2、器材
垂直板电泳装置；直流稳压电源；10 ul移液器。
四、实验方法
1、 将玻璃板在灌胶支架上固定好。 2、 配置分离胶（12 %） 水 30% 丙烯酰胺 1.5 M Tris-HCl （pH8.8） 10% SDS 10% AP TEMED 1.8 ml 2.4 ml 1.5 ml 60 ul 60 ul 4 ul 将上述分离胶配好，用玻璃棒充分混匀后，迅速注入两块玻璃板的间隙中，至胶面离玻璃凹槽2-3cm处停止，在胶面上轻轻加一层水，加水时顺着玻璃板缓慢加入，不能扰乱胶面。待30 min后胶凝聚，此时，在凝胶与水之间可以看到清晰的一条界面，倒出并用滤纸吸干胶面上的水（不能损坏胶面）。 3、 制备浓缩胶（5%） 水 30% 丙烯酰胺 1.0 M Tris-HCl （pH6.8） 10% SDS 10% AP TEMED 2.1 ml 0.5 ml 0.38 ml 30 ul 30 ul 2 ul 将胶混合液充分混匀，注入玻璃板间隙，使胶面与玻璃板凹槽处平齐，而后插入上样梳，上样梳应一次平稳插入，梳口处不得有气泡，梳底需水平。待聚合20min凝聚后，慢慢取出梳子，取时应防止把胶孔弄破。
4、 将凝胶板放入电泳槽中，加入电泳缓冲液。
5、 加样：蛋白Marker上样3ul，未知样品上样10ul。
6、 接通电源，注意正极对正极，负极对负极，进行电泳，开始电流恒定在10mA，进入分 离胶后改为20 mA，溴酚蓝至凝胶边缘使停止电泳。
7、取出凝胶板，撬开玻璃板，将凝胶做好标记后（marker端切一个角）放在大培养皿内，加入染色液，染色半小时以上。
8、将染色液回收，染色后的凝胶用水冲洗数次后，用脱色液脱色，直至蛋白质区带清晰，再用水冲洗数次。
9、将凝胶小心放在一张白纸上，测量溴酚蓝及各蛋白质区带的迁移距离（各蛋白质区带中线至分离胶上缘的距离），记录于下表。 样品分子量（kD） 97.4 66.2 43 31 20.1 14.4 ？ 蛋白质迁移距离（cm） 溴酚蓝迁移距离（cm） 相对迁移率mr
迁移率=蛋白质迁移的距离/溴酚蓝迁移的距离 以各标准蛋白质样品的相对迁移率作横坐标，蛋白质分子量的对数为纵坐标作图，得到标准曲线，根据未知蛋白的相对迁移率计算出其分子量。
注：该标准曲线只对同一块凝胶上的样品的分子量测定具有可靠性。