人参 - 图文(2)

2019-08-29 17:57

中检所提供:

供应商:上海永恒生物科技有限公司

1.人参皂苷的分析:

人参皂苷分析方法主要有:HPLC、GC、TLCS、MS、分光光度法、比色法、薄层光密度法、棒状薄层扫描法、液滴逆流色谱法(DCCC法)等。在这些方法中,HPLC法因具有检测灵敏、准确、快速、操

作简便、重现性好等特点而得到更加广泛的应用。

1.1 样品处理方法:关于人参皂苷分析前的纯化处理,文献中报道很多,大体上有以下几种方法。

1.1.1 醇法:用甲醇或乙醇回流提取,减压回收溶剂。残渣用水溶液,配成水混悬液,再用乙醚(石油醚或氯仿)脱脂后以水饱和的正丁醇萃取,减压蒸干正丁醇得总皂苷。

1.1.2 醇-吸附树脂法:以水饱和的正丁醇浸泡过夜后,超声振荡提取,减压回收溶剂。残渣用水溶解,水溶液通过打大孔树脂柱,以水、30%乙醇、70%乙醇洗脱,除去水溶性杂质,收集70%乙醇液,水浴上蒸干得总皂苷。

1.1.3 水-醇法:水煎液浓缩至小体积,加乙醇沉淀多糖、多肽等大分子物质,减压回收乙醇,加水去胶,滤过,以水饱和的正丁醇萃取,正丁醇液通过吸附柱(中性氧化铝或活性炭)脱色,流出液减压回收溶剂,真空干燥得总皂苷。

1.1.4 其他方法:在醇法的基础上,Kanazawa 等在纯化方法上作了改进。其水溶液通过一个 Sep- pakC 18 小柱, 用水、30%甲醇和甲醇依次洗脱, 甲醇液减压回收得总皂苷。近来,Kim等改进了人参总皂苷的提取方法。 以常用的正丁醇提取法和树脂吸附法[ 70%甲醇提取液过一个 Diaion HP- 20 树脂柱( 水预洗), 以甲醇洗脱, 甲醇液回收至干] 两种方法作比较, 分别采用 TLC 和 HPLC 方法定量测定了人参皂苷的含量, 结果表明: 正丁醇提取方法中皂苷的损失大于 Diaion HP- 20 树脂吸附法中皂苷的损失, 后者比前者所测含量高

8. 2%。 用乙醇代替甲醇收到同样的效果。 Cho 等 [3] 又提出用液氨提取人参总皂苷的方法, 并比较了液氨、 60%甲醇、 水的人参皂苷提取率。结果表明, 液氨提取的人参皂苷量要高于60%甲醇和水的提取量, 但丙二酰人参皂苷- Rb 1 、 Rb 2 、 Rc、Rd 常发生转化, 分别生成 4种中性皂苷。

综上所述, 用乙醇提取, 然后过 Diaion HP - 20树脂柱法是一种较为新颖、高效的提取方法。 1.2 分析方法

1.2.1 HPLC 法: 在 HPLC 法中紫外检测器最为常用。 但因人参皂苷的结构中缺乏生色团, 如共轭双键, 而被限制于只能使用低波长检测, 通常为 203 nm。

HPLC 法作为一种分析方法, 在 1975 年《 美国药典》 中得到了应用。 Besso 等在 1979 年将人参皂苷 Rb 1 、 Rb 2 、 Rc 、Rd、 Re、 Rg 1 进行苯甲酰化处理, 使其在紫外区有强吸收, 从而确定了不同人参品种中人参皂苷的含量。依其含量不同,用 HPLC 法可区分生晒参的主根和芦头。

1980年Sticher等报道, 采用反相HPLC法, 用μBondapak C 18 色谱柱, 流动相乙腈-水( 3∶7) , 体积流量2mL/min, 检测波长 203 nm 作为分析条件, 在 30 min 内测定了人参皂苷 Rb1 、 Rb 2 、 Rc 、 Rd 、 Re 、 Rf 和 Rg 2 , 再将分不开的Re 和 Rg 1 用乙腈-水(18∶82) 进行分离, 并测定了人参各部位中人参皂苷的分布, 指出人参叶中主要含人参皂苷 Rg 1 、Re 和 Rd 成分, 芦头中主要含人参皂苷

Re、 Rb 1 和 Rc, 这些结果进一步证明了 Besso 的工作成果。 (另附:潘坚扬等人 [1-2] 建立了可同时测定人参皂苷 Rg1 、 Re 、 R f 、 Rg2 、 R b1 、 R c 、 R b2 、 R b3 和R d 含量的反相高效液相色谱 (RP-HPLC) 方法。 采用Agilent Zorbax SB-C18 柱, 以乙腈 - 水 -0.05% 磷酸为流动相 , 流速 1.5 mL/m in ,柱温 35℃ ,检测波长 203nm 。 在此色谱条件下,各组分在 60 m in 内均得到较好分离,回收率符合含量测定要求。 运用该方法对不同产地人参进行含量测定,道地药材主根中 9 种人参皂苷总含量为

1.19~1.45% , 须根为 5.47~6.90% , 3 个非道地药材主根分别为 1.03% 、 1.04% 、 1.85% 。聚类分析结果表明,根据测定的 9 种皂苷含量能准确区分人参的主根与须根,并判断其道地性。 1.2.2 GC 法: 近几年 GC 方法也应用于人参皂苷元的测定上。采用 GC - MS 方法测定了各种人参制剂商品, 以定量测定非糖部分( 20 s - ppd 、 20 s - ppt 、 齐墩果酸) 为基础, 测得纯人参制剂皂苷含量约为 1. 9%~8. 1%(以人参皂苷 Rg 1 、 Rb 1 、Ro 为标准, 人参三醇作内标) ; 在不同的人参制剂中, 皂苷含量变化从 4. 9%到 13.3%。 该法是利用酸水解所得的人参二醇及三醇, 经烷基化后用非极性固定相及 FID 检测器进行气相分析。其缺陷是只能分析人参二醇及人参三醇 2 类, 而不能分析单一的人参皂苷 [3] 。

1.2.3 薄层扫描法(TLCS 法) : TLC 法 TLC 用于人参皂甙的鉴别, 实用、 简便、 费用低。其主要的展开剂系统为氯仿- 甲醇- 水, 正丁醇- 乙酸乙酯-水以及在这两个系统上稍加改进的展开溶媒。显


人参 - 图文(2).doc 将本文的Word文档下载到电脑 下载失败或者文档不完整,请联系客服人员解决!

下一篇:智能饮水机毕业论文-开题报告

相关阅读
本类排行
× 注册会员免费下载(下载后可以自由复制和排版)

马上注册会员

注:下载文档有可能“只有目录或者内容不全”等情况,请下载之前注意辨别,如果您已付费且无法下载或内容有问题,请联系我们协助你处理。
微信: QQ: