选修1 生物技术实践 专题
（2010〃浙江）（10分）某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。
（1）图中用KMnO4的溶液浸泡苹果的目的是 。黑曲霉提取液中含有的 可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过 方式将酶固定化，酶被固定在用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去 。
（2）实验中，操作流程A和B的先后顺序为 。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是 。要测定从固定化柱流出的苹果汁中式否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的 混合，如果出现 现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调 。 （3）试验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被 使用。
（2010〃海南）葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：
（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是 。
（2）该微生物通过无氧呼吸可分解 ，产生的终产物是 和 。
（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是 ，导致发酵中出现的主要异常现象是 。丙同学的错误是 ，导致发酵中出现的主要异常现象是 。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是 、 、 。
（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是 。
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选修1 生物技术实践 专题
（2009〃宁夏）请回答：
（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑 、 和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、 、 等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行 （消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和 ；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能 。
（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的 。
（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的 。 （5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。
（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
（2009〃江苏）（多选）下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有（ ）
A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞 B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质 C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA D．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯
（2009〃宁夏）（10分）利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆，具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。 （1）实验步骤：
①配置 （固体、半固体、液体）培养基，该培养基的碳源应为 。 ②将 接入已灭菌的培养基平板上。
③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是 。
④菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现 现象的菌落即为初选菌落，经分离、纯化后即可达到实验目的。
（2）若已得到二株变异菌株I和II，其淀粉转化率较高，经测定菌株I淀粉酶的催化活性高，菌株II的淀粉酶蛋白含量高，经进一步研究发现，突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区，可推测出菌株I的突变发生在 区，菌株II的突变发生在 区。
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选修1 生物技术实践 专题
（2009〃广东）请回答：
（1）商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生 ，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间 表示。
（2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图
Ⅰ中的主要成分为 ；Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。
（3）为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步 、 、 。反应过程中打开模板DNA双链的方法是 。
（4）除植酸酶外，微生物还能应用在哪些酶的生产中？(至少写两种) 、 。
（2009〃山东）人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：
请回答：
（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行 。接种前，要对人参根进行 。 （2）用于离体培养的根切块，叫做 。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于 污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于 污染。
（3）用少量 酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。
（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 方法，操作时应采用 加热。
（2010〃广东）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图10），恰当的做法是（ ）
A．加入适量的酵母菌 B．一直打开阀b通气
C．一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟 D．把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验
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选修1 生物技术实践 专题
（2010〃江苏）右图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是（ ）
A．过程①和②都只能发生在缺氧条件下 B．过程①和都③只发生在酵母细胞的线粒体中 C．过程③和④都需要氧气的参与 D．过程①~④所需的最适温度基本相同 （2010〃重庆）下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是（ ）
A．大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是一个环状DNA分子 B．在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源 C．用大肠杆菌工程菌生产干扰素时，应及时添加核酸等生长因子 D．处于对数期的大肠杆菌．常作为生产用的菌种和科研的材料
（2007〃宁夏）某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。
（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 和 。除此之外，培养基还必须含有基本成分是 和 。
（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于 中培养，培养的温度设定在37 ℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验。
（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有 种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越 。
（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐 细菌，这种培养基被称为________。
（2008〃宁夏）根据从极萝卜中提取的胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质，回答下列问题。
(1)胡萝卜素是 色的结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素，常用 作为溶剂，原因是 。
(2)从胡萝卡中提取胡萝卜素常用的方法是 法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、 、 、 。
(3)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将 和 控制在一定范围内，原因是 。
(4)提取的胡萝卜素可通过 法进行鉴定，在鉴定过程中需要用 对照。 (5)一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 比。
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选修1 生物技术实践 专题
（2008〃海南）某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：
（1）图中①表示的是该花粉培养过程中的 过程，②表示的是 过程，X代表的是 ，③表示的是 过程，④表示的是诱导 过程。 （2）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中 的种类及其浓度配比，最后获得的来源于为成熟花粉的完整植株都称为 植株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明为成熟花粉具有 。
（3）对植株进行 ，才能使其结实产生后代（乙），否则植株甲只有通过 的方式才能产生后代（丙）。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是 植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为 种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为 种。花药培养在育种上的特殊意义是 ，从而开辟育种新途径。
（玉溪模拟）甘蔗含糖量高，是生产燃料酒精的优质材料。为了提高酒精产量，需要优质甘蔗品种和具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌作为理想的酒精发酵菌种。根据所学知识回答：
(1)如果要用甘蔗的外植体作为材料对甘蔗进行大规模种植，在对甘蔗外植体细胞进行接种前，需要对培养基进行 ，需要对甘蔗外植体进行 。
(2)在将外植体培养成幼苗的过程中，需要 等激素的作用。
(3)为了获得理想的酵母菌菌种，可以对野生菌种进行 ，然后采用 法将菌种接种在 (固体、半固体、液体)培养基上进行培养，该培养基要比基本培养基额外添加 ，在该培养基中形成的菌落即为耐高糖、耐酸特性的突变酵母菌。在生产酒精过程中必需控制的条件是 等。
（宁夏一中模拟）苹果醋口味酸甜,且能保健美容，是目前大众非常喜爱的饮品。下图是苹果醋的制作流程简图，请据图回答：
（1）过程②中使用到的微生物是 ,该微生物的代谢类型是 ．该微生物可以从食醋中分离纯化获得，方法是：
第一步:（配置培养基）该培养基必须含有微生物生长所需要的 等基本营养成分。 第二步：对培养基用 方法进行灭菌。
第三步:（接种）微生物常用的接种方法有 。 第四步:（培养）温度控制在 。 第五步：挑选符合要求的 。
（2）在苹果醋的制作过程中为防止杂菌污染所用发酵瓶要进行_____________________，后期发酵时通气口的阀门要及时_______。
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