1 材料和方法
1.1 材料 收集滨州医学院附属医院2007年6月—2008年5月手术切除经病理证实的57例非小细胞肺癌组织标本。所有患者术前均未进行化疗，其中男35例，女22例；年龄43～75岁，平均58.6岁，≤58岁30例，＞58岁27例。肿块为中央型21例，周围型36例；组织学类型：鳞癌16例，腺癌24例，细支气管肺泡癌17例；分化程度高分化16例，中分化18例，低分化23例；淋巴结有转移34例，无转移23例；临床分期根据2002年国际癌症防治联合会（UICC）制定的标准进行TNM分期，其中Ⅰ期18例，Ⅱ期26例，Ⅲ～Ⅳ期13例。
1.2 试剂与方法 鼠抗人LRP、TOPOⅡ和GST?π单克隆抗体，S?P免疫组化即用型试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司。石蜡标本4 μm连续切片，严格按照说明书染色步骤分别进行LRP、TOPOⅡ和GST?π免疫组化染色，用PBS代替一抗作阴性对照，用已知阳性的乳腺癌作阳性对照。
1.3 结果判定 LRP、GST?π阳性表达位于胞浆，TOPOⅡ阳性表达位于胞核，均以出现棕黄色颗粒为阳性标志。
1.4 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件进行χ2及精确概率法等检验，P＜0.05为差异有显著意义。
2 结果
57例NSCLC中LRP、TOPOⅡ和GST?π的阳性表达率分别为68.42%、66.67%和84.21%，三者在癌组织中的表达均与病人的年龄、性别、肿瘤的大体类型、淋巴结转移以及临床分期无相关关系（P＞0.05）。LRP、TOPOⅡ和GST?π的表达均与肿瘤的分化程度密切相关，其中LRP和GST?π在低分化癌中表达显著低于高分化者（χ2=11.20，χ2=4.94，P＜0.05）。TOPOⅡ在低分化癌中表达显著高于高分化者（χ2=9.37，P＜0.05），且TOPOⅡ的表达与组织学类型有相关关系，在鳞癌中的表达显著高于腺癌和支气管肺泡癌（χ2=7.34，P＜0.05）。免疫组化结果见图1～4。非小细胞肺癌中LRP、TOPOⅡ和GST?π的表达与临床病理资料的关系见表1。
3 讨论
肺癌高居全球癌症死亡率之首，严重威胁人们的生命健康。对化疗的抵抗仍是肿瘤化疗效果不理想的关键问题，多药耐药性是最为常见的原因。多药耐药（MDR）基因是指肿瘤细胞对分子结构不同、作用机制各异的抗肿瘤药物产生交叉耐药。MDR基因的过度表达或扩增往往导致肿瘤患者化疗的失败, 并伴随病情的发展或肿瘤复发及转移［2］，其机制很复杂，涉及细胞的凋亡、药物转运过程和细胞解毒作用等方面。
LRP是构成人体穹窿蛋白的主要成分，正常情况下主要分布于体腔上皮、分泌器官等与异物接触的组织中，清除外源性物质，起保护作用。研究证实LRP参与多种肿瘤对化疗药物的耐药［3］，LRP的阳性表达提示对化疗不敏感。目前认为LRP引起多药耐药的机制主要有：第一，它使那些以细胞核为靶点的药物不能通过核孔进入胞核，有些药物即使进入胞核也很快被运回到胞质中，降低了药物分布的核质比率；第二，可使进入胞质的药物转运到运输囊泡中，通过胞吐的方式排出细胞外，从而产生耐药［4］。GST是一多基因家族，目前发现有5种同工酶（α、μ、π、θ和膜结合型），是一种多功能药物代谢酶，GST?π是同工酶中表达最高的一种，可催化亲电物质（如抗癌药物）与谷胱甘肽（GSH）结合，将抗癌药物排出细胞，使肿瘤细胞对抗癌药物的代谢和运输能力增强，从而产生耐药；GST?π本身还可以与亲脂性细胞毒性药物结合增加其水溶性，促进药物代谢，降低抗癌药物的细胞毒性作用，导致耐药。本研究中LRP、GST?π的阳性表达率分别为68.42%、84.21%，提示NSCLC存在着原发性耐药，LRP、GST?π参与了NSCLC的固有耐药。LRP、GST?π的表达与组织的分化程度相关，低分化中的表达显著低于高、中分化，高中分化之间表达无差异性，提示癌组织分化程度越低，对化疗药物越敏感。姬明丽等［5］也发现相同的表达规律，并提出LRP、GST?π在NSCLC的固有化疗耐药机制中起一定作用，参与NSCLC对环磷酰胺、顺铂+5?Fu、阿霉素的耐药性。其中LRP参与了阻止顺铂、5?Fu等对肿瘤细胞DNA的破坏，且通过胞吐作用限制阿霉素作用的转录，GST?π阳性则提示对顺铂、阿霉素、氮芥、环磷酰胺等药物疗效不佳。Hida等［6］报道化疗前低GST?π水平的NSCLC患者对含顺铂联合方案的敏感性显著高于高水平者。