茚三酮,用玻璃球盖住试管口,置沸水浴中。同时,以80%乙醇代替滤液,做空白。反应15min,将空白及样品从沸水浴中取出,在冷水中冷却。为避免加热中各管溶液蒸发减少而影响测定结果,在加热后添加蒸馏水至原刻度处。 (4)比色 以80%乙醇为参比液,在分光光度计515nm波长下测定样品反应液的光密度,根据光密度值从标准曲线上查出样品液的脯氨酸浓度。
(5)标准曲线制作 用标准脯氨酸溶液配置成含脯氨酸0、2、4、6、8、12、16、20μg/mL的溶液。按上述相同方法取各浓度溶液、冰醋酸、酸性茚三酮显色、比色。以脯氨酸浓度为横坐标,光密度为纵坐标绘制标准曲线。 1.2.3.2.4丙二醛(MDA)含量的测定
(1)MDA的提取 取叶片数片剪碎后称取1g置研钵中,加2mL10%TCA和少许石英砂,研磨成匀浆,加入8mL10%TCA继续研磨均匀。匀浆在3000×g下离心10min,上清液即为提取液。
(2)显色测定 取10mL刻度试管2支,一支加入上清液3mL,另一支加入TCA 3mL(空白),各加0.5%的TBA溶液3mL,摇匀,在沸水浴中煮沸10min(溶液出现小气泡时开始计时),立即在冷水中冷却。如有沉淀,应离心。以空白做参比,在分光光度计430nm、532nm、600nm下测定样品反应液的吸光度值。
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2.结果与分析
2.1 幼苗形态指标的测定
表2-1 烯效唑浸种处理对小麦形态指标的影响
处理浓度(mg/L) 株高(cm)
0 10 20 40
2.54 1.64 1.42 1.40
根长(cm) 3.91 4.08 3.95 5.20
根数(条) 根冠比(R/T) 13.6 11.0 9.4 9.7
0.085 0.492 0.567 0.560