2.4 供试品溶液的制备
称取样品莪术粉末（过2号筛）1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25 ml，密塞，超声处理30 min，放冷，补重，滤过，滤液过0.45 μm滤膜备用。
2.5 线性关系考察
分别精密吸取对照品溶液（0.047 5 mg/ml） 2，6，12，14，20 μl进行色谱测定，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积（mAU）对应牻牛儿酮进样量μg（X）进行线性回归，得回归方程Y=3 043.5X+3.196，r=0.999 9（n=6），表明牻牛儿酮在0.095～0.95 μg范围内具有良好的线性关系。
2.6 精密度实验
分别精密吸取上述牻牛儿酮对照品溶液10 μl，连续进样6次。测峰面积，结果RSD为0.14%（n=6），表明精密度良好。
2.7 重复性实验
按上述样品液溶制备方法和色谱条件，对同一批样品平行实验6份，得平均含量为0.733 7 mg/g，RSD为0.92%（n=6），表明本方法有较好的重复性。
2.8 稳定性实验
精密吸取同一供试品10 μl，按上述色谱条件，分别在0，2，4，6，8，12，24 h测定峰面积，结果RSD为1.14%（n=6），表明24 h内稳定。
2.9 回收率实验
称取水煮莪术号样品6份各0.5 g，精密称定，精密加入牻牛儿酮对照品（0.475 mg/ml）储备液1 ml。按供试品溶液制备项下操作，按上述色谱条件测定含量，计算回收率，得平均回收率为101.86%，RSD为2.2%（n=6）。结果见表1。表1 加样回收率考察结果（略）
2.10 样品测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，记录峰面积。结果见图1。计算含量见表2。表2 广西莪术不同炮制品牻牛儿酮含量（略）
3 讨论
提取溶剂的选择 分别选用甲醇、乙醇为溶剂，进行超声提取，结果表明两种溶剂的提取含量差异性不大，由于乙醇为无毒性溶剂，故选用乙醇为提取溶剂。
提取时间的选择：分别进行了超声提取时间15，30，45 min的比较，结果表明30 min和45 min提取含量较高且差异性不大，故选用超声提取30 min。
通过使用HPLC方法对广西莪术的3种传统炮制品和3种微波炮制品中牻牛儿酮含量的测定，实验结果表明不同的炮制方法和不同的微波炮制热力学参数对广西莪术中牻牛儿酮含量有明显的影响，选择适当的微波炮制热参数条件的微波炮制品与传统炮制方法醋制品中牻牛儿酮含量相同，为筛选莪术微波炮制工艺提供了有一定价值的实验参考数据，其药效作用比较有待下一步研究。
【参考文献】
［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京:化学工业出版社,2005:194.
［2］邓家刚,韦松基.广西道地药材［M］.北京：中国中医药出版社，2007:364.
［3］刘 雯,王 建,张 炜,等.广西不同产地莪术挥发油的含量测定及其GC-MS分析［J］.广西中医学院学报,2006,9(3)：73.
［4］王 建,刘 雯,张 炜,等.广西不同产地莪术中吉马酮的含量比较［J］.时珍国医国药,2009,20(5):1091.