学生分组观察并作假阴道的安装练习。
（一）人工授精器材的认识
1．假阴道 为长筒状，由外壳、内胎和集精杯（管）三个主要部分组成。其粗细和长短因畜种而异，不同国家不同时期的设计形式也不尽相同。
（1）外壳 牛、羊和猪的假阴道外壳一般为硬橡胶或塑料制成的圆筒，中部装有可吹气、注水和排水的开关。猪用假阴道则在此处连接一个可向假阴道内打气的双链球，以调节压力。马的假阴道的外壳由镀锌铁皮或金属制成，分头、颈和体三部分。筒体的中部装有把柄，其侧面有吹气和注水、排水孔，并有封闭塞或橡胶带。
（2）内胎 由优质橡胶制成的胶筒，目前有些国家将其内胎面制成粗糙面，以增强采精时对阴茎的刺激，利于采精。
（3）集精杯（管） 牛、羊用双层的棕色集精杯（苏式）或有刻度的离心管（美式）。马用黑色橡皮杯（苏式）。猪用棕色有刻度的广口瓶。当用手握法对公猪进行采精时，只需备一只乳胶手套和收集精液的容器即可。集精杯（管）可借橡皮圈直接固定于假阴道的一端或借橡胶漏斗与假阴道连接。
2．输精器 苏式牛、羊输精器为一长颈玻璃注射器。目前常用的为金属或塑料制成的输精管，其后连接一个橡皮球。冷冻细管精液输精则使用金属制成的输精枪。对牛羊等家畜的输精需借助阴道开张器和额灯或手电筒照明进行。开张器的种类和大小因畜种而异。
（二）假阴道的准备 1．假阴道外壳及内胎的检查
（1）检查假阴道外壳两端是否光滑，外壳有否裂隙或开焊之处（特别是马用外壳）。 （2）检查内胎是否漏水。可将内胎注满水，用两手握紧两端，并扭转内胎施以压力，观察胎壁有无破损漏水之处，如发现应及时修补或更换。公猪的手握法采精用的乳胶手套在用前也应检查。
2．采精器材的清洗
（1）外壳、内胎、集精杯（管）等用具用后可用热的洗衣粉水清洗。内胎的油污必须洗净。
（2）以清水冲净洗衣粉，待自然干燥后即可使用。
3．内胎的安装 将内胎放入外壳，内胎露出外壳两端的部分长短应相等。而后将其翻转在外壳外，内胎应平整，不应扭曲，再以橡皮圈加以固定。
4．消毒 先以长柄钳夹取75%的酒精棉球擦拭内胎和集精杯，再以95%的酒精棉球充分擦拭。采精前，最好用稀释液冲洗1~2次。
5．集精杯（管）的的安装 牛、羊、猪的集精杯（管）可借助特制的保定套或橡皮漏斗与假阴道连接。
6．注水 通过注水孔向假阴道内、外壁之间注入50~55℃温水，使其能在采精时保持38~42℃，注水总量约为内、外壁间容积的1/3~1/2。
7．涂润滑剂 用消毒好的玻璃棒，取灭菌凡士林少许，均匀的涂于内胎的表面，涂抹深度为假阴道长度的1/2左右，润滑剂不宜过多、过厚，以免混入精液中，降低精液品质。当用手握法给公猪采精时不须使用润滑剂。
8．调节假阴道内腔的压力 从注气孔吹入或打入（猪）空气，根据不同家畜和个体的要求调整内腔压力。
9．假阴道内腔温度的测量 把消毒的温度计插入假阴道内腔，待温度不变时再读数，一般40℃左右为宜，马可稍高，也要根据不同个体的要求作适当调整。
10．用一块褶成四折的消毒纱布盖住假阴道入口，以防灰尘落入，即可准备采精。 （三）输精器材的准备
金属和玻璃制成的输精管、输精枪，最好用高压蒸汽消毒，在输精前最好将输精管用稀释液冲洗1~2次。
细管冷冻精液的输精器一般由金属外壳和里面的推杆组成。使用前金属外套应进行消毒，前端的金属套不能连续使用。使用时将细管的一端剪去，棉栓一端插在输精枪的推杆上，借助推杆推动细管中的棉栓即可将精液推出。
若采用开张器法输精，需对开张器先进行严格消毒方可使用。 四、实验报告
试述公羊假阴道的组成及安装时的注意事项。
实验四 精液品质的肉眼检查及精子活率评定
一、目的和要求
熟悉肉眼检查精液品质的方法；掌握评定精子活力的方法及评价指标；验证外界因素对精子运动及生存能力的影响；掌握死活精子染色和制作抹片的方法。
二、材料和仪器
（一）精液 牛、羊、猪或兔等任一种动物的精液
（二）器械 显微镜，显微镜保温箱（或显微镜恒温台），载玻片，盖玻片，搪瓷盘，温度计，滴管，擦镜纸，纱布，有刻度试管，计数器
（三）药品 5%伊红和1%苯胺黑 三、内容和方法
（一）精液的肉眼检查
1.射精量 将采得的精液倒入有刻度试管或集精杯中，测其容量。各种家畜的射精量请参考教材。如果精液量过多或过少时，分析其原因。
2.色泽和气味 家畜的精液通常乳白色或灰白色，因畜种的不同而又浓淡的区别。马、猪的精液稀薄，呈灰白色；牛、羊的精液浓密，呈乳白色。家畜精液无味或略有腥味。
3.云雾状的观察 取原精液一滴于在载玻片上不加盖玻片，用低倍镜观察精液滴的边缘部分。可见牛羊的敬业翻腾滚动的云雾状态；猪马的精液无此现象。
