微生物限度检查方法验证方案(2)

2020-05-06 10:54

(cfu) 2 平均 1 菌液组(cfu) 2 平均 1 稀释剂对照组(cfu) 2 平均 1 供试品对照组(cfu) 2 平均 试验组回收率(%) 稀释剂对照组回收(%) 结论 检查人/日期 第二次: 样品名称 规格 生产商 复核人/日期 试验日期 样品批号 类别 □ 保温振摇法 □ 研钵法 □ 匀浆仪 档 min □ 水溶性供试品:供试品 g(ml),加稀释剂 ml,制成1: 供试液;取供试液 ml,冲洗次数 次,每膜 冲洗量 ml。 供试液的制备□ 非水溶性供试品:供试品 g(ml),加乳化剂(名及处理 称 ;批号 ) g(ml),加稀释剂 ml,制成1: 供试液;取供试液 ml,冲洗次数 次,每膜冲洗量 ml。 □ 其它: 。 技术方法 培养基名称 配制批号 培养温度 培养起止时间 菌种名称菌 大肠埃希菌 细菌计数 营养琼脂培养基 金黄色葡萄球 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 霉菌和酵母菌计数 玫瑰红钠琼脂培养基 黑曲霉 菌种编号 菌悬液批号 菌液稀释倍数 1 试验组(cfu) 2 平均 1 菌液组(cfu) 2 平均 1 稀释剂对照组(cfu) 2 平均 1 供试品对照组(cfu) 2 平均 试验组回收率(%) 稀释剂对照组回收(%) 结论 检查人/日期 第三次: 样品名称 规格 生产商 复核人/日期 试验日期 样品批号 类别 □ 保温振摇法 □ 研钵法 □ 匀浆仪 档 min □ 水溶性供试品:供试品 g(ml),加稀释剂 ml,制成1: 供试液;取供试液 ml,冲洗次数 次,每膜 冲洗量 ml。 供试液的制备□ 非水溶性供试品:供试品 g(ml),加乳化剂(名及处理 称 ;批号 ) g(ml),加稀释剂 ml,制成1: 供试液;取供试液 ml,冲洗次数 次,每膜冲洗量 ml。 □ 其它: 。 技术方法 培养基名称 细菌计数 营养琼脂培养基 霉菌和酵母菌计数 玫瑰红钠琼脂培养基 配制批号 培养温度 培养起止时间 菌种名称菌 菌种编号 菌悬液批号 菌液稀释倍数 1 试验组(cfu) 2 大肠埃希菌 金黄色葡萄球 枯草芽孢杆菌 复核人/日期 白色念珠菌 黑曲霉 平均 1 菌液组(cfu) 2 平均 1 稀释剂对照组(cfu) 2 平均 1 供试品对照组(cfu) 2 平均 试验组回收率(%) 稀释剂对照组回收(%) 结论 检查人/日期 4.4.5控制菌检查方法验证方法:

4.4.5.1 根据各品种项下微生物限度标准中规定检查的控制菌,选择相应验证的菌株,验证大肠菌群检查法时,采用大肠埃希菌作为验证菌株。验证试验分3组,分别用3个不同批号样品或同一批号样品进行3次独立的平行试验。

4.4.5.2试验组:

4.4.5.2.1 平皿法:取1:10的供试液10ml(相当于供试品1g、1ml、10cm2)和1ml试验菌液(含菌10~100CFU)加入同一增菌培养基中,按相应控制菌的检查方法进行检查。

4.4.5.2.2薄膜过滤法:取1:10的供试液10ml(相当于供试品1g、1ml、10cm2),按薄膜过滤法过滤(水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜,油类供试品,其滤膜和过滤器在使用前应充分干燥)。用适宜的冲洗液冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量约100ml,总冲洗量不得超过1000ml,在最后一次冲洗液中加入1ml试验菌液(含菌10~100CFU),滤过,取出滤膜,放入增菌培养基中,按相应控制菌的检查方法进行检查。

4.4.5.3 阳性对照:取1ml试验菌液(含菌10~100CFU),加入增菌培养基中,按相应控制菌的检查方法进行检查。

4.4.5.4 阴性对照:取10ml稀释剂或缓冲液替代供试液,加入增菌培养基中,按相应控制菌的检查方法进行检查。

4.4.5.5结果判定:在3次独立的平行试验中,阳性对照组应检出试验菌,阴性菌对照组应无菌生长。若试验组检出试验菌,按此供试液制备法和控制菌检查法进行供试品的该控制菌检查;若试验组未检出试验菌,应采用薄膜过滤法、培养基稀释法、离心沉淀集菌法、中和法等方法或联合使用上述方法消除供试品的抑菌活性,建立新的方法,并重新验证。

4.4.5.6控制菌检查方法验证结果: 第一次: 控制菌名称 样品名称 规格 生产商 试验日期 样品批号 类别 □ 保温振摇法 □ 研钵法 □ 匀浆仪 档 min □ 水溶性供试品:供试品 g(ml),加稀释剂 ml,制成1: 供试液;取供试液 ml,冲洗次数 次,每膜 冲洗量 ml。 供试液的制备□ 非水溶性供试品:供试品 g(ml),加乳化剂(名及处理 称 ;批号 ) g(ml),加稀释剂 ml,制成1: 供试液;取供试液 ml,冲洗次数 次,每膜冲洗量 ml。 □ 其它: 。 培养基名称 培养时间 培养起止时间 试验组 复核人/日期 菌落生长情况 阳性对照 阴性对照 结论 检查人/日期 第二次: 控制菌名称 样品名称 规格 生产商 试验日期 样品批号 类别 □ 保温振摇法 □ 研钵法 □ 匀浆仪 档 min □ 水溶性供试品:供试品 g(ml),加稀释剂 ml,制成1: 供试液;取供试液 ml,冲洗次数 次,每膜 冲洗量 ml。 供试液的制备□ 非水溶性供试品:供试品 g(ml),加乳化剂(名及处理 称 ;批号 ) g(ml),加稀释剂 ml,制成1: 供试液;取供试液 ml,冲洗次数 次,每膜冲洗量 ml。 □ 其它: 。 培养基名称 培养时间 培养起止时间 试验组 菌落生长情况 阳性对照 阴性对照


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