《寄生虫学及检验》
（7）常用原虫染色检查法：阿米巴、贾第虫、隐孢子虫 ①包囊检查方法同直接涂片，只需把生理盐水换成碘液即可。 ②隐孢子虫卵囊检查，多用金胺-酚改良抗酸染色。 2.肛门外检查
（1）查虫卵：透明胶纸或棉签拭子法，适于蛲虫检查。 （2）查成虫：适于蛲虫检查（小白线虫）。 3.血液和骨髓检查
（1）检查微丝蚴：新鲜血片、厚血膜、离心浓集等。
（2）检查疟原虫：厚、薄涂片（固定、染色）疟原虫计数。 （3）检查利什曼原虫：骨髓片染色查找利杜体。 4.其他排泄物与分泌物检查
（1）痰液检查（直接涂片和氢氧化钠消化）：肺吸虫卵、卡氏肺孢子虫包囊等。 （2）尿液或鞘膜积液等找微丝蚴。
（3）阴道分泌物或前列腺液找阴道毛滴虫（直接涂片）。 （4）十二指肠引流液离心沉淀找肝吸虫卵、蓝氏贾第鞭毛虫。 （5）脑脊液检查找广州管圆线虫幼虫。 5.活组织检查
（1）皮肤：疥螨、蠕形螨、利什曼原虫 （2）皮下结节：囊虫、肺吸虫等
（3）肌肉：旋毛虫 （4）淋巴结：弓形虫、利什曼原虫、丝虫成虫 （5）肠黏膜：血吸虫、溶组织内阿米巴 6.人工培养与动物接种
二、免疫学检查 1.皮内实验（ID）
（1）原理：速发型超敏反应。给寄生虫患者皮内注射少量同种寄生虫抗原后，抗原与患者皮内肥大细胞表面的lgE抗体相结合，引发肥大细胞脱颗粒现象，释放组织胺等活 性物质，使注射部位出现红肿。
（2）应用：该方法多用于蠕虫病的诊断和某些螨虫所致变态反应的诊断。方法简单，适用于大范围现场流调。
2.尾蚴膜反应 （CHR）
（1）原理：用血吸虫尾蚴抗原与患者血清特异性抗体在体外共同孵育后，在尾蚴体表面形成折光性套膜。
（2）应用：用于早期血吸虫病的诊断，有较高的敏感性和特异性。
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《寄生虫学及检验》
3.环卵沉淀试验 （COPT）
（1）原理：同尾蚴膜反应。以血吸虫整卵为抗原的特异免疫血清学实验，卵内毛蚴或胚胎分泌排泄的抗原物质经卵壳微孔渗出，与检测血清内的特异性抗体结合，可在虫卵周围形成特殊的免疫复合物沉淀，在光镜下判读反应强度并计数反应卵的百分率。
（2）应用：有较高的特异性和敏感性，与常见的线虫病无交叉反应。 ①作为诊断血吸虫病的血清学方法之一及临床治疗病人的依据； ②用于考核治疗及防治效果； ③还可用于流行病学及监测疫情。 4.间接血凝试验 （IHA）
（1）原理：以红细胞作免疫配体的载体，并以红细胞凝集读数的血清学方法。
最常用的红细胞为绵羊的红细胞，将可溶性抗原吸附在红细胞表面（致敏红细胞），红细胞上的抗原与相应抗体相互作用，产生特异的反应引起红细胞凝集，形成肉眼可见的反应。
可分为间接血凝试验（IHA）、反向间接血凝试验（RIHA）、 间接血凝抑制试验（IHAI）、 反向间接血凝抑制试验（RIHAI）。
（2）应用：间接血凝试验操作简单、敏感性特异性都较高，适用于现场流行病学调查和一些寄生虫病的辅助诊断。
5.免疫荧光技术（IFA）
（1）原理：用一种荧光素标记的抗体，可检测多种抗原抗体反应，既可检测未知抗原，也可检测未知抗体。
①直接法：用于检测抗原，缺点是每检测一种抗原，必须制备与其相应的荧光标记的抗体。（很少用）
②间接法：（间接荧光抗体法）制备一种荧光标记的抗体，可以用于多种抗原-抗体系统的检查，既可用于测定未知抗原，也可检测未知抗体。
（2）应用：多种寄生虫病的快速诊断和组织切片中特异性抗原的检查和定位。缺点是实验结果需要用荧光显微镜观察反应，限制了该方法的广泛应用。
