5、白质一级结构的测定原理是什么？
6、一双链DNA的一条链中[A]=0.3，[G]=0.24，问： 1) 该条链中的[T]和[C]是多少？
2）该条链的互补链中，[T]、[C]、[A]和[G]应是多少？
参考答案：
1、叙述酶的三种可逆性抑制作用的特点，并作出双倒数图形特征曲线。
答：1）、竞争性抑制的特点： A竞争性抑制剂往往是酶的底物类似物或反应产物；B 抑制剂与酶的结合部位与底物与酶的结合部位相同；C 抑制剂浓度越大，则抑制作用越大；但增加底物浓度可使抑制程度减小；D动力学参数：Km值增大，Vm值不变。
2）、非竞争性抑制的特点：A非竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似；B 底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合； C抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响； D动力学参数：Km值不变，Vm值降低。
3）、反竞争性抑制的特点：A反竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似；B抑制剂与底物可同时与酶的不同部位结合；c必须有底物存在，抑制剂才能对酶产生抑制作用；抑制程度随底物浓度的增加而增加；D动力学参数：Km减小，Vm降低。 4）、图形特征（略）
2、简述蛋白的分离纯化过程。
蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤： （一）材料的预处理及细胞破碎
分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有： 1.机械破碎法
这种方法是利用机械力的剪切作用，使细胞破碎。常用设备有，高速组织捣碎机、匀浆器、研钵等。 2.渗透破碎法
这种方法是在低渗条件使细胞溶胀而破碎。 3.反复冻融法
生物组织经冻结后，细胞内液结冰膨胀而使细胞胀破。这种方法简单方便，但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。
4.超声波法
使用超声波震荡器使细胞膜上所受张力不均而使细胞破碎。 5.酶法
如用溶菌酶破坏微生物细胞等。 (二)蛋白质的抽提
通常选择适当的缓冲液溶剂把蛋白质提取出来。抽提所用缓冲液的pH、离子强度、组成成分等条件的选择应根据欲制备的蛋白质的性质而定。如膜蛋白的抽提，抽提缓冲液中一般要加入表面活性剂（十二烷基磺酸钠、tritonX-100 等），使膜结构破坏，利于蛋白质与膜分离。在抽提过程中，应注意温度，避免剧烈搅拌等，以防止蛋白质的变性。 （三）蛋白质粗制品的获得
选用适当的方法将所要的蛋白质与其它杂蛋白分离开来。比较方便的有效方法是根据蛋白质溶解度的差异进行的分离。常用的有下列几种方法： 1.等电点沉淀法
不同蛋白质的等电点不同，可用等电点沉淀法使它们相互分离。 2.盐析法
不同蛋白质盐析所需要的盐饱和度不同，所以可通过调节盐浓度将目的蛋白沉淀析出。被盐析沉淀下来的蛋白质仍保持其天然性质，并能再度溶解而不变性。 3.有机溶剂沉淀法
中性有机溶剂如乙醇、丙酮，它们的介电常数比水低。能使大多数球状蛋白质在水溶液中的溶解度降低，进而从溶液中沉淀出来，因此可用来沉淀蛋白质。此外，有机溶剂会破坏蛋白质表面的水化层，促使蛋白质分子变得不稳定而析出。由于有机溶剂会使蛋白质变性，使用该法时，要注意在低温下操作，选择合适的有机溶剂浓度。 （四）样品的进一步分离纯化
用等电点沉淀法、盐析法所得到的蛋白质一般含有其他蛋白质杂质，须进一步分离提纯才能得到有一定纯度的样品。常用的纯化方法有：凝胶过滤层析、离子交换纤维素层析、亲和层析等等。 有时还需要这几种方法联合使用才能得到较高纯度的蛋白质样品。 3、简述原核生物蛋白质合成过程。
氨基酸在核糖体上缩合成多肽链是通过核糖体循环而实现的。此循环可分为肽链合成的起始(intiation)，肽链的延伸(elongation)和肽链合成的终止(termination)三个主要过程。原核细胞的蛋白质合成过程以E.coli细胞为例。 肽链合成的起始
1.三元复合物(trimer complex)的形成核糖体30S小亚基附着于mRNA的起始信号部位，该结合反应是由起始因子3(IF3)介导的，另外有Mg2+的参与。故形成IF3-30S亚基-mRNA三元复合物。
2.30S前起始复合物(30S pre-initiation complex)的形成在起始因子2(IF2)的作用下，甲酰蛋氨酸-起始型tRNA(fMet-tRNA
Met)与mRNA分子中的起始密码子(AUG或GUG)相结合，即密码子与反密码子相互反应。同时IF3从三元复合物脱落，形成30S前起始复合物，即IF2-30S亚基-mRNA-fMet-tRNAMef复合物。此步亦需要fGTP和Mg2+参与。
