色方法一般喷以硫酸乙醇溶液, 然后加热显色。
用二维TLC分离了人参茎叶中的总皂甙, 并且采用标准随行法, 对 Re 做了二维薄层扫描定量。以自制的沉降硅胶 H 板,氯仿- 甲醇-水(下层)为第一方向, 正丁醇- 乙酸乙酯- 水为第二方向展开, 香草醛- 浓硫酸显色, 共分得 35个斑点 [4] 。
1.2.4 质谱法(M S): 尹建元等首次用 MALDI- T OF- M S 对野山参茎叶总皂苷成分进行了分析。在 MALDI - TOF - MS谱图中得到按相对分子质量顺序排列的 14 个峰, 结合柱色谱分离技术, 确定了 6个化合物, 分别为人参皂苷 Rg 1 、 Rg 2 、Rg 3 、 Re、 Rb 1 、 Rb 2 , 另 8 个待定。本法为皂苷类成分的鉴定提供了新方法, 减少了盲目性。
1.2.5 比色法：比色法一般用于人参总皂甙的测定。显色的主要方法有 a) 香草醛- 高氯酸- 冰醋酸; b) 香草醛- 高氨酸-80%磷酸; c)香草醛- 70%硫酸水溶液。最大吸收波长为 560、540和 544nm。也有以硫酸显色紫外分光光度法进行测定的。
颜玉贞等以 R b1 为对照品, 硫酸显色, 272nm 测定吸收度分析了人参、 西洋参及其制剂中的人参总皂甙。他们以 70%乙醇提取, 以 C 18 小柱净化。先以水洗, 后 30%甲醇以及甲醇各10ml 洗脱, 收集甲醇部分, 蒸干后加入硫酸处理后进行测定。以柱色谱(中性氧化铝) - 高氯酸比色法测定西洋参茎叶中的西洋参总皂甙。结果: 茎中总甙量为主根的1/ 3- 1/ 2, 叶中总甙量为主根的1.5~ 4 倍。对照品 Re 分别用TLC- 比色法测定人参总皂甙的含量。
以AL 2 O 3 柱消除干扰, R gl 为对照品, 比色测定了香砂六君 丸、 散、 汤剂中的人参总皂甙含量。以 Re 作对照品, 测定了君春乐胶囊中人参总皂甙的含量。
1.2.6 其他方法: 近来, 又有人 [ 5] 提出用 NIRS( Near- IR reflectance spectroscopy )作为替代方法来检测人参皂苷, 该法具有误差小, 灵敏度高等优点, 分析了西洋参中的人参皂苷 Rb 1 、 Rb 2 、 Rc、 Rd、 Re、 Rg 1 、 Ro、 m-Rb 1 、 m-Rb 2 、 m-Rc、 m-Rd
及总皂苷。李颂等 [6] 采用了一种新的铂电极测定人参皂苷的方法。 其原理是在达玛烷烯醇(苷元分子结构) 支链的 C 24 -C 25 间有一双键, 该双键极为活泼, 在较低温度下均易与溴进行加成反应, 当加成反应完成后, 如有极微量的溴存在, 溶液体系的氧化还原状态发生变化, 此变化可通过铂电极灵敏地指示出来, 以示反应终点的到达。 但该法有待于进一步考察。采用超临界流体色谱( SFC ) 方法测定了人参二醇和人参三醇的含量 [ 7] , 用胆固醇的无水乙醇液作内标, 测得人参二醇最小检测量为 3. 97×10 - 12 g , 人参三醇为 4. 17×10 - 12 g 。本法取样量少、 操作简单、 分析速度快。 2.人参多糖的分析
钟岩等人 [8] 建立了测定鲜人参中多糖含量的分析方法， 具体方法是用苯酚 - 硫酸法， 在波长 490nm 处测定吸光度， 人参多糖在 10~160μg 范围内具有良好的线性关系， 相关系数为0.998 7 。 平均回收率为 98.40% ， RSD=2.53% 。 结果人参多糖的最佳提取条件为：料液比为 1∶10 ，提取温度为 100℃ ， 提取时间为 4 h ， 人
