蜜枣中维生素C和蛋白质含量的测定
摘要：维生素C是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得的一类微量有机物质，在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用,蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。因此，它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的
【3】 每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。
本文用2，4-二硝基苯肼比色法测定的维生素C的含量。两种蜜枣维生素C含量的测定结果：麦加的蜜枣的维生素C含量15.53mg，伊拉克的蜜枣的维生素C含量16.42mg。用凯氏定氮法测定麦加，伊拉克的蛋白质的含量。两种蜜枣中蛋白质的总含量结果：麦加蜜枣的蛋白质含量0.32%，伊拉克蜜枣的蛋白质含量0.31%。
关键词：蜜枣，维生素C，分光光度法，蛋白质，凯氏定氮法。凯氏定氮法测定麦加，伊拉克的蛋白质的含量。两种蜜枣中蛋白质的总含量结果：麦加蜜枣的蛋白质含量0.32%，伊拉克蜜枣的蛋白质含量 0.31%。
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前言
蜜枣( 又称蜜丝枣) ：是青枣中最甜的品种，品质极佳， 8一9月份盛花期，果为椭圆型，叶片圆形，花苞是淡黄色的。蜜枣果实树可分为公和母。公树不发育果实而母树能发育果实，刮风时公树刮到母树互相串花然后能发育果实。
【1】
蜜枣的起源是我国的山东福建、国外的麦加、伊拉克、阿拉伯、印度等国家。 蜜枣能提高人体免疫力，药理研究发现，蜜枣能促进白细胞的生成，降低血清胆固醇，提高血清白蛋白，保护肝脏。蜜枣中还含有抑制癌细胞，甚至可使癌细胞向正常细胞转化的物质；经常食用鲜枣的人很少患胆结石，这是因为鲜枣中丰富的维生素C，使体内多余的胆固醇转变为胆汁酸，胆固醇少了，结石形成的概率也就随之减少；对病后体虚的人也有良好的滋补作用；蜜枣所含的芦丁，是一种使血管软化，从而使血压降低的物质，对高血压病有防治功效；蜜枣还可以
【2】
抗过敏、除腥臭怪味、宁心安神、益智健脑、增强食欲。
维生素C在胶原质的形成上扮演很重要的角色。胶原质对于人体的组织细胞、牙龈、血管骨骼、牙齿的发育和修复是一种重要的物质；帮助人体内铁的吸收；常被推荐为预防婴猝死症物质；抽烟者和老人需要更多的维生素(一支香烟可以破坏25～100mg的维生素C）。增强治疗尿道感染的药物之疗效；并增强免疫系统功能；具有抗癌作用；有助防止亚硝基胺（致癌物质）的形成；在人体中缺泛维生素C可造成坏血病的早期症状是倦怠、疲乏、牙龈疼痛出血、伤口愈合
【3】
不良、关节肌肉短暂性疼痛，易骨折等。蛋白质是生物膜的另一种主要成分。根据蛋白质和膜的结合程度的不同，蛋白质分为整合蛋白和边周蛋白(又称外在蛋白)两类，整合蛋白约占膜蛋白总量的70%。各种蛋白质在膜上的分布是不对称的。膜蛋白不仅有机械支持作用，而且在物质运输以及受体、抗原和酶的形成等方面起着重要作用。蛋白质的缺泛可造成成年人：肌肉消瘦、肌体免疫力下降、严重者将产生水肿。未成年人：生长发育停滞、贫血、智力发育差。蛋白质过量：蛋白质在体内不能贮存，多了肌体无法吸收，过量摄入蛋白质，将会因代谢障碍
【5】
产生蛋白质中毒甚至于死亡。
维生素C和蛋白质是人体不可或缺的微量元素。它们是人体的构造者，又是人体的调节者，是我们人体的生命之源。 1.实验部分 维生素C的测定
1.1 实验原理
原理：总抗坏血酸包括还原型，脱氢型和二酮古乐糖酸，样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2,4-二硝基苯肼作用生成红色脎，其呈色强度与总抗坏血酸含量成正比，可进行比色定量。该法具有良好的选择性，仪器设备简单，操作简便，准确可靠，已用于药品和合成样品中维生素C的测定。
1.2 仪器与试剂
1.2.1 主要仪器
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722 型光栅分光光度计（伤害第三分析仪器厂制造）;电子天平;202_AO型台式干燥箱（上海镜屏仪器仪表有限公司通州分公司）, SX2系列箱式电炉（上海镜屏仪器仪表有限公司通州分公司），KOM型可调控温电热板（山东鄄城华鲁仪器公司）。 1.2.2 主要试剂
（1）4.5mol/L硫酸 量取250mL浓硫酸小心加入700mL蒸馏水中，冷却后用水稀释至1000mL；
(2)85%硫酸 小心加900mL浓硫酸于100mL蒸馏水中；