6.酶联免疫吸附试验（ELISA）
（1）原理：根据抗原抗体免疫学的特异性和酶的催化活性，将抗原或抗体与酶结 合，特异性抗原或抗体发生反应，形成酶标记的免疫复合物。再与相应的酶的底物作用而显色，色泽的深浅反映了抗原或抗体的浓度。
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《寄生虫学及检验》
（2）应用：该方法为高灵敏度的一种检测技术，结果可定量表示，可检测抗原、抗体和特异性免疫复合物。微量滴定板法消耗样本试剂少，适用于批量样本监测；广泛应用于多种寄生虫病的研究、诊断及血清流行病学调查和监测疫情。现已有多种试剂盒出售。
三、单克隆抗体在寄生虫病诊断中的应用
（1）原理：正常小鼠脾细胞在体外不易存活，而小鼠骨髓瘤细胞则可以在培养基中生长繁殖。将小鼠骨髓瘤细胞与分泌某种抗体或因子的淋巴细胞融合，所产生的淋巴细胞杂交瘤既有肿瘤细胞在体外生长繁殖的特性，又具有脾细胞可以分泌特异性抗体或因子的能力。
（2）应用：由于单克隆抗体特异性高，很多种寄生虫病应用这个技术进行抗原检测，如：疟原虫循环抗原、血吸虫循环抗原、血吸虫虫卵抗原等，这项技术的缺点是敏感性不如多克隆抗体。
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《寄生虫学及检验》
四、DNA探针技术在寄生虫病诊断中的应用
作为基因诊断，目前应用的方法主要为 DNA探针技术（核酸分子杂交技术）和基因的PCR扩增技术（聚合酶链反应）， DNA探针技术它的敏感性高、特异性强，已广泛应用于各个领域，在寄生虫病诊断中，探针是病原体的特异核酸序列，可用来检测出病原体是否存在，其关键环节在于获得特异的核酸探针。
由于该项技术是直接检测寄生虫DNA片段，因此比免疫血清学方法可靠稳定。 （1）用于寄生虫种、株的鉴定及分类。
（2）用于寄生虫病的诊断、现场调查及流行病学研究。
练习题
1.寄生虫病的防治原则为
A.控制和消灭传染源，切断传播途径和预防感染，保护健康人群 B.预防接种 C.抓住改善不良饮食习惯这一环 D.宣传注意个人卫生就可控制寄生虫病的流行 E.所有寄生虫感染者的粪便均需无害化处理
『正确答案』A 『答案解析』根据寄生虫病流行的三个环节
2.机会性致病寄生虫是指
A.偶然感染的寄生虫 B.免疫功能低下时致病的寄生虫 C.暂时寄生的寄生虫 D.免疫功能正常时致病的寄生虫 E.随即感染的寄生虫 『正确答案』B
『答案解析』机会性致病寄生虫是指宿主免疫功能异常时，处于隐性感染的寄生虫开始大量繁殖，并导致人体疾病的寄生虫。常见的机会性致病寄生虫有：弓形虫、隐孢子虫和卡氏孢子虫。 3.生物源性蠕虫是因为它们
A.必须在外界发育 B.必须经口感染 C.必须经中间宿主感染 D.无需中间宿主也可感染 E.必须经皮肤感染 『正确答案』C
『答案解析』有些寄生虫在其生长发育过程中，某个阶段必须要在中间宿主体内才能发育至感染人的阶段，在流行病学上，将它们称之为生物源性蠕虫。如：血吸虫。 4.吸虫生活史的中间宿主必须有
A.食肉类哺乳动物 B.食草类哺乳动物 C.淡水螺 D.水生植物 E.淡水鱼、虾 『正确答案』C
『答案解析』吸虫的第一中间宿主是淡水螺，第二中间宿主依虫种不同而不同。 5.十二指肠钩口线虫的感染方式为：
A.经口 B.经皮肤 C.输血感染 D.媒介昆虫叮咬 E.主要经皮肤，有时可经口感染 『正确答案』E