3.70S起始复合物(70S initiation complex)形成。50S亚基与上述的30S前起始复合物结合，同时IF2脱落，形成70S起始复合物，即30S亚基-mRNA-50S亚基-fMer-tRNA Met复合物。此时fMet-tRNA Met占据着50S亚基的肽酰位（peptidyl site，简称为P位或给位），而50S的氨基酰位（aminoacyl site，简称为A位或受位）暂为空位。 原核细胞蛋白质合成的起始过程氨基酸活化（fMet-tRNAMet形成） 关于原核细胞蛋白质生物合成的起始过程讨论以下几点:
1.核糖体亚基(30S和50S):70S核糖体颗粒必须解离为亚基，才能参与形成30S前起始复合物及70S起始复合物，IF3除具有形成三元复合物活性外，也具有使70S核糖体颗粒解离为30S和50S亚基的作用，即解离因子活性(disassociation factor activity)。
2.IF:用高浓度的盐(如0.5mol/LKCl)洗涤核糖体，可使核糖体解离为亚基，但这些核糖体亚基在蛋白质生物合成的起始阶段没有活性。后来从盐洗涤液中分离出三种蛋白质因子，当把这三种因子加入盐洗过的核糖体后，核糖体再现了活性，故将这三种蛋白质因子依次命名为IF1、IF2和IF3.在70S起始复合物形成后，无任何IF与之结合。IF的生物学活性见下表。值得一提的是IF1无特异功能，仅具有加强IF2和IF3的活性作用，这种广泛的效应亦称为基因多效性。 4、简述糖的有氧氧化过程以及其生理意义
糖的有氧氧化阶段分为几个阶段？发生的部位和意义？
答：指葡萄糖在有氧的情况下彻底氧化成水、二氧化碳及能量的过程。这是糖氧化的主要方式，是机体获得能量的主要途径。主要分为三个阶段：
第一阶段：葡萄糖分解成丙酮酸，在胞液中进行；
第二阶段：丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA，在线粒体进行；
第三阶段：乙酰CoA进入三羧酸循环和氧化磷酸化，在线粒体进行。
糖的有氧氧化生理意义：①氧化供能②三羧酸循环是糖、脂和蛋白质三大物质代谢的最终代谢通路。糖、脂和蛋白质在体内代谢都最终生成乙酰辅酶A，然后进入三羧酸循环彻底氧化分解成水、CO2和产生能量。③三羧酸循环是糖、脂和蛋白质三大物质代谢的枢纽。
5、 蛋白质一级结构的测定原理是什么？
答：一级结构的测定多半用小片段重叠的原理，即用两种或两种以上不同的方法将蛋白质多肽链水解，各自得到一系列肽段，然后将这些肽段分离纯化，分别测定这些肽段的氨基酸序列， 最后比较这些肽段之间的重叠关系，从而推出整个蛋白质分子中氨基酸的序列
6、一双链DNA的一条链中[A]=0.3，[G]=0.24，问： 1) 该条链中的[T]和[C]是多少？
2）该条链的互补链中，[T]、[C]、[A]和[G]应是多少？ 解：根据碱基等比规律，[A]+[G]=[T]+[C] 1) [T]+[C]=1-0.3-0.24=0.46
2) T=0.3 C=0.24, A+G=0.46
《细胞生物学》
1.细胞通讯主要有那三种方式？并加以分析？ 参考答案：
细胞有三种通讯方式 ： ①通过信号分子；
②通过相邻细胞间表面分子的粘着或连接； ③通过细胞与细胞外基质的粘着。
在这三种方式中，第一种不需要细胞的直接接触，完全靠配体与受体的接触传递信息，后两种都需要通过细胞的接触。所以可将细胞通讯的方式分为两大类：①不依赖于细胞接触的细胞通讯；②依赖于细胞接触的细胞通讯。 2：[论述题]
光 光面内质网是如何参与肝细胞维持血液中葡萄糖水平的恒定?
参考答案：
光面光面内质网是如何参与肝细胞维持血液中葡萄糖水平的恒定? 肝细胞的一个重要功能是维持血液中葡萄糖水平的恒定, 这一功能与葡萄糖-6-磷酸酶的作用密切相关。肝细胞是以糖原颗粒的形式储存葡萄糖，肝细胞光面内质网的胞质溶胶面附着有糖原颗粒,当肌体需要葡萄糖时，糖原即被降解。肝细胞中的糖原降解是受激素控制的，激素作为信号分子激发cAMP的浓度升高，然后由cAMP激活蛋白激酶A，蛋白激酶A能够激活将糖原水解生成1-磷酸葡萄糖的酶。由于1-磷酸葡萄糖不能够通过扩散穿过细胞质膜进入血液，需要先转变成葡萄糖-6-磷酸，然后由光面内质网中的葡萄糖-6-磷酸酶将葡萄糖-6-磷酸水解生成葡萄糖和无机磷，释放游离的葡萄糖进入血液, 维持血液中葡萄糖水平的恒定。
3：[论述题]
简述细胞质基质的功能？ （1
参考答案：
(1）中间代谢反应的进行；
（2）细胞形态与运动、胞内物质运输及大分子定位； （3）蛋白质的修饰与选择性降解；
（4）维持细胞内环境(pH、离子环境)的稳定性。 1：[论述题]
论述胚胎干细胞的用途？
参考答案： 2：[论述题]
简述癌细胞的生物学特征？
参考答案：
癌细胞的基本生物学特征：
（1）细胞生长与分裂失去控制，具有无限增殖能力，成为\永生”细胞。
（2）具有扩散性：A、癌细胞的细胞间粘着性下降，具有侵润性和扩散性，这是癌细胞的基本特征。 B、在分化程度上癌细胞低于良性肿瘤细胞，且失去了许多原组织细胞的结构和功能。 （3）细胞间相互作用改变（识别改变；表达水解酶类；产生新的表面抗原）。 （4）蛋白表达谱系或蛋白活性改变（胚胎细胞蛋白、端粒酶活性升高）。 （5）mRNA转录谱系的改变（少数基因表达不同；突变位点不同，表型多变）。