目 录
中文摘要??????????????????????????1 英文摘要??????????????????????????2 前言 ???????????????????????????3 1.材料与方法????????????????????????4 1.1 实验材料????????????????????????4 1.1.1 病料?????????????????????????4 1.1.2 仪器?????????????????????????4 1.1.3 试剂及药品??????????????????????5 1.1.4 培养基的制备?????????????????????5 1.1.5 试验动物???????????????????????6 1.2 试验方法????????????????????????6 1.2.1 细菌涂片、染色、镜检?????????????????6 1.2.2 细菌分离培养?????????????????????6 1.2.3 生化试验???????????????????????6 1.2.4 血清学鉴定??????????????????????7 1.2.5 动物致病性试验????????????????????7 1.2.6 药敏试验???????????????????????8 2 结果与分析????????????????????????8 2.1 染色结果????????????????????????8 2.2 分离培养结果??????????????????????9 2.3 生化试验结果??????????????????????9 2.4 血清学试验结果?????????????????????10 2.5 动物致病性试验结果???????????????????10 2.6 药敏试验结果??????????????????????10 2.7 防治??????????????????????????10 3.结论与讨论????????????????????????11 3.1 关于猪链球菌致病机理??????????????????11 3.2 关于猪链球菌病诊断???????????????????12 3.3 关于猪链球菌病防制???????????????????13 3.4 结 论?????????????????????????14 参考文献??????????????????????????15 致谢????????????????????????????16
摘 要
猪链球菌病是猪链球菌（Streptococcosis suis）引起的猪的一种重要的疾病，猪只不分品种和年龄阶段均容易感染，并且能够感染给人，可导致人和猪的死亡。猪链球菌主要感染3-12周龄的仔猪。近些年来，在美国、英国、荷兰、日本、加拿大、丹麦等许多国家均有猪链球菌病发生的报道，并在世界范围内造成了巨大的经济损失。在我国南方几省也曾经一度广泛流行，给我国也带来了很大的经济损失。目前已经鉴定出了35种血清型的猪链球菌，其中以2型最重要、最为常见。2004年4月，沈阳市某种猪繁育场大范围的发生仔猪的关节炎和败血症。本次试验以无菌采取患关节炎猪的关节液和患败血症猪的肝、肺、脾及肠系膜淋巴结各8份作为病料，并对这16份病料进行了病原菌分离试验、血清学鉴定、药敏试验、致病力试验。试验结果表明：该病原菌为2型猪链球菌，而且引起关节炎症状的猪链球菌较引起败血症的猪链球菌致病力弱；该菌对头孢菌素、青霉素等高度敏感，而对土霉素、链霉素等具有较强的耐药性。
关键词：猪；链球菌；分离鉴定
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Absract
Streptococcosis suis disease is an important disease of pigs ,witch is caused by Streptococcosis suis.All breeds and ages are susceptible. It can infect people and may lead to the death of people or pigs. Streptococcosis suis infect piglets of the ages witch is from 3 weeks to 12 weeks usually.In the recent years ,the disease has been reported occuring in many countries such as American,England,Japan,Holand,Canada and Danmark ect. And it caused a lot of economic losses in all over the world.In some provinces in south of China the disease spread widely and caused a lot of losses too.By now 35 kinds of serum types have been appraised and the 2 serum type is most important and most common.In Shenyang the arthritis and blood pionsioning occurred in piglets widely in some hogger in May 4th,2004.As the pathological material of disease we took eight shares each of the liquid of arthrotis from the piglets sickening arthritis and liver,lungs,spleen,mesentery lymth nodes shares,and on these sixteen shares the separation experiment,the appraisal to serology ,the agile experiment of medicine and the capacity of causing disease were carried on. The result makes it known :it is the 2 serum type causing to the disease and it is lower capacity of causing to the arthritis than that of the blood poisioning; Streptococcosis suis is highly sentitive to Cephalosporin and Penicillin, but the medicine enduring of witch is greater to some such as Terramycin and Streptomycin.
