高,结构越复杂。

普通物镜所观察到的像面总有些弯曲,即靠中间部分清晰,靠边缘部分比较模糊。要想让边缘清楚,需要调节显微镜的微调钮。但是边缘部分清楚后,中间部分又变得模糊了。这除了不便观察外,更主要地是无法对其进行摄影。平场物镜可以较好地校正像面弯曲,使视场平坦。但其结构也相应地复杂些。 现在,多数高倍物镜和油镜内都装有弹簧。在物镜前端受压时,镜头可以退缩回来。这样一方面可以保护镜头,另一方面也不会把载玻片和盖玻片压碎。这种物镜称为弹簧物镜。

1、物镜的分类 显微镜的物镜虽然细分起来多达数百种,但是一般可采用下述三种分法:

(1)按物镜使用空间介质的不同可分为: 干燥系物镜:使用时,物镜与标本之间以空气为介质。

油浸系物镜:简称油镜。使用时,物镜与标本之间以油类为介质。 (2)按物镜的放大倍数不同,可分为: 低倍物镜:放大10倍以下; 中倍物镜:放大10~25倍: 高倍物镜:放大40~80倍; 油镜:放大倍数一般为100倍。

(3)按物镜对像差和色差的校正程度不同,可分为: 消色差物镜(ACH); 复消色差物镜(APO); 平场消色差物镜(PLAN ACH); 平场半复消色差物镜;

平场复消色差物镜(PLAN APO)。

这五种物镜的区别主要是消除色差与校正场曲的程度不同。其性能和复杂程度均是递增的。即平场复消色差物镜质量最好,但其价格也最高,结构也最复杂。 2.物镜的识别 物镜通常都标有表示物镜光学性能和使用条件的一些数字和符号。如“40/0.65”和“160/0.17”。此处的40表示它的放大倍数(有的写成40×或40:1);0.65表示它的“数值孔径”(有的写成N.A.0.65或A. 0.65);160表示使用该物镜时,显微镜的机械筒长应为160mm(所谓机械筒长是指取下物镜和目镜以后,所剩下的镜筒长度。显微镜的机械筒长现已统一规定为160mm);0.17表示使用该物镜时,盖玻片的厚度应为0.17mm。有些低倍物镜,在有、无盖玻片的情况下都可以使用,所以不标0.17 而代之以横线“-”。有些油镜上标有“油(或oil)”字。 (二)目镜

普通目镜的结构如图10-2-2所示。目镜通常插在镜筒上。根据需要可以方便地拔插更换。其作用是把物镜放大后的像作进一步的放大,使人眼能够清楚地观察

标本。它有单目和双目两种工作方式。廉价显微镜多采用单目形式,使用时,只能用一只眼睛观察。双目显微镜配有两个相同的目镜,可供两只眼睛同时观察。一般的目镜是由上下两块或两组透镜组成。下面的一块大透镜叫场镜,上面的一块小透镜叫接目镜。两块透镜之间有一个环状光栏,用它来限制视场的大小,只留下成像质量较好的像供观察,通常把它叫做视场光栏。光栏上一般粘有一个细丝,用来指示特定的观察目标。当此细丝掉下后,可粘一小段头发或细铜丝代替。但要注意,其尖端要落在光栏平面内。否则,观察时,指示不清晰。

目镜可分为惠更斯目镜、冉斯登目镜、平场补偿目镜、平场广视野目镜和其它特殊目镜等多种。其中,上下两块透镜的凸透面都朝下的惠更斯目镜在普通显微镜上用得最多。平场补偿目镜一般标有“p”,国产也有标有“PB”的。它和平场物镜相配用。属于高档目镜。 (三)聚光镜

聚光镜又叫集光器,一般安装在镜台下面。它由手旋螺丝固定,安装方便。通常,它由聚光镜和可变光栏两个部件组成。有的聚光镜的下方还安装有一个放置滤光片的圆环形架子。聚光镜的作用一是将光源来的光线会聚到标本上,以便观察。二是使照明光线获得一个与物镜数值孔径相适应的孔径角,以保证物镜充分地被利用。普通聚光镜的结构如图10-2-3所示。可变光栏又叫光圈或虹彩光栏,装在聚光镜的下方,由十几块金属薄片组成。中央通光孔为圆形,移动可变光栏的把手,可以任意调节通光孔的大小。改变聚光镜的孔径角,以配合物镜的


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