X=
CV1000mF?100
式中: X—每百克样品中总抗坏血酸含量;mg
C—由标准曲线差得或由回归方程算得试样测定液总抗坏血酸含量(μg/ml)
V-试样用草酸溶液(10g/L)定容的体积;mL F-样品氧化处理过程中的稀释倍数; m-试样质量;g
(表-3)根据标准曲线和公式计算出麦加蜜枣中的维生素C含量的测定
样品 样品取样量(g) 吸光度(A) 样 液 浓 度(μg/ml) 蜜枣维生素含量 mg 麦加(1) 5.177 0.077 4.0730 15.73 麦加(2) 5.167 0.070 3.7277 14.43 麦加(3) 5.254 0.082 4.3197 16.44 (表-4)根据标准曲线和公式计算出伊拉克蜜枣中的维生素C含量的测定
样品 样品取样量(g) 吸光度(A) 样 液 浓 度(μg/ml) 0.085 0.074 0.084 4.4677 3.9299 4.4184 蜜枣维生素含量 mg 17.23 15.19 16.84 伊拉克(1) 5.185 伊拉克(2) 5.173 伊拉克(3) 5.248 (表-5)两种蜜枣的平均值 样样液吸光度(A) 样液浓度(μg/ml) 维生素含量 品 mg 麦加 伊拉克
0.077 0.070 0.082 0.085 0.074 0.084
4.0932 3.7387 4.4363 4.4982 3.9413 4.4476
15.73 14.43 16.84 17.23 15.19 16.84
平均值 15.53
相对平均偏差 4.76%
16.42 4.99%
3. 蛋白质的测定
3.1 实验原理
蛋白质是含氮的有机化合物。食品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。 3.2 仪器与试剂 3.2.1 主要仪器
AL204-IC电子分析天平(精确度0.0001g)凯氏蒸馏装置;凯氏瓶; 3.2.2 试剂
(1)所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。 (2) 硫酸铜;
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(3) 硫酸钾; (4) 浓硫酸;
(5) 2% 硼酸溶液:溶解2g硼酸于98mL蒸馏水中。
(6)混合指示液:用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
(7)40% 氢氧化钠溶液:溶解40g氢氧化钠于60mL蒸馏水中。 (8)0.05mol/L盐酸标准溶液:取4.2ml盐酸于1000mL蒸馏水中。 3.3 实验方法 3.3.1 样品的测定
1.样品的消化:
精密称取2.0g左右的固体样品(约当氮30-40mg),移入干燥的100mL定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,6g硫酸钾及20毫升硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上,小火加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5小时。取下放冷,小心加20mL水,放冷后,移入100mL容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸同一方法做试剂空白试验。 2. 蒸馏装置准备:
于水蒸气发生器内装水约2/3处加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸。 3.蒸馏:
向接收瓶内加入10mL 2%硼酸溶液及混合指示剂1滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取10.0mL样品消化液由小玻璃杯流入反应室,并以10mL水洗涤小烧杯使流入反应室内,塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将10mL 40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯,提起玻璃塞使其缓慢流入反应室,立即将玻璃盖塞紧,并加水于小玻璃杯以防漏气。夹紧螺旋夹,开始蒸馏,蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min。 4.滴定:
移出接收瓶,以0.05mol/L盐酸标准溶液定至灰色为终点.同时吸取10.0ml试剂空白消化液进行蒸馏,滴定操作。 3.3.2 结果与分析
X=
(V1?V2)C?0.014m?(10100)?F?100
式中:
X-样品中蛋白质的百分含量,%; V1--样品消耗盐酸标准液的体积,mL; V2—试剂空白消耗盐酸标准液的体积,mL C--盐酸标准溶液的当量浓度;moL/L
0.014--1N盐酸标准溶液1ml相当于氮克数;g; m--样品的质量(体积),g(mL);
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F--氮换算为蛋白质的系数。
各地蜜枣中蛋白质的含量(表-6)
地名 样品质量(m) 1.846 1.978 1.786 1.966 1.860 1.980
样品消化盐酸标准溶液的体积(mL) 13.76 13.85 13.40 13.96 13.80 14.00
空白消耗盐酸标准溶液的体积(mL) 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01
蛋白质的百分含量(%) 0.33% 0.31% 0.33% 0.31% 0.33% 0.31%
平准值 相对平准偏差 麦加 0.32% 3.13%
伊拉克
0.31% 2.26%
4. 分析与讨论
4.1 分析
实验表明,在不同地区采取的蜜枣中维生素C含量和蛋白质含量也不同:麦加蜜枣中维生素C含量:15.53mg;伊拉克蜜枣中维生素C含量:16.42mg;麦加蜜枣中蛋白质含量:0.32%;伊拉克蜜枣中蛋白质含量:0.31% 。
通过比较可以得出:伊拉克蜜枣中维生素C的含量比麦加蜜枣中的维生素C含量高,而麦加蜜枣的蛋白质含量比伊拉克蜜枣的蛋白质含量高。 4.1.2 讨论
维生素C在胶原质的形成上扮演很重要的角色。胶原质对于人体的组织细胞、牙龈、血管骨骼、牙齿的发育和修复是一种重要的物质。蛋白质是生物膜的另一种主要成分。根据蛋白质和膜的结合程度的不同,蛋白质分为整合蛋白和边周蛋白(又称外在蛋白)两类,整合蛋白约占膜蛋白总量的70%。
用分光光度法测定蜜枣中维生素C含量的测定方法,用凯氏定氮法测定蜜枣中蛋白质含量的测定,通过精密度和准确度的考察,证明本法测定蜜枣中维生素C和蛋白质含量切实可行的好办法。该法准确,选择性好,能有效消除干扰离子的影响。
5. 总结
通过实验测定, 用2,4-二硝基苯肼比色法处理时不同国家蜜枣中的维生素C含量时:不同国家的蜜枣中维生素C的含量分别为麦加15.53,伊拉克16.42。维生素C含量多得是:伊拉克。用凯氏定氮法处理蜜枣中蛋白质时不同国家蜜枣中蛋白质的含量也不同,测定结果:麦加0.32%,伊拉克0.31%。两种地区中蛋白质含量最大的是:麦加。
在人体中缺泛维生素C可造成坏血病的早期症状是倦怠、疲乏、急躁、呼吸急促、牙龈疼痛出血、伤口愈合不良、关节肌肉短暂性疼痛,易骨折等。蛋白质在体内经过消化被水解成氨基酸被吸收后,重新合成人体所需蛋白质,同时新的蛋白质又在不断代谢与分解,时刻处于动态平衡中。因此,食物蛋白质的质和量、
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各种氨基酸的比例,关系到人体蛋白质合成的量,尤其是老年人的健康长寿都与膳食中蛋白质的量有着密切的关系。
维生素C和蛋白质是人体不可或缺的微量元素。它们是人体的构造者,又是人体的调节者,是我们人体的生命之源。
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