图5滴定曲线表明SP Bestarose Fast Flow 的pH工作范围，例如SP基团的pH工作范围。
图5 SP Bestarose Fast Flow的滴定曲线
2.装柱指南
CM，DEAE，Q Bestarose 离子交换剂贮存在20%乙醇中，而SP Bestarose 离子交换剂则贮存在20%乙醇和20mM的醋酸钠中，使用前，将匀浆中的乙醇倒出，用起始缓冲液代替。
装柱说明
装柱的质量主要影响分离效果，请参照如下说明来检测，填装层析柱。首先测量最适流速。下面是用于测量带转接器并固定柱床的层析柱最适流速方法。
测量最适装柱流速：
最适装柱流速与温度、柱子大小型号、介质体积有关，因此，建议独立的装置都需分别测量最适装柱流速，测量方法如下： 1. 精确计算所需介质的量（这对固定柱高的层析柱尤其重要）。1L填充柱所需的介质量大约是1.15L自然沉淀匀浆的量。 2. 参照层析柱使用手册安装柱子。 3. 开始以较低的速度填充柱子（30cm/h）。
4. 不断增加压力，并记下压力稳定时的流速，不要超过柱子能承受的最大压力，或介质允许的最大流速。
5.当压力/流速曲线不再变化或层析柱承受的压力达到最大时，达到最大流速。此时停止装柱，并且不要超过最大流速。最适装柱流速/压力是最大流速/压力的70-100%。
6. 制作压力/流速曲线见表1，测得最适装柱流速，实际操作时的流速/压力应小于最大流速/压力的70%。
3. 装柱的评价
为了检查装柱质量，并对使用过程中质量监控，装柱完要立即检测柱效，然后定时检查，此时可以检查出分离效果是否正常。我们用等高塔板、HETP、峰不对称因子、As等术语来衡量填充柱的性能，通过应用样品如1%丙酮，这些指标是很容易测得。（有色的化合物和盐溶液避免使用，它们可能会与介质发生反应）
理论塔板数可以随着检测条件的变化而改变，因此它只能作为一个参考值。仪器和条件保持不变得到的结果才有可比性，溶质、溶液、洗脱液、样品体积、流速、流动路径、温度等条件改变都影响结果。为了得到最好的结果，应该控制样品在最大柱体积的1.0%，并且线性流速在15-30cm/h。
如果最大装柱量是由柱效来决定的，那么理论塔板数就可以在使用柱子时做为装柱量的参考。
测量HEPT和As的方法
为了防止样品的稀释，尽量接近柱子的进口处加入样品。 条件
样品体积： 1.0-2.0%柱体积 样品 conc： 1.0%（v/v）丙酮水溶液，
0.8M NaCl或10×buffer
洗脱剂： 水，0.5MNaCl水溶液或者是稀释的缓冲液 流速： 20–30 cm/h 检测：
丙酮： UV 280 nm; NaCl,buffer： 电导率
根据UV曲线（或者是电导率曲线）计算HETP和As，公式如下：
HETP=L/N
N=5.54(VR/Wh)2 VR=保留体积 Wh=半峰宽 L=柱高
N=理论塔板数
VR和Wh的单位要相同.
为了方便比较柱效，经常会用到“还原塔板高度“这个概念，其计算公式是： HCTP/d
其中d是颗粒的直径，一般来说，这个指标小于3才是正常的。
峰形应该是对称的，不对称因子要尽量接近1（0.8-1.5一般是可以接受的）。峰形发生变化往往是柱床变差的首要标志。
峰不对称因子的计算：
As=b/a
其中：
a= 在10%峰高处的第一个半峰宽 b= 在10%峰高处的第二个半峰宽
图6表示丙酮典型的UV吸收色谱图，并从该图中可以计算HETP和As。
图6 在测定HEPT和As时丙酮典型UV吸收图谱。
柱子：BPG300
介质： Bestarose 6 Fast Flow 株高：57.5cm 柱体积：40.6 L
样品：1.05L（1%丙酮） 洗脱液：蒸馏水 流速：19cm/h Wh=0.9
HEPT=0.024cm a:0.9 b:0.85 As：0.94
4. 保养
为了长期保持Bestarose 快速离子交换剂的最佳性能，请参照以下操作。
平衡
装柱完，用5倍柱床体积的washing buffer 平衡柱子。
再生
分离后，用高离子强度的缓冲液（例如1M NaCl）和/或增加PH