参多糖换算因子为1.58 ，鲜人参中多糖的含量为 18.14 g/100 g 。钟振声等人 [9-10] 将人参根磨粉后，以蒸馏水为提取剂，用超声波法提取人参根中人参多糖， 采用苯酚 - 硫酸比色法测定多糖含量。超声波功率为 200W 、超声波作用时间为30 min 、 m( 人参粉 )∶m( 蒸馏水 )=1∶50 、人参粉粒度为 80目为最佳的操作条件，在此条件下提取的多糖质量分数比常规法提取 3h 得到的多糖质量分数还高 2.3% 。
3.脂肪酸及挥发性成分的分析
人参脂肪酸的提取方法一般是以甲醇和乙醚各提取 3次, 进一步处理得脂肪酸, 经甲基化后得到脂肪酸甲酯。用GC-MS 分析, 分离出 35 种成分, 其中 18 种为脂肪酸甲酯,主要成分为 6, 9- 十八碳二烯酸。
人参挥发性成分的提取方法是以 70%乙醇提取 3 次,回收乙醇后, 用水溶解, 乙醚萃取, 取水层加过量碳酸氢钠酸化, 再用乙醚萃取, 回收乙醚, 进一步处理得总挥发物。用GC-MS 技术分离出 28 种成分, 鉴定了 10种成分, 其中甲基环丙烷的相对含量最高。李树殿等 [11] 应用乙醚冷浸法及GC - MS 联用仪对朝鲜人参中的挥发油进行了分离鉴定, 确认了 9 种人参挥发油的特征性成分, 其中 4 种氢化 类化合物为人参中首先得到的倍半萜成分。 4.氨基酸与多肽的分析
应用酸水解法以自动氨基酸分析仪从人参中检测出 17种氨基酸, 其中含人体必需氨基酸 8种。人参的主要化学成分为人参皂苷, 除此之
外, 国内外学者也开始着手研究人参的其他水溶性成分, 其中以多肽的研究为多。自生晒参中用RP-HPLC 法分离出 2 种人参多肽, 分别是 11 肽和 12 肽; 又自红参中分得 2个新肽为13 肽和15 肽 [12] , 这些多肽均具有降低 2BS 细胞内多糖含量和增强 2BS 细胞内琥珀酸脱氢酶活力的作用。 5.人参中其他化学成分的分析
李靖等人 [13] 研究不同生长年份人参中木质素量的变化规律，探讨木质素的量用于判断人参生长年份的可行性。方法采用紫外分光光度法测定人参木质素的量。结果人参不同部位和组织的木质素的量存在明显差异 ; 人参根须部的木质素量与生长年份呈极显著负相关 (r=0.986**), 可作为判断人参生长年份的指标 ;根据人参根须部木质素的量估算的人参生长年份与实际生长年份的误差范围小于 2.5 年。 结论紫外分光光度法可快速、 准确地测定人参根须的木质素的量 ,无需破坏人参的外形即可初步估算人参的生长年份 ,不仅可以作为人参生长年份的鉴定方法 , 同时也可供中药材年份鉴定借鉴。并建立了微量人参木质素含量测定的紫外分光光度法， 采用经典的 K lason 法和紫外分光光度法。紫外分光光度法测得的木质素含量较K lason 法高 , 且重复性和精密度更高。 人参木质素特征性吸收峰出现在 260 nm 波长处。 紫外分光光度法的溴乙酰处理条件为 70℃ 保温 30 m in 。 不同类型人参在木质素含量上有较大差异。 刘思洁等人 [14] 建立了紫外分光光度法测定人参中木质素含量的方法并研究吉林省人参中木质素的含量， 采用经典的 Klason法和紫外分光光
度法。 人参木质素特征吸收峰在268nm 。 紫外分光光度法操作简便、准确、快速，适合测定人参中木质素含量的测定。
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