蛭弧菌及其在水产养殖业的应用
(四)蛭弧菌的生活周期与生活史
国外学者对蛭弧菌的生活周期作了大量研究工作,尤其是近几年又从微观水平上对蛭弧菌的生活周期开展了大量研究工作,如Nunez等人利用原子力显微镜观察研究了蛭弧菌109J的生活周期;Rendulic等人从基因水平上对蛭弧菌的生活周期进行了研究;Beck、Barel等人研究发表了蛭弧菌宿主体内增长时产生在蛋白等。Thomashow等提出了。蛭弧菌的穿入、稳定、裂解”模型,即首先蛭弧菌通过化学趋避性识别,并吸附宿主细菌,然后通过酶解和机械钻孔等一系列反应,进入宿主细菌的质壁空间或细胞质,对宿主细胞进行一系列的修饰与改造,同时进行自身生物大分子合成,最终分裂形成子代蛭弧菌并释放到宿主细胞外。 蛭弧菌为细胞内寄生物,整个生活周期可分为识别、侵入、穿入宿主菌体、生长发育、裂解宿主、释放子代蛭弧菌。
蛭弧菌的生长过程可分为两个时期:具有1根有外鞘的极生鞭毛和高度的运动性的攻击期扩鞭毛脱落,不具有运动性的生长周期。攻击期时,其与宿主菌激烈碰撞,以没有鞭毛的一端直接吸附到宿主细菌上,菌体转动速度超过200r/s,在此之后,鞭毛脱落,然后释放出多种酶以穿透宿主细胞壁的小孔右进入到细胞内,和细胞膜之间或直接进入细胞间质中。侵入过程仅几秒钟。穿入宿主菌后,鞭千周消失,整个过程最长为60分钟。宿主菌则因渗透压改变而涨大成圆球状,且立即死亡,面为蛭弧菌的生长空间。它利用宿一的原生质为养分生长,经过一定时间后,宿主营养被完全吸收,长螺旋状的菌体均等二分裂出许多带鞭毛的子代,它们可以重新浸染宿主,开始下一个循环过程。完成这一增殖的全过程约需4小时~6小时。在饥饿等特殊情况下,蛭弧菌会进入囊体周期。
(五)蛭弧菌的生态学特点
蛭弧菌在自然界的分布较广,其含量通常在夏季较高,而在冬季较低。土壤、植物根际、河水、海水、湖水、井水及下水道污水中都有蛭弧菌的分布,并能从陆生动物、水生动物或人的粪便中分离到蛭弧菌。但在清洁的自来水、泉水中很难检出。水生蛭弧菌属倾向于表面生长,是生物膜的重要组成成分。
(六)蛭弧菌的保藏
蛭弧菌的保藏关系到其规模化生产和应用。国外的研究表明,用含宿主细胞的YP培养基保藏蛭弧菌,在4个~8个月内仍有一定活性。国内的研究表明,在4℃条件下,用自来水宿主软琼脂保藏时,至少可存活3个月以上;黄文等人用4℃甘油、4℃NB液、平板、-20℃甘油和冷冻干燥等5种方法保蒇蛭弧菌,发现冷冻干燥法最好,21个月的复洗率达100%,且复活后的形状和噬菌特性不变;其次为-20℃甘油NB液保存法,17全月的复活率为67%;其它方法的保存时间也平均超过3个月。
(七)蛭弧菌的噬菌条件
大量研究表明,蛭弧菌对pH、温度等环境因子的要求并不严格。邵桂元等人作了鱼病蛭弧菌的微生态学初步研究,发现蛭弧菌Bds-4等菌株在4℃~37℃和pH6.0~8.0的条件下。对点状产气单胞菌有形成噬菌斑的能力。李戈强等人经研究指出,蛭弧菌在温度10℃~35℃和pH6.5~8.1的范围内,对河流蛭弧菌均有裂解作用;在25℃~30℃和pH6.5~8.1时的裂解作用最强。马志宏等人也经过研究认为蛭弧菌对环境条件的适应性强,对温度和PH的适应范围较广。
(八)蛭弧菌的除菌效果
秦生巨等人的研究认为,蛭弧菌在河水中21天后,可使不凝集弧菌由4.46×106个/