质。另外, 有些蛋白并非是核内常驻\人口\通常要往返于核质和胞质之间, 这些穿梭蛋白既有NLS 又有NES。 ■ 输入蛋白(importin)
仅有核定位信号的蛋白质自身不能通过核孔复合物,它必须在水溶性的NLS 受体的帮助下才可进入核孔复合物,这种受体称为输入蛋白, 分布在胞质溶胶。它们作为一种穿梭受体(shuttling receptor)在细胞质内与核蛋白的核定位信号结合, 然后一起穿过核, 在核内与亲核蛋白分离后再返回到细胞质中。
■ 输出蛋白(exportin)
存在于细胞核中识别并与输出信号结合的蛋白质, 帮助核内物质通过核孔复合物输出到细胞质, 而后快速通过核孔回到细胞核中。
核运输系统(nuclear-transport system) 核质蛋白(nucleoplasmin)的输入作用
细胞核内输出到细胞质的两类主要物质是各种RNA 和核糖体亚基。输出的RNA中, mRNA是最多也是最重要的。 细胞核中合成的RNA 很快与蛋白质形成hnRNPs(含有加工 成熟的RNPs 称之为mRNPs)后被运输到胞质溶胶。
分子伴侣(molecular chaperones):是由不相关的蛋白质组成的一个家系，它们介导其它蛋白质的正确装配，但自己不成
为最后功能结构中的组分。
分子伴侣是细胞中一大类蛋白质, 它们的作用广泛, 但都有一个基本的特性, 就是“乐于助人”。
第一个被发现的分子伴侣 :核质蛋白(nucleoplasmin):它在细胞核中通过降低组蛋白的正电荷, 帮助组蛋白和DNA 形成正常的核小体, 其本身并不成为核小体的组成成分。 三个特点:①凡具有介导功能的蛋白, 都称为分子伴侣；②作用机理不清楚；③分子伴侣一定不是最终组装完成的结构的组成部分, 但也不一定是一个分离的实体。
分子内伴侣(intramolecular chaperones)：一些位于信号肽和成熟蛋白之间的前序列, 不仅抑制酶原蛋白的活性, 还作为分子伴侣帮助酶原蛋白折叠。去除前序列, 剩余部分便会形成稳定的中间物, 既不沉淀, 也不折叠;加入前序列,才能折叠成活性构象,将这种序列称为分子内伴侣。与一般的分子伴侣相比, 这种分子内伴侣具有高度的专一性, 通过水解作用释放, 不需要ATP。
分子伴侣的功能和作用机制 ■ 帮助蛋白质折叠和装配
这是所有分子伴侣家族成员共同的、最重要的功能。驱使蛋白质折叠和组装的主要作用力是蛋白质疏水区域间的疏水作用。蛋白质多肽链在核糖体上合成时就开始进行折叠。在体内溶液环境中，肽链形成天然构象或亚基装配成复合物之
前，它们原来包埋在蛋白质中心的疏水区瞬间会暴露而易错误折叠或聚集形成不正确的产物; 分子伴侣识别这些未折叠的肽链和未组装的亚基，与它们形成复合物防止错误折叠或聚集成包涵体。
■ 帮助蛋白质的转运和定位
分子伴侣在蛋白质的转运和定位中起重要作用,它们与新生肽链结合，阻止它们折叠成天然构象或聚集，使新生肽保持输出感受态的构象，即完全或部分折叠并且不被细胞内蛋白酶水解，利于跨膜转位。并且发现在新生肽链进入内质网的共翻译运输的模型中，肽链插入内质网膜除了与信号肽、信号肽识别颗粒和停泊蛋白有关，还与分子伴侣有关。 ■ 参与细胞器和细胞核结构的发生 ■ 应激反应
分子伴侣中除少数成员外，大部分成员均可被高温或低温和乙醇、亚砷酸盐、重金属等因素诱导合成，它们使生物体逆境耐受力大大增强。 ■ 参与信号传导
染色质(chromatin)
染色体(chromosome)是细胞在有丝分裂和减数分裂过 程中由染色质聚缩而成的棒状结构。 染色质骨架——DNA
一个生物储存在单倍体染色体组中的总遗传信息称为该生物的基因组(genome)。
染色质中的DNA 是双螺旋结构。在构型上,主要是Waston 和Crick 提出的右手双螺旋DNA, 即B-型DNA。此外还有A 型和Z 型DNA。 DNA 序列的复杂性
单一序列(unique sequence) 又称非重复序列, 在一个基因组中一般只有一个拷贝。真核生物的绝大多数结构基因在单倍体中是单拷贝或几个拷贝(1～5 个拷贝)。
重复序列(repetitive sequence)拷贝数在10 个以上的序列称为重复序列。
DNA 结构稳定遗传的功能序列
DNA 是遗传物质,它的稳定遗传依赖于复制和分离的准确性。要达到这个目的, 在染色体上必须具有三个功能单位, 即: 自主复制序列、着丝粒序列和端粒序列。
● ARS 序列(autonomous replicating sequence) 即自主 复制序列, 又叫复制起点序列(replication origin sequence)。 真核生物染色体上有多个ARS 序列。上下游各200 个bp 左 右的序列是维持ARS 功能所必需的。
● CEN 序列(centromeric sequence) 即着丝粒序列，功 能是形成着丝粒，均等分配两个子代染色单体。 ● 端粒顺序(telomeric sequence，TEL) 是线性染色体两
端的特殊序列，在人类，这种序列是GGGTTA。功能是保持 线性染色体的稳定，即不环化、不粘合、不被降解。端粒是 由端粒酶合成的。该酶是反转录酶, 自身含有一个RNA 分 子，可作为延长DNA 末端合成的模板，合成的方向是5＇→3＇。
端粒酶是一种蛋白和RNA 的复合物, 用自身的RNA 作为模板, 反转录成DNA, 使DNA 链不断加长, 然后在DNA聚合酶的作用下将DNA 双链中的未合成的缺口填补。 人工染色体(artificial chromosome)
基于ARS、CEN、TEL 是线性染色体稳定的功能序列,人们利用这些序列构建载体, 重组后的DNA 以线性状态存在, 这样不仅稳定,而且大大提高了插入外源基因的能力,并且可以像天然染色体一样在寄主细胞中稳定复制和遗传，称为人工染色体。
组蛋白(histone)：是真核生物染色体的基本结构蛋白, 是一类小分子碱性蛋白质, 有五种类型：H1 、H2A 、H2B 、H3 、H4，它们富含带正电荷的碱性氨基酸, 能够同DNA 中带负电荷的磷酸基团相互作用。
染色质中的组蛋白与DNA 的含量之比为1:1。 组蛋白的功能
5 种组蛋白在功能上分为两组:一组是核小体组蛋白(nucleosomal histone), 包括H2A、H2B、H3 和H4,它们的作