（3）2% 2,4-二硝基苯肼 溶解2g 2,4-二硝基苯肼于100mL 4.5mol/L 硫酸中，过滤。保存于冰箱内，每次使用前必须过滤。 （4）2% 草酸溶液 溶剂2g草酸于100mL 蒸馏水中； （5）1% 草酸溶液 溶剂2g草酸于100mL 蒸馏水中；
（6）2% 硫脲溶液 溶剂2g硫脲于100mL 1% 草酸溶液中； （7）1% 硫脲溶液 溶剂1g硫脲于100mL 1% 草酸溶液中； (8) 1mol/L盐酸 取83.3mL盐酸，加水稀释至1000mL；
(9)抗坏血酸标准溶液 称取100mg抗坏血酸溶液溶解于100mL 2%草酸溶液中，此溶液每毫升相当1mg抗坏血酸；
(10)活性炭 将100g活性炭加到750mL 1mol/L盐酸中，回流1-2h,过滤后用水洗
3+
数次，至滤液无铁离子（Fe）为止，然后置于110℃烘箱中烘干。 1.3 实验方法
1.3．1 最大吸收波长的选择
吸取11.76μg/mL的抗坏血酸标准溶液在450nm到550nm之间进行扫描，实验结果如下：
(表-1)最大波长的选择
波450nm 460nm 470nm 长 吸0.143 0.158 0.175 光度
480nm 490nm 500nm 0.192 0.207 0.220
510nm 0.230
520nm 0.239
530nm 540nm 550nm 0.231 0.220 0.194
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B0.240.220.20吸光度0.180.160.14440460480500520540560波长
实验结果明：在520nm处有最大吸收，因此本文选用520nm作为测定波长。
1.3.2 标准曲线的绘制
（1）加入2g活性炭于50ml标准溶液中，振摇1min后过滤。吸取10.00ml过滤液放入500ml容量瓶中加入5.0g 硫脲，用1%草酸溶液定容。将抗坏血酸标准溶液稀释，使抗坏血酸浓度为19.96μg/mL。吸取5ml,10ml,20ml,25ml,40ml,50ml,60ml此稀释液，分别放入7个100ml容量瓶中，用1%硫脲溶液定容，使最后稀释液中抗坏血酸的浓度分别为0.980μg/ml, 1.960μg/ml,3.920μg/ml, 4.900μg/ml,7.840μg/ml,9.800μg/ml, 11.76ug/ml,作为抗坏血酸标准使用液。
（2）于7个试管中分别吸取4ml个不同浓度的抗坏血酸标准使用液，吸取4ml水于试剂作为空白管。各管再加入1.0ml 2% 2,4-二硝基苯肼溶液，混摇后，将8个试管放入38℃恒温水浴中保温3h。3h后将8个试管取出，全部放入冷水后，向每一个试管中加入5ml 85%硫酸，滴加时间至少需要1min 边加边摇。将试管自冰水取出，在室温放置30min后，以试剂空白管为参比，比色测定。 以吸光值为纵坐标，抗坏血酸含量为横坐标绘制标准曲线。
（表-2）抗坏血酸标准溶液的曲线
体积（ml） 5．00 10.00 20.00 25.00 40.00 7.840 0.149
50.00 9.800 0.194
60.00 11.76 0.239
浓度（μg/ml） 0.980 1.960 3.920 4.900 吸光度（A） 0.021 0.030 0.066 0.091
4
B Linear Fit of Data1_B0.250.200.15光度吸0.100.050.00024681012浓度
Parameter value
A -0.00556
B 0.02027
R 0.99791
Y=A+B*X Y=-0.00556+0.02027X (Y:吸光度 X:对应的浓度)
1.4 样品分析 1.4.1 样品处理
5g左右的样品加入等量的1% 草酸溶液磨成浆，倒入100mL容量瓶内，用1%草酸溶液定容并混和，过滤备用。量取25.0mL上述样品滤液，加入2g活性炭，振摇1min，过滤（弃去最初数毫升滤液）。吸取10.0mL滤液，加入10.0mL 2%硫脲溶液并混要，此为样品稀释液。取3支试管，各加入4mL经氧化处理的样品稀释液。其中一支试管作为空白，向其余两试管加入1.0mL 2% 2,4-二硝基苯肼溶液，将所有试管38℃恒温水浴中保温3h。3h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。空白管取出后使其冷到室温，然后加入1.0mL 2% 2,4-二硝基苯肼溶液，在室温中放置10-15min后冰水内。其余步骤同试样。当试管放入冰水冷却后，向每一试管（连同空白管）中加入85% 硫酸5mL,每管滴加时间至少需要1min,边加边摇动试管。将试管自冰水中取出，在室温放置30min后比色测定。用1cm比色皿，以空白液为参比液，在最大波长处测定吸光值。 2.实验结果
按下公式计算维生素C的含量
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