(一)培养基灭菌
1.间歇灭菌（分批灭菌、实消）
----将配制好的培养基同时放在发酵罐或其他装置中，通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌的过程，通常也称为实罐灭菌（常用）。
2.连续灭菌（连消）：将配制好的培养基在向发酵罐等培养装置输送的同时进行加热、 保温和冷却而进行灭菌。
1）配料预热罐——预热到60-70℃，避免温差过大产生水汽撞击声； （2）连消塔————使料液的温度很快升高到126-132℃；
（3）维持罐————在灭菌温度下保持5-7min（连消时间短，灭菌不彻底）； （4）冷却管————采用冷水喷淋冷却，冷却到40-50℃。 (二)发酵用空气过滤除菌 四、发酵
(一)发酵操作方式 1.分批发酵
一次投料，一次接种，一次收获 间歇培养 2、 补料分批发酵
在分批培养过程中，向反应器内加入培养基的一种或多种成分，以达到延长生产期和控制培养过程的目的。
优点在于使发酵系统中维持很低的基质浓度。可解除底物抑制，尽可能地延长产物的形成时间。 3、 连续发酵
以一定的速度向培养系统内添加新鲜的培养基，同时以相同的速度流出培养液。 二)发酵工艺控制
影响酶活性，改变菌体代谢方向 最适生长温度/最适产物合成温度
在发酵罐上安装夹套和蛇管，通过循环冷却水控制。 2. pH值
问题1 为什么要进行PH控制？ 答：（1）影响酶活性，
（2） 影响细胞膜的通透性（营养物吸收和代谢产物分泌）。 （3）影响代谢产物的合成方向
问题2 选择PH值的原则是什么？ 答：有利于菌体生长和产物的合成
（考虑不同菌种、生长期和产物合成期不同阶段。），
一般根据试验确定，如霉菌和酵母菌PH3-6 细菌和放线菌6.3-7.6。 问题3 如何控制ph值？ （1）采用合适的培养基配比 C（酸性）：N（碱性）合适， 生理酸、碱性物质比例合适； 添加缓冲物质：碳酸钙和磷酸盐 （2）发酵过程中补加酸或碱 补加氨水、硫酸铵 （3）调节补糖速度控制pH 3.溶氧(DO)浓度
发酵初期采用小通风，停搅拌，可降低能耗，而且在工艺上也是必须的(较大的通风和搅拌而产生过大的剪切力，对菌体的生长有时会产生不利的影响). 五、发酵产物的获得
(一)发酵液的特性和产物的分类 1）成分复杂： 2）产品浓度低： 3）失活问题：
4）分批发酵各批次成分存在差异 菌体细胞、酶、代谢产物
(二)下游加工的一般流程与单元操作 1. 粗分离阶段
1）发酵液的预处理和固-液分离 2）产物的初分离(提取 2.纯化精制阶段
3）产物的高度纯化（精制 （4）成品加工