分级沉淀实验计算考题:
1、室温下取20mL酶液进行酶的分级沉淀提取实验,沉淀剂选用硫酸铵。若一次沉淀硫酸铵的饱和度浓度达40%,需向酶液添加固体硫酸铵多少克?离心分离后,上清酶夜的体积为23mL,若要使上清液硫酸铵的饱和度提高至70%进行二次沉淀提取,需补加固体硫酸铵多少克?(计算过程需利用57页附表2硫酸铵饱和度的常用表)
答案:4.84g; 4.71g。
2、用20mL酶液进行酶的分级沉淀提取实验,已知原酶液蔗糖酶总活力为200U。酶液经一次盐析沉淀离心分离后,沉淀物溶解液为7mL,测得酶活力5 U/mL,求:
(1)7mL酶液蔗糖酶总活力。
(2)一次沉淀酶的提取率?
答案:35/200=17%
(3)经二次盐析沉淀后,离心分离沉淀物溶解液为8.5mL,酶活力10 U/mL。求:
酶液蔗糖酶总活力;及二次沉淀后酶的提取率?
答案:85U; 酶提取率:85/200*100=42.5%
思考:哪次沉淀条件有利于蔗糖酶的提取。
三、酶液比活力计算
已知:(1) 50mL酶液,其蔗糖酶活力为10U/mL,蛋白质含量20mg/mL。计算酶液的总活
力及比活力。
答案:总活力=500U;比活力=0.5
(2) 50mL酶液,其蔗糖酶活力为8U/mL,蛋白质含量5mg/mL。计算酶液的总活力
及比活力。
答案:总活力=400U;比活力=1.6
根据计算结果评价两酶液的纯度。
2学术部整理 答案:35U(酶活单位);