A．高压蒸气灭菌 B．紫外线照射 C．巴氏消毒 D．超声波 E．滤过除菌 8．常用于饮水、游泳池水消毒的消毒剂是( )
A．高锰酸钾 B．石炭酸 C．氯化物 D．过氧乙酸 E．环氧乙烷 9．消毒剂的杀菌机制是( )
A．使菌体蛋白变性 B．使菌体蛋白凝固 C．干扰细菌酶系统 D．损伤细胞膜 E．以上全是
10．影响消毒剂的消毒灭菌效果的因素是( )
A．性质与浓度 B．温度和酸碱度 C．细菌的性质 D．环境有机物的存在 E．全是 11．关于煮沸消毒法的下列叙述，不正确的是( )
A．煮沸100℃、5min可杀死细菌繁殖体 B．可用于食具的消毒 C．可用于一般外科器械、注射器、胶管等消毒 D．煮沸100℃、15min可杀死细菌及芽胞 E．加入2％Na2CO3可使沸点提高至105℃ 12．乙醇消毒最适宜的浓度是( )
A．100％ B．95％ C．75％ D．50％ E．40％ 13．塑料和玻璃器材常用的消毒剂是( )
A．石炭酸 B．高锰酸钾 C．过氧化氢 D．70~90％乙醇 E．过氧乙酸 14．杀死细菌芽胞最常用而有效的消毒方法是( )
A．煮沸 B．干烤灭菌 C．流通蒸气灭菌 D．高压蒸气灭菌 E．超声波 15．对消毒剂的下列叙述错误的是( )
A．用于皮肤粘膜消毒 B．用于塑料和玻璃器材消毒 C．用于对地面、器具消毒 D．只能用于体外 E．能用于体外、也能用于体内 16．下列消毒灭菌方法选择，那种是错误的( )
A．金属器械一漂白粉 B．排泄物一漂白粉 C．饮水一氯气 D．含糖培养基一间歇灭菌 E．人和动物血清一滤过除菌
17．在同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好，这是因为湿热灭菌( )
A．水份多，蛋白质易凝固 B．穿透力强 C．能放出潜热 D．A+B E．A+B+C 18．与芽胞耐热特性无关的因素是( )
A．有特殊物质吡啶二羧酸 B．芽胞的位置 C．含水量少 D．有多层致密物质 E．有耐热酶 19．不可与红汞同用的消毒剂是( )
A．新洁而灭 B．乙醇 C．杜灭芬 D．碘酒 E．洗必泰 20．常用的高压蒸气灭菌法的特点是( )
A．温度升高至121．3℃ B．压力为大气压 C．原理与家用高压锅不同 D．优于干热灭菌 E．以上都不是
答案：l．A 2．B 3．E 4．C 5．C 6．E 7．E 8．C 9．E 10．E 11．D 12．C 13．E 14．D 15．E 16．A 17．E 18．B 19．D 20．A
四、问答题
1．在温度和时间相同的条件下，为什么湿热灭菌法比干热灭菌法效果好?
答：在温度和时间相同的条件下，湿热灭菌法的效果比干热法好，原因是：(1)在湿热条件下，细菌吸收水份，菌体蛋白质易于凝固变性。(2)湿热蒸气的穿透力比干热空气强，能较快提高灭菌物体的内部温度。(3)热蒸气与物品接触，由汽态变液态时可放出大量潜热，能迅速提高灭菌物体的温度
2．简述紫外线杀菌的作用机制和注意事项。
答：紫外线波长在200～300nm时具有杀菌作用，以265～266nm波长杀菌力最强。紫外线的杀菌机制主要是损伤细菌的DNA构型，干扰DNA的复制与转录，从而导致细菌死亡或变异。在使用紫外线灭菌时，应注意：
紫外线的穿透力较弱，不能透过玻璃和纸张等，因此紫外线杀菌法仅适用于空气和物体表面的消毒；紫外线对人体的皮肤和眼角膜有一定的损伤作用，所以使用紫外线灯照射时应注意防护。
3．简述化学消毒剂的杀菌机制。
答：化学消毒剂的杀菌机制主要包括：
(1)使菌体蛋白质变性或凝固化学消毒剂通过与菌体蛋白结合或使蛋白质脱水，导致细菌蛋白质变性或凝固而死亡。
(2)干扰细菌的酶系统通过改变或破坏胞内酶活性基团的功能，使酶活性丧失，导致细菌代谢发生障碍而死亡。
(3)损伤细菌胞膜通过改变细胞膜结构，干扰其正常功能，使细菌死亡。有的化学消毒剂可改变细胞膜的通透性，使细菌内容物外流，菌外的液体进人细菌，导致细菌破裂。
4．影响消毒剂作用的因素有哪些？ 答：影响消毒剂作用的因素：
