当两者同处一个细胞内(部分二倍体)，两个lac突变体
互补了，形成Lac+
?互补作用：
顺反子互补也可以多肽形式出现，例如M13克隆体系就是一个典型的例子。
Lac缺失突变lacZ(?M13)简称M15
↓
合成一种缺失了11-41氨基酸的缺陷性的?-半乳糖苷酶，又称M15多肽。
这段缺失使该酶失去了四聚化作用的能力。
遗传标记 lacZ?M15：缺失突变体，缺失lacZ基因中的?-半乳糖苷酶N端部分编码序列。?M15所表达的小肽可以参与?互补。M13 phage的许多寄主菌所携带的F?附加体都有这种缺失的lacZ基因变种。
但是，在体外加入野生型的?-半乳糖苷酶的溴化氰片段
(cyanogens bromide fragment)(2-92氨基酸)就可以使M15多肽的活性得以恢复，重新获得形成四聚体的能力。因此说溴化氰自然补偿了lacZ
基因的M15突变，这种作用叫做?-互补作用：
其中M15蛋白质多肽叫 ?-受体
溴化氰片段叫 ?-给体
M13-JM101互补作用：
实验发现，用一种特定的?-半乳糖苷酶的HindII片段代
替溴化氰片段，同样也可以发生?-互补。 在M13-JM101克隆体系中；
M13噬菌体载体具有lac HindII片段， JM101 F质粒具有M15突变基因。
所以M13-JM101是可以实现?-互补作用的；可形成具功
能活性的?-半乳糖苷酶。
克隆基因活性的调节：
M13载体所携带的HindII片段上具有：
lacI? lac启动子(P) lac操纵位点(O) lacZ?(?-肽链)
4 个组成部分，简称lacZOPI片段。 *HindII片段=lacZOPI片段
*由上述可见M13-HindII片段上不带有功能性的阻遏基因。所以在被感染的细胞中，?-半乳糖苷酶的合成将是组成型的：
因为当M13噬菌体颗粒感染了E.coli细胞之后，很快就会累积约200个RF DNA/cell；假若其上带有HindII片段，那么普通的lac+细胞的阻遏状态将会随着HindII片段的复制而得以消除；这是因为每个细胞中都仅存有10个左右的阻遏物分子的缘故。结果在感染的细胞中，lac结构基因的转录活动便属于组成型的。 *从组成型到诱导型的改造
为了克服这种组成性，已将lac阻遏基因的Iq突变引入寄主细胞。这个Iq突变基因可以产生出十余倍超量的阻遏物，所以这种突变的存在，寄主细胞就能合成出充足的阻遏物去补偿大量的M13 RF DNA分子。在具有lacIq突变基因的寄主细胞中，给lac操纵子加入一种诱导物，典型的是IPTG，就可以激活HindII片段的复制。
IPTG分子结构式
IPTG的作用：
*是一种含硫的乳糖类似物。IPTG：isopropylthio-?-D-galactoside异丙基硫代-?-D-半乳糖苷。
*这种类似物在没有乳糖的条件下，它可以诱导细胞合成?-半乳糖苷酶。所以我们称IPTG为?-半乳糖苷酶的安慰诱导物(gratuitous inducer)，亦即不发生代谢变化的诱导物。 *在X-gal显色反应中，?-半乳糖苷酶同样也需要诱导，但X-gal不是一种诱导物，所以得在琼脂平板上加入IPTG。 JM101寄主菌株(及其它类似菌株)：
在M13克隆体系中常用JM101菌株作寄主，该菌株染色体上的lacZ基因已经缺失了，但在它携带的F质粒上有一个M15基因和lacIq突变，这有两个方面的作用：
*第一，可以产生出超量的lac阻遏物，这就使得lac操纵子的表达置于培养基中渗入的IPTG的调控之下。
*第二，当M13载体感染之后，通过?-互补作用，便会形成有功能活性的?-半乳糖苷酶。在补加X-gal及IPTG的培养基中，就会出现蓝色的菌落。
3．M13载体系列的发展
M13噬菌体要发展成克隆载体。着选必须鉴定出可用来克隆外源DNA的非必要区段，然而它似乎不存在这种区段。 *特殊区段的发现——M13唯一的基因间区段的发现。
该区段位于Gene2和Gene4之间，长507核苷酸，(5498-6005)
该区段上存在着M13 DNA复制起点，但就噬菌体的发育功能而言，并不要求保持该区段的完整性。
*M13 mp1载体的获得
在M13唯一的基因间区段内有一个BsuI位点，将乳糖操纵子的HindII片段克隆在该位点上，获得了M13mp1载体。M13载体系列命名为MBmpn。其中n为整数，如M13mp8，M13mp9等。 *M13mp2载体的获得——EcoRI位点的引入
M13mp1载体的获得在M13载体发展工作中占有十分重要的地位，随后出现的一系列M13载体都是在它的基础上经改建派生出来。