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(1)培养基中加入化合物A的目的是________________________________________, 这种培养基属于______培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________。实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是________。
(3)在上述实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是______________________。 (4)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,此过程中所用的接种工具是__________,操作时采用________灭菌的方法。
解析:(1)在选择培养基中加入特定物质,可以筛选出特定的细菌。(2)根据题目所给的培养基配方,“目的菌”生长所需的氮源和碳源只能来自培养基中的化合物A。异养需氧型细菌在培养时需要振荡。(3)获得纯净特定“目的菌”的关键是防止外来杂菌入侵。(4)用平板划线的方法进行接种,接种工具是接种环,操作时一般采用灼烧灭菌。
答案:(1)筛选目的菌 选择 (2)化合物A 异养需氧型 (3)防止外来杂菌入侵 (4)接种环 灼烧
9.金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题:
(1)按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于______生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行______呼吸。
(2)7.5% NaCl肉汤培养基为微生物提供的营养成分包括________________________,用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是________________________。
(3)操作中在血平板上的接种方法是________,接种操作前后需要对接种工具进行______灭菌。
(4)在制备血平板时需将pH调节至________(填“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基______后,再加入适量血液。按培养基功能分类,血平板属于________培养基。
(5)经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现______的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作进行完
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善,完善的方案是_____________________________________________________。
解析:(1)金黄色葡萄球菌是一种细菌,属于原核生物。培养过程无密闭处理,故它进行有氧呼吸。(2)7.5% NaCl肉汤培养基可为微生物提供生长所需要的碳源、氮源、水和无机盐。用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养是为了增加高度耐盐性的金黄色葡萄球菌的数量。(3)图示用的接种工具是接种环,说明在血平板上接种的方法是平板划线法。接种工具在接种前后都要进行灭菌处理。(4)金黄色葡萄球菌的生长环境为弱碱性,培养基在灭菌前要先调节pH,因金黄色葡萄球菌能破坏红细胞,使其褪色,血平板上出现周围存在透明圈的菌落,说明有金黄色葡萄球菌,故血平板是鉴别培养基。(5)为增强实验结论的严谨性,应增加空白对照组。
答案:(1)原核 有氧
(2)碳源、氮源、水和无机盐 增加金黄色葡萄球菌的数量 (3)平板划线法 灼烧 (4)微碱性 冷却 鉴别
(5)周围存在透明圈 设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组
10.(2016·云南名校统考)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题:
成分 蛋白胨 蔗糖 显色剂(伊红美蓝) 含量 10.0 g 5.0 g 0.2 g 成分 乳糖 K2HPO2 琼脂 含量 5.0 g 2.0 g 12.0 g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL (1)大肠杆菌的同化类型为________,从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于________。 (2)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是____________________,因此需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”),操作者的双手需要进行清洗和________。空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使____________,还能破坏DNA的结构。
(3)根据用途划分,该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基,若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中________换成________,若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成____________。
(4)培养大肠杆菌时,常用的接种方法是________和__________。通过上述方法可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,称为________。
(5)使用以下微生物发酵生产特定产物时,所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相
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同的是________(多选)。
A.制作果酒 C.制作泡菜
B.由果酒制作果醋 D.制作腐乳
解析:该培养基含有显色剂(伊红美蓝),可使大肠杆菌菌落呈现金属光泽,因此属于鉴别培养基。若要分离能分解尿素的细菌,应以尿素为唯一氮源,因此应将蛋白胨换成尿素。若要鉴别尿素分解菌,应在培养基中加入酚红指示剂。制作果酒、果醋、泡菜和腐乳利用的微生物分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌和毛霉,其中醋酸菌、乳酸菌与大肠杆菌都属于原核生物,酵母菌和毛霉都属于真核生物。
答案:(1)异养型 分解者 (2)防止外来杂菌的入侵 灭菌 消毒 蛋白质变性 (3)鉴别 蛋白胨 尿素 酚红指示剂 (4)平板划线法 稀释涂布平板法 菌落 (5)BC
第三讲 植物组织培养、DNA技术及植物有效成分的提取
知识点一 植物组织培养
1.植物组织培养的原理和基本过程
2.菊花的组织培养
3.月季的花药培养
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知识点二 DNA的粗提取与鉴定 1.实验原理
2.实验流程
知识点三 植物有效成分的提取 提取成分 提取方法 实验流程 鲜玫瑰花+清水―→水蒸气蒸馏―→油水混合物――→玫瑰精油的提取 水蒸气蒸馏法 分离油层――→除水――→玫瑰油 NaSO24加入NaCl加入无水过滤橘皮精油的提取 压榨法 石灰水浸泡―→漂洗―→压榨―→过滤―→静置―→再次过滤―→橘皮油 胡萝卜―→粉碎―→干燥―→萃取―→过滤―→浓缩―→胡萝卜素 胡萝卜素的提取 萃取法
1.判断下列有关植物组织培养技术叙述的正误
(1)胚状体是外植体在培养基上脱分化形成的一团愈伤组织(×) (2015·江苏卷T20-A)
(2)外植体消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害(√) (2013·重庆卷T5-A)
(3)愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞(×)
(4)二倍体植株的花粉经脱分化和再分化后可得到稳定遗传的植株(×)
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(5)用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子(×) (6)植物组织培养所需的外植体,可以来自于植物的任何细胞(×)
(7)如果通过植物组织培养从愈伤组织中提取某种成分,应先使用生长素后使用细胞分裂素(√)
(8)单倍体植株的形成有两种途径,两种途径主要取决于培养基中植物激素的种类及其浓度配比(√)
(9)在剥离花药时,不要损伤花药,否则接种后不能脱分化形成愈伤组织(×) (10)月季花药培养时得到的都是单倍体植株(×) 2.判断有关DNA粗提取与鉴定叙述的正误
(1)进行DNA粗提取和鉴定实验时,加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨(×) (2)洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度(×)
(3)在DNA的粗提取与鉴定实验中,将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色(×)
(4)提取DNA时,如果没有鸡血材料,可用猪血代替(×) 3.判断有关植物有效成分提取叙述的正误
(1)蒸馏法的实验原理是利用水将芳香油溶解下来,再把水蒸发掉,剩余的就是芳香油(×) (2)提炼玫瑰精油的玫瑰花应在花开的初期采取,因为此阶段的花含玫瑰精油最高(×) (3)油水混合物中加入无水硫酸钠,有利于分离油层(×) (4)乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取(×) (5)萃取的效率主要取决于萃取时的温度和时间(×)
(6)新鲜的胡萝卜含水量高,干燥时可采用高温以节省时间(×)
考点一植物组织培养和花药离体培养
[自主排查]
1.连线生长素和细胞分裂素在使用顺序及用量的比例不同时对实验结果的影响
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