Keywords: Pig；Streptococcus；Separation and Identification
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前言
猪链球菌（Streptococcosis suis）在1956年～1963年间Demoor，首次通过生化和血清学方法，对猪的败血性感染的新的a溶血性链球菌进行了鉴定，它属于兰氏R、S、RS和T群在英国Elliott(1966)建议Demoor的S群与纯化的PM链球菌相似，两者都归属于兰氏D群，他命名该链球菌相似，两者都归属于兰氏D群，他命名为猪链球菌荚膜2型，1型与仔猪脑膜炎有关，而2型菌株可感染任何日龄的猪，与1型和2型抗血清均有反应的菌株为荚膜1/2，1983年～1995年描述了35个菌株，共分成32个新的荚型，荚膜2型菌株，在所在国家发病猪中都是主导菌株，某些不常见的荚膜型的菌株，可以引起严重感染，如9型与断奶仔猪的败血症脑膜炎，肺炎暴发有关。
猪链球菌病是猪的一种重要疾病，养猪业发达国家如美、英、荷及爱尔兰等常有本病发生。我国于1958年就有猪链球菌病的报道，1976年我国南方几省曾一度广泛流行，给我国养猪业带来了很大危害。猪链球菌截止到目
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前已发现的荚膜型已超过30多种,其中以2型最重要、最为常见。我国于1995年首例鉴定证实2型猪链球菌在我国的存在 [2]。猪链球菌可致2～6周龄仔猪败血症、脑膜炎、关节炎及支气管肺炎等{3～7}。本病在猪群暴发流行时,与猪经常接触的牛犬和禽类不见发病.在猪中仔猪,架子猪和怀孕母猪的发病率高。人工感染家兔最敏感,次为仓鼠,小鼠,鸽和鸡。
病原 链球菌系链球菌科(Streptococcaceae)链球菌属(Streptcoccus)的细菌,种类繁多,在自然界中分布很广,是一种呈球状细菌,沿一个方向进行分裂繁殖,因而呈菌数不等和长短不一的链状排列。不形成芽胞,有的在病料中或含血清的培养基内能形成荚膜,为革兰氏阳性菌,一般为兼性厌氧菌[5]
。该菌在粪便、灰尘和死尸中存活很长时间,但对去污剂和普通消毒剂敏感[6]。此菌抵抗力不强, 对干燥、湿热敏感,60℃30min即可被杀死。
按Lancefield血清学分群方法,链球菌分为20个菌群,与其有关的血清群是A、B、C、D、E(P.U.V)、Q、G、L、N、M、P、R(D)、S(D)14个菌群,
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目前,A、B、C、D、E、L等6个是引起发病的主要菌群。
根据链球菌菌体荚膜抗原特性的不同,D群又分成35个血清型,即1～34型和1/2型,其中以2型流行最广,对猪的致死性亦最强,其次是1型,其他有致病性的3～5,7～9和11,1/2型等[3]。国外多由D群的某些血清型特别是2型引起猪的败血型和脑炎型链球菌病,而在国内以C群的兽疫链球菌为主,D群较少,E群则引起慢性链球菌的关节炎和淋巴结炎(脓肿)。一般的猪场都
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有2～3个致病菌混合感染,1头猪可以同时感染2～3个菌群。
诊断 根据临床症状，年龄和肉眼病理变化及镜检即可确诊。特征性临床症状有磨牙、跛行、排干粪、空嚼，淋巴结肿大，皮肤、耳、四肢末稍有出血斑。肉眼可见急性死猪全身皮肤淤血，呈暗紫色，肺充血，肺广泛散在
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小叶性肺炎，心包积液，心内膜出血，关节内有胶样的液体或纤维素性、脓性分泌物，淋巴结脓肿出血，心二尖瓣有菜花状增生物。结合涂片、染色、镜检，分离培养，生化试验，动物接种等细菌学检查即可确诊链球菌病。
防制 首先严格检疫不从疫区购入病猪和带菌猪,对病猪隔离,病死猪无
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害化处理,深埋。加强饲养管理，注意环境卫生和经常性可能污染的环境、用具消毒。为根除本病在猪群中发生最好淘汰病猪。
其次可用预防接种防治此病目前国产的疫苗主要有猪链球菌多价灭活苗、氢氧化铝甲醛苗、弱毒冻干苗,按瓶签说明使用,免疫期6个月,可达到预期效果。
再者对患病猪群要作到及时发现,尽早治疗,可通过药敏试验，确定高效药物，连续用药,加强巩固疗效是治疗本病的关键。
2004年4月，沈阳市某种猪繁育场仔猪，多为2～6周龄仔猪。出现体温时高时低,精神食欲时好时坏,一肢或多肢关节肿大,跛行或不能站应,消瘦,衰弱或突然恶化而死亡等症状。病死猪和放血致死猪均呈衰竭状，后肢皮下有淡灰色胶冻样渗出物，腹股沟、掖下淋巴结肿大，多数关节部肌肉组织化脓，脓肿局限于单块肌肉中，切开后内容物有的就较干燥，有的呈半流体状，均呈淡黄色，脓肿周围有包膜，与周围健康组织界限明确，无粘连；脓肿内容物均呈半流体或豆腐渣样。肝脾包膜稍厚无明显坏死灶，肠系膜淋巴结肿大，质度坚实，表面及切面呈黄白色。小肠及结肠的浆膜有个别小出血点，小肠粘膜有轻微渗出性。肺脏心叶和间叶出现融合，小叶性肺炎，关节和皮下脓肿。疑为猪链球菌病，为作进一步诊断，无菌采取关节炎病猪的关节液及败血症病猪的肝、脾、肺及肠系膜淋巴结，经实验室分离鉴定，证实为2型猪链球菌。现将分离鉴定结果报告如下。
1 材料与方法
1.1试验材料
1.1.1 病料
无菌采取患关节炎病猪的关节液8份，编号为1～8号，无菌采取患败血症猪的肝、肺、脾及肠系膜淋巴结8份，编号为9～16号。 1.1.2 仪器
电热恒温培养箱 型号 HG303-3K 南京电器三厂制造 电热鼓风干燥箱 型号 HG101-1 南京电器三厂制造
电热手提高压蒸汽消毒器YXQ.SG41.280上海医用核子仪器厂 显微镜双筒 型号 JENA
Anke TDL80-2B 离心机 上海浦江科学仪器厂 1.1.3 试剂及药品
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