(1)．消毒剂的性质 ①作用时间，在一定消毒剂浓度下，作用时间愈长，效果愈好。②消毒剂的浓度，一般而言消毒剂的浓度与消毒效果成正比，但乙醇例外。浓度为70～75％的乙醇杀菌力最强，高浓度时效果反而较差。原因是高浓度乙醇使蛋白质迅速脱水而凝固，影响乙醇继续向菌体内渗入，故杀菌效果较差。
（2）．温度和酸碱度 杀菌过程是一种生化反应，其速度随温度升高而加快，故温度高时效果较好。当PH值偏低或偏高时，细菌就容易被消毒剂迅速杀死。
（3）．细菌种类与数量 同一种消毒剂对于不同种类的细菌或同种类处于不同时期的细菌，其杀菌效果不尽相同。芽胞比繁殖体抵抗力强，老龄菌比幼龄菌抵抗力强，细菌数量越多抵抗力越强。
（4）．环境中有机物与拮抗物的影响 细菌与某些有机物混在一起，影响消毒剂对细菌的杀伤作用。
5．常用的物理消毒灭菌方法有哪些？ 答： 常用的物理消毒灭菌方法
方 法 要 求 适用范围 1．干热灭菌法 焚烧法 直接燃烧或焚烧 废弃的污染物或死于传染病的人及动物尸体 烧灼法 火焰中直接烧灼 接菌环、试管口或瓶口等 干烤法 干烤箱内160～170℃2h 耐高温物品如玻璃试管、瓷器等 2．湿热灭菌法 巴氏消毒法 61．1～62．8℃30min 牛奶或啤酒的消毒或71．7℃15～30s 煮沸法 l00℃5min可杀死繁殖体、 外科手术器械、注射器、胶管等 杀死芽胞需1～3h 流通蒸气法 用蒸笼或蒸气灭菌器 常用于不耐高温的营养品 间歇灭菌法 反复三次流通蒸气达到彻底灭菌 不耐热物品或特殊条件下的灭菌 高压蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌器内1．05kg／cm2 耐高温并不怕潮湿的物品的灭菌如手术衣、 121．3℃ t5--30min 敷料、手术器械等 3．紫外线消毒法 紫外线灯照射30～60min 空气或物品表面消毒 4．电寓辐射法 包括X射线γ射线和阴极射线 一次性注射器、敷料、内镜插管、导管、中成药等 5．超声波 20kHZ的声波 仅用于菌体破碎以及提取细胞组分 6．滤过除菌法 细菌滤器 不耐热的血清、抗毒素、生物药品
第七章 微生物遗传与变异
一、名词解释
1．遗传性变异 2．温和噬菌体 3．溶原性细菌 4．基因突变 5．转化 6．接合 7．转导 8．高频重组菌 9．转位因子 l0．转座噬菌体
答案：1．遗传性变异：又称基因型变异，是由于细菌的基因型发生了改变，变异的性状可相对稳定地遗传给子代，而且为不可逆性。
2．温和噬菌体：有些噬菌体侵袭细菌后，不能复制增殖，而将其基因整合于细菌的DNA上，成为细菌DNA的一部分，并随细菌分裂分布于两个子代细菌中，这种噬菌体称为温和噬菌体。
3．基因突变：基因发生突然而稳定的结构改变，导致细菌性状的遗传性变异，称为基因突变。
4．转化：受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段，并将其整合到自己菌体基因中去，从而获得供体菌部分遗传特性的过程，称为转化。
5．接合：接合是供体菌通过性菌毛相互沟通将供体菌的遗传物质(质粒)转移给受体菌。使受体菌获得供体菌的某些遗传性状，称为接合。
6．转导：以温和噬菌体为媒介，将供体菌的遗传物质转移到受体菌中，使受体菌获得供体菌部分遗传性状的过程，称为转导。
7．溶原性转换：当噬菌体感染细菌而使之成为溶原状态时，噬菌体不携带供体菌的任何基因，只是将其本身的基因重组到细菌DNA中去，使细菌DNA结构发生改变而导致遗传性变异，称为溶原性转换。
一
8．高频重组菌：整合F质粒的细菌能通过性菌毛高效率转移染色体上的基因片段给另一个F菌称高频重组菌。
9．转位因子：存在于细菌染色体或质粒上的一段特异核苷酸序列片段，可在DNA分子中移动，可从一个基因组转移到另一个基因组，并能不断改变在基因组中的位置。
10．转座噬菌体：是具有转座功能的溶原性噬菌体，当以前噬菌体的形式整合到细菌染色体上时，能改变溶原性细菌的某些生物学性状。
二、填空题
1、细菌的变异分为________和________·
2、细菌性状变异实例有 ________、________、________和________。