『答案解析』丝状蚴依靠其机械的穿刺运动及酶的化学作用主要经皮肤感染人体，但也可经口腔、食道黏膜使人感染。
6.在丝虫病流行中其重要作用的传染源为：
A.血中带有微丝蚴的患者和带虫者 B.中华按蚊和淡色库蚊 C.严重象皮肿患者 D.血中带有丝状蚴的患者和带虫者 E.象皮肿伴有乳糜尿的患者 『正确答案』A
『答案解析』血中带有微丝蚴的患者和带虫者被蚊叮咬后，微丝蚴在蚊体内可继续发育。 7.棘球蚴病禁忌诊断性穿刺的主要原因是容易引起：
A.出血、感染 B.感染、继发性棘球蚴病 C.过敏性休克、出血 D.发热、黄疸 E.过敏性休克、继发性棘球蚴病
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《寄生虫学及检验》
『正确答案』E
『答案解析』棘球蚴病在穿刺中，囊液外溢，不仅可造成过敏性休克，囊液中的原头蚴可继续生长发育，如同撒种子一般 8.食入未熟猪肉可能患：
A.囊虫病 B.带绦虫病 C.华支睾吸虫病 D.布氏姜片吸虫病 E.日本血吸虫病 『正确答案』B
『答案解析』如食入含囊尾蚴的未熟猪肉等于是吃了囊虫，囊虫是猪带绦虫的幼虫，幼虫在人体小肠可发育为成虫。吃虫卵才能得囊虫病。
9.对急性阿米巴痢疾患者进行粪检时，应做到：
A.取任意部分检查 B.取黏液、脓血部分检查 C.取任意部分检查应及时送检并注意保温 D.取黏液、脓血部分检查应及时送检并注意保温 E.取黏液、脓血部分检查注意送、检均需保温 『正确答案』D
『答案解析』黏液、脓血部分滋养体较多，阿米巴滋养体在外界抵抗力较低，低温下易死亡。 10.阴道毛滴虫的生活史简单，其感染阶段与致病阶段是：
A.滋养体 B.包囊和滋养体 C.成熟包囊 D.前鞭毛体 E.无鞭毛体 『正确答案』A
『答案解析』阴道毛滴虫的生活史中只有滋养体阶段，滋养体既是繁殖阶段也是感染和致病阶段。只有滋养体阶段，无包囊期。
11.不属于黑热病的主要临床表现是：
A.不规则发热 B.贫血 C.肝脾肿大 D.腹泻 E.血尿、蛋白尿 『正确答案』D
『答案解析』黑热病主要侵犯的巨噬细胞，临床不会引起腹泻。 12.诊断黑热病最常用病原学检查方法是：
A.骨髓穿刺 B.淋巴结穿刺 C.动物接种法 D.十二指肠引流 E.粪便检查 『正确答案』A
『答案解析』骨髓穿刺最为常用，检出率高
13.诊断钩虫病，下列方法最常用，阳性率又最高的是：
A.粪便直接涂片法 B.饱和盐水漂浮法 C.自然沉淀法 D.碘液染色法 E.肛门拭子法 『正确答案』B
『答案解析』钩虫卵较轻，用饱和盐水漂浮法检查阳性率高。 14.环卵沉淀试验可用于诊断：
A.华支睾吸虫病 B.卫氏并殖吸虫病 C.斯氏狸殖吸虫病 D.日本血吸虫病 E.布氏姜片吸虫病 『正确答案』D
『答案解析』环卵沉淀试验抗原是用血吸虫的卵制备的，因此主要用于血吸虫病的诊断。 15.全变态昆虫的发育过程为：
A.卵–若虫–蛹 –成虫 B.卵–幼虫–若虫–蛹 –成虫 C.卵–若虫–成虫 D.卵–幼虫–蛹 –成虫 E.卵–幼虫–若虫 –成虫 『正确答案』D
『答案解析』若虫体小，形态与成虫相似，但翅及生殖器官尚未发育，蚊、蝇、白蛉、蚤等属于不全变态。
16.蠕形螨的感染方式主要是通过：
A.虫卵污染食物或饮水经口感染 B.媒介昆虫叮咬吸血感染 C.直接接触或间接接触 D.污染注射器经输血感染 E.经皮肤感染
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