（二）评定精子的活率
采精后立刻在25℃左右的实验室内进行评定精子的活率，最好在37℃保温箱内或加热的载物台上进行。在评定精子活率的同时也可以测定精子的密度。用玻璃棒蘸取一滴原精液或经稀释的精液（马、猪精液的精子密度低，不须稀释；而牛、羊精液的密度大，须用0.9%氯化钠溶液稀释，其温度须与精液密度相近）滴在洁净的载玻片上，盖上洁净的盖玻片，其间充满精液，不存留气泡。也可滴在盖玻片上翻放于凹玻片的凹窝上。置于显微镜下，放大250~400倍检查。注意显微镜的载物台须放平，最好是在暗视野中观察。
精子活动有三种类型：直线前进运动、旋转运动和原地摆动。评价精子活率是根据直线前进运动精子数的多少而定。
目前评定精子活率等级的方法有两种：
十级制——在显微镜视野中估算直线前进运动精子所占全部精子的百分数。直线前进运动的精子为100%者评为1.0级，90%者为0.9级，以此类推。
五级制——全部精子都呈直线前进运动，属于“5”级；绝大多数呈直线前进运动（约80%）为“4”级；前进运动精子略多于半数者（约60%）为“3”级；不及半数者为“2”级；呈直线前进运动的精子数目极少者属“1”级。
精子活率是精液品质评定的重要指标。受精能力与直线前进运动精子数的多少密切相关。新鲜精液的活率大于70%、冷冻精液解冻后的活率大于30%时，方可用于人工授精。
（三）外界因素对精子活率的影响 1．温度
（1）将采得的原精液在载玻片上滴一滴，先放在37℃ 显微镜下观察其活率，然后放在高温45~50℃下2分钟观察精子活率的变化。
（2）将新采得的精液立即检查其活率后随即移入0~5℃温度下放2~3分钟，然后把温度回升至37~38℃后再检查精子活率，注意降温前后精子活率变化情况。
2．渗透压 观察原精液的活率后，分别在三滴原精液内分别加入1％氯化钠溶液、3％氯化钠溶液和蒸馏水，观察其活率及形态有何变化。
3．振荡 取1~2 ml稀释过的精液放入小试管中，检查其活率后，用手上下剧烈振动2~3分钟，再观察其活率有何变化。
4. 光照 取1~2 ml稀释过的精液放入小试管中，检查其活率后，经阳光直射10分钟后观察精子活率的变化。
5．化学药品 取3滴精液于载玻片上，用滴管分别滴入 2％煤酚皂液、1/1000新洁尔灭液和 75％酒精，观察其精子活率及形态有何变化。
（四）死活精子百分率测定
活精子头部是不易着色的，镜检时，精子头部是透明、无色的。而死精子则因伊红渗入细胞质，使整个精子头部呈红色。苯胺黑为背景染色，使着色的精子头部可见。
1.将5%的伊红和1%的苯胺黑按1:1混匀，分装于1~2ml容量的试管中（加入试管容量的1/2），并在37℃水浴中加温，随后加入原精液1~3滴，摇匀后再放回水浴中，3分钟后立即取出待用。也可将染液预热后，将伊红、精液及苯胺黑按照1：1：1~2的比例及顺序滴入预热的凹玻片中混匀染色。
2.从以上混合液中用火柴棍沾上一小滴于载玻片的一端，用另一载玻片进行推动制成抹片，待干燥后，高倍镜镜检（400倍）。抹片时，最好在35~40℃的条件下制作，而且制作过程要快。也可将制好的抹片放在37~38℃保温箱内干燥30~60秒。
3.在高倍镜下数200或500个精子，其中分别数出死、活精子各占的百分率。活精子百分率总是要比精子活率高。
四、实验报告
将实验结果填入下表内。
处理前 37~38℃ 降温前 活率评分 处理后 40~45℃ 降温后 加入1％NaCl溶液后 加入溶液前 加入3％NaCl 溶液后 加入蒸馏水后 振荡前 阳光照射前 经剧烈振动 阳光照射后 加2％煤酚皂液 加入药液前 加入1／1000新洁尔灭溶液 加入75％酒精后 活率评分 实验五 精子密度测定
一、目的和要求
掌握检查精子密度的几种方法。要求学生熟练掌握血细胞计数方法，它是目前许多简单而实用方法的基础。 二、材料和仪器
（一）材料 牛、羊、猪或兔等任何一种家畜的新鲜精液
（二）器材 显微镜，血吸管，红细胞和白细胞吸管，血细胞计数室，载玻片，盖玻片，200 μl枪头，细乳胶管，5 ml试管，1 ml 移液枪及枪头
（三）药品 3%氯化钠，乙醚，95%乙醇，去离子水 三、内容和步骤
精子密度也称为精子浓度，指每毫升精液中所含的精子数。精子密度的大小直接关系到精液稀释倍数和输精量的有效精子数，也是评定精液品质的重要指标之一。评定方法一般有目测法和计数法。
（一）目测法 与检查活率的方法相同，往往与观察活率同时进行，只是精液不作稀释。