3、细菌变异的物质基础是菌体内的________ 和________，其化学本质都是________。 4、医学上重要的质粒有________、________、________和________。
5、噬菌体是感染细菌、真菌等微生物的________，它具有一定的形态、结构和________。 6、基因突变的机理包括________、________、________以及________因子的转位。 7、细菌的遗传性变异主要通过________、________两种方式实现。
8、普遍性转导是将供体菌染色体上________基因转导给受体菌，局限性转导是将供体菌染色体上________基因转导给受体菌。
9、侵袭细菌、真菌、螺旋体的病毒是________。
10、细菌的基因转移与重组的方式有________、________、________、________。 1l、L型细菌指________细菌，培养应选用________培养基。
12、卡介苗是用失去毒力的________菌制成的活疫苗，可预防________病。 13、溶原性细菌的特征是________、________、________、________。
14、温和噬菌体既有________周期又有________周期。毒性噬菌体只有________周期。 15、介导细菌间遗传物质转移的噬菌体是________。 16、噬菌体参与重组的方式有________和________。
l7、基因突变规律有________、________、________、________。 18、有F质粒的细菌有________，亦称________。
—
19、F菌亦称________，可经________方式变为F+菌。
20、发生接合性传递的R质粒的基因是由________和________组成。 2l、转座噬菌体可在遗传物质转移过程中起________作用。
答案：1、遗传性变异，非遗传性变异 2、形态结构变异，菌落变异，毒力变异，耐药性变异 3、染色体，质粒，DNA 4、F质粒，R质粒，细菌素质粒，毒力质粒 5、病毒，特异性 6、碱基置换，插入，缺失，转位因子 7、基因突变，基因转移与重组 8、任何一个或数个，个别特定 9、噬菌体 10、转化，转导，溶原性转换，接合 11、细胞壁缺陷，高渗低琼脂 12、牛型结核杆菌，结核病 13、溶原菌正常分裂，产生免疫力，
表达新的遗传性状可终止溶原状态 14、溶原，溶菌，溶菌 15、温和噬菌体16，转导，溶原性转换 17、自
＋
然突变，诱导突变，突变选择，回复突变 18、性菌毛，F菌 19、雌性菌，接合 20、耐药决定因子，耐药传递因子 2l、载体
三、最佳选择题
1．H—O变异属于( )
A．毒力变异 B．菌落变异 C．鞭毛变异 D．形态变异 E．耐药性变异 2．关于耐药性突变，下列叙述错误的是( )
A．可以自然发生 B．可以诱导发生 C．具有相对稳定性 D．可由噬菌体介导发生 E．是在接触抗生素之前已经发生 3．细菌突变的发生是由于( )
A．基因重组 B．基因交换 C．质粒丢失 D．溶原性转换 E．核质基因发生突然而稳定的结构改变 4．溶原性转换( )
A．由R质粒参与 B．由性菌毛介导 C．由毒性噬菌体参与 D．由温和噬菌体参与 E．是受体菌直接摄取供体菌的DNA片段 5．能产生外毒素的白喉杆菌，是因为其有( )
A．R质粒 B．F质粒 C．Vi质粒 D，Col质粒 E．前噬菌体 6．细菌转导和溶原性转换的共同特点是( )
A．需质粒参与 B．需性菌毛介导 C．需毒性噬菌体介导 D．需温和噬菌体参与 E．供体菌与受体菌直接接触 7．关于R质粒，下列叙述错误的是( ) A．R质粒是编码细菌耐药的基因
B．一种R质粒只含有针对一种抗生素的耐药基因 C．R质粒可分为接合性R质粒和非接合性R质粒
D．接合性R质粒是由耐药传递因子和耐药决定因子组成 E．非接合性R质粒可经转化或转导方式进人受体菌 8．细菌的性菌毛( )
A．化学成分为多糖 B．与细菌的运动有关 C．是接合时必要的结构 D．是转导时必要的结构 E．是细菌吸附易感细胞的结构 9．介导细菌间接合的物质是( )
