A.3.1.1如果使用存活曲线数据来确定作用时间，那么达到最大存活值(10)所要求的作用时间可以由置信界限值
?2
计算而来。在这种情况下，阳性BI的概率将大大降低，但绝不会是零。例如，如果产品的生物负载高达100个微生
?
物，那么BI和8 SLR将使SAL为106。
确定过程杀灭力时可以使用几种类型的计算方法。包括计算过程的SLR、芽孢D值和灭菌过程的SAL结果。计算说明见下文。
SLR是用于预计医疗器械或被灭菌物品中存活微生物计数值的一种方法。可以用这个值来预计达到各种无菌保证水平的时间。
使用公式A.1来计算SLR： SLR=log(N0 )?log(Nt ) 式中
SLR 是芽孢对数下降值;
N0 是初始菌群数(例如 2.31 × 106); Nt 是时间为t时的菌群数(e.g. 36).
实例如下：
? Log N0 = log(2.31 × 106) = 6.364 ? Log Nt = log(36) = 1.556
? SLR = 6.364 – 1.556 = 4.808 ≈ 4.8
如果菌群数减少是由于30分钟EO停留时间而造成，则SLR/分钟为：
根据上述计算，对数下降值为12时EO停留时间应为：
由SLR计算出D值：
用公式A.2，由SLR计算出D值：
时间(min) 30 min D值=---------------------= ---------- = 6.25 min
SLR
4.8
(A.1) (A.2)
由D值和SLR计算出SAL：
用公式A.3, A.4和A.5，由D值和SLR计算出SAL：
假设需要的无菌保证水平为10?
6。
N0 = 106
所需要的Nt = 10?
6
所需要的SLR = log(106) ? log(10?6
) = 6 ? (? 6) = 6 + 6 = 12 时间 = (D 值) × (所需要的SLR) = 6.25 min × 12 = 75 min
如果所需要的SAL为10?3
, 那么时间为:
所需要的SLR = log(106) ? log(10?3
) = 6 ? (?3) = 9 时间 = D 值 × 所需要的SLR = 6.25 × 9 = 56.25 min
停留时间
SLR =---------------- D值
净对数下降值=SLR?log(假定初始菌群) SAL = 10
?净对数下降值
实例如下:
? 停留时间 = 120 min ? D 值 = 6.25 min ? 假定初始菌群 = 106 ? 对数假定初始菌群= 6
120 min 总SLR= ----------- =19.2 对数下降
6.25 min
净对数下降=19.2?6=13.2
SAL=10?13.2 ≈10?13
A.3.1.2 未提供指南。
(A.3)
(A.4) （A.5)
A.3.2 利用Holcomb-Spearman Karber程序的部分阴性法
Holcomb-Spearman Karber (HSK)程序有两种形式。从数学计算上讲最简单的一种是有限HSK程序。但在实践中，这种方法实施起来比无限HSK方法要难得多。
有限HSK程序是在计算机普及以前开发的，其计算是以手工进行。有限HSK程序要求做到：
a)所有时间增量相同（例如每次运转中的作用时间增量都恰好是2分钟）； b) 每次运转中的有效PCD/BI样品数目都恰好相同。
在这两项限制条件下，如果运转之间所选择的时间增量不适当，或PCD/BI样品丢失或由于某种原因不适用，那么需要重新进行整个试验系列。
无限HSK程序不具有上述限制，但其计算方法比有限HSK程序要复杂。如果用户开发了无限HSK程序的计算用表格程序并进行了确认，便不需要使用有限HSK程序。在使用无限HSK程序时，如果初始时间增量未生成部分生长样品中所需要的数目，用户只需在应该生成所需要的部分生长样品最小数目的时间另外插入一次运转即可。如果PCD/BI丢失，或由于某种原因不适用（例如跌落），只需利用有效数目的PCD/BI进行计算。Shintani等人的论文中 [23]提供了实例，为表格程序的确认提供帮助，同时提供了计算D值的95%置信上限所必需的公式。
HSK方法将生成与表A.1中数据相似的数据（分析中使用的精确点数可能与表内示例不同）。
表 A.1 — 无限HSK数据集举例
灭菌剂作用时间 ti t1 t2 t3 t4 t5 t6 t7 灭菌试验样品数 ni n1 n2 n3 n4 n5 n6 n7 显示无菌生长试验样品数 ri r1 = 0 r2 r3 r4 r5 r6 = n6 r7 = n7
注： t1 是灭菌剂最短作用时间，所有试样显示有菌生长。t2 到 t5 是量值递增的作用时间。 t6 和 t7 是所有试样显示无菌生长的前两个作用时间。
对于t1到tm?1作用时间, 其中的m 是所有BI均为阴性的第一个作用时间，系数x和y 由公式A.6 和A.7计算而来:
(A.6)
(A.7)
对于每一个作用时间来说,μi 的值是随后利用上述计算得出的xi 和yi的值，由公式确定A.8确定：
μi= xi× yi
(A.8)
任何试样达到无菌生长的作用时间可通过t1 到 tm?1各作用时间之和μi，由公式A.9计算得出：
(A.9)
平均D值可通过公式A.10计算得出：
(A.10)
式中N0 是试样的初始生物负载数。
在使用这种方法计算灭菌时间Dcalc时，应使用D值的95%置信上限。计算公式A.11为：
(A.11)
式中V 由公式A.12 和A.13计算得出:
(A.12)
(A.13)
注：―a‖的总和是在从i = 2到无菌生长的两个连续值的第一个值的所有值上确定的。公式A.12中的限值6仅用于说明的目的，假定在第一个全部杀灭数据点为止获得了6个数据点。
表A.2为非固定时间间隔和非固定样品数目数据举例。
表A.2 — 非固定时间间隔和非固定样品数目数据举例
灭菌剂作用时间 ti t1 10 t2 18 t3 28 t4 40 t5 50 t6 60 t7 70 灭菌试验样品数 ni n1 20 n2 19 n3 21 n4 20 n5 20 n6 20 n7 20 显示无菌生长试验样品数 ri r1 0 r2 4 r3 8 r4 12 r5 16 r6 20 r7 20
以下是使用HSK计算举例：
1) 计算 xi 和yi (每次作用).