A．鞭毛 B．普通菌毛 C．性菌毛 D．中介体 E．核糖体 10．Hfr菌是( )
A．溶原性细菌 B．含有R质粒的细菌 C．整合有F质粒的细菌 D．整合有前噬菌体的细菌 E．不产生性菌毛的细菌 11．关于L型细菌的特性下列哪项是错误的( )
A．呈多形态性 B．在固体培养基中形成“油煎蛋”菌落 C．仍保留亲代特性 D．除去抑制物可以返祖 E．分离L型细菌必须用高渗培养基 12．“流产转导”指噬菌体携带的外源DNA( )
A．未能进入受体菌 B．进入受体菌后复制 C．进入受体菌后未能与染色体重组 D．进人受体菌与染色体重组后未能表达其特性 E．进入受体菌后被降解 13．携带β一棒状杆菌噬菌体的白喉杆菌能产生白喉毒素，这种现象称为( ) A．转导 B．转化 C．基因转换 D．溶源性转换 E．以上都不是 14．不属于基因转移与重组方式的是( )
A．转化 B．转导 C．接合 D．溶原性转换 E．L型变异 15．下述除哪项外，均为噬菌体的特性( )
A．通过细菌滤器 B．严格宿主特异性 C．只含有一种核酸 D．有溶原性周期与溶菌性周期 E．抵抗力比细菌繁殖体弱
16．下述除哪项外，均为噬菌体的应用范围( )
A．细菌的鉴定 B．细菌的分型 C．检测标本中未知的细菌 D．分子生物学研究的工具 E．测定细菌的相容性
17．下列除哪项外，都是细菌变异在医学实践上的意义( )
A．病原菌诊断、治疗 B．基因工程 C．制造活疫苗用于预防 D．测定致癌物质 E．以上都不是 18．下列错误的是( )
A．R质粒为耐药性因子 B．Col质粒编码大肠菌素 C．Vi质粒编码细菌毒力 D．F质粒编码性菌毛 E．以上都不对 19．关于质粒的叙述，下述不正确的是( )
A．是细菌核质外的遗传物质 B．能在胞浆中自行复制 C．可以丢失 D．是细菌生命活动所必需的结构 E．与某些细菌的耐药性有关 20．关于转位因子，下述不正确的是( )
A．是细菌基因组中能改变自身位置的DNA序列 B．可从染色体的一个位置转移至另一个位置 C．转座子不携带信息
D．分为插入序列、转座子、转座噬菌体三类
E．转位因子的转移可引起细菌基因突变或基因转移 21．不产生性菌毛的细菌有( )
A．F+菌 B．Hfr菌 C．雌性菌 D．雄性菌 E．有接合性R质粒的细菌 22．关于细菌变异，下述错误的是( )
A．H—O变异属于鞭毛变异 D．R—S变异属于菌落变异 C．BCG的制备属于毒力变异 D．细菌L型属于荚膜变异 E．芽胞变异属于形态、结构变异
答案：1．C 2．D 3．E 4．D 5．E 6．D 7．B 8．C 9．C 10．C 11．C 12．C 13．D 14．E 15．E 16．E 17．E 18．E 19．D 20．C 21．C 22．D
四、问答题
l、简述L型细菌的形成、特点及临床意义。
答：在某些因素如溶菌酶、青霉素等的影响下，某些细菌细胞壁肽聚糖合成受抑制，可使细胞壁部分或完全缺失，形成细胞壁缺陷型细菌，也称为L型细菌。
L型细菌形态不规则，大小不一，多呈球形，有时可呈巨球状或长丝状；革兰染色均呈阴性；需用高渗培养基培养。
临床上由于抗菌药物使用不当，可使患者体内细菌发生L型变异。某些L型细菌有致病性，可引起肾盂肾炎、骨髓炎、心内膜炎等疾病。
2、简述常见的细菌形态与结构变异现象及其意义。 答：常见的细菌形态与结构变异有：
(1)细胞壁缺陷型(L型)变异：临床上由于抗菌药物使用不当，使患者体内细菌发生L型变异。某些L型细菌有致病性，可引起肾盂肾炎、骨髓炎、心内膜炎等疾病。
(2)荚膜变异：例如从患者标本中分离的肺炎球菌有较厚的荚膜，致病性强，但在无血清的培养基中传代数次后，可失去荚膜，致病性亦随之减弱。
(3)鞭毛变异：例如将有鞭毛的变形杆菌接种在普通固体培养基表面，由于鞭毛的动力作用，细菌呈播散生长；若将此变形杆菌接种于含1％石炭酸的培养基中培养，则鞭毛生长受抑制，生长仅限于接种部位。
(4)芽胞变异：例如将能形成芽胞，毒力强的炭疽杆菌置42℃培养10~20d后，则丧失形成芽胞的能力，毒力也随之减弱。