中药郁金的指纹图谱的初步研究
摘要：目的 建立温莪术挥发油与姜黄素的指纹图谱，对郁金与莪术的指纹特征进行比较,探索二者之间的内在化学本质区别，为有关的药学研究和生产的质量控制提供技术基础。方法 采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，加热回流法提取姜黄素；利用中药指纹图谱技术建立指纹图谱，对郁金与温莪术的指纹图谱特征进行直观比较。结果 所建立了的指纹图谱，具有良好的精密度，重现性及稳定性。郁金与温莪术在指纹图谱特征上有明显的不同。结论 利用中药色谱指纹图谱技术控制郁金质量具有良好的可行性。
关键词：温莪术；郁金；挥发油；姜黄素；指纹图谱
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Primary Studies of Radix Curcumae Fingerprints
Yangshaui.shishuxia
Abstract: Objective To establish Rhizoma curcumae wenyujin fingerprints of volatile oil and curcuminoids for the fingerprints characteristic comparison of
Radix Curcumae kawangsiensis with Rhizoma curcumae wenyujin. Explores their differences of chemistry essence in order to effectively control The two drug quality, and provides the technology supports for quality control of their studies and production. Methods The volatile oil was extracted by the steam distillation; the curcuminoids was extracted by heating backflow law extraction. The fingerprints characteristics of Rhizoma curcumae wenyujin and volatile were compared after their fingerprints had been established. Results The established fingerprints were accuracy, reproducibility and the stability. The results shown there was obvious difference on the fingerprints characteristics of two Chinese traditional medicines. Conclusion It has the good practicability using the Chinese national medicine chromatograph fingerprints to control the curcuma quality.
Key words Rhizoma curcumae wenyujin；Radix curcumae； Volatile oil；Curcumin；Fingerprints
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前言
郁金为姜科姜黄属植物温郁金Curcuma.wenyujin Y.H.Chen et C.Ling. 姜黄C.longa L.广西莪术C.kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang. 或蓬莪术C.phaeacaulis Val. 等品种的干燥块根[1]。本药性寒，味辛、苦，归心、肝、胆经，具有活血行气止痛、清心解郁、利胆退黄、凉血止血之功效，常用于经闭痛经、胸腹胀痛、黄胆尿赤等证。郁金药材不仅供中医临床配方使用，也是利胆排石片、郁金银屑片、舒肝和胃丸、安宫牛黄丸等多种中成药的原料。据统计中国药典2000年版一部和1-19册部颁标准中有 143个成药使用了郁金原料，约占国家标准收载中成药的3.3%[2]。国内对郁金从其资源分布、采收加工、化学成分,药理作用等方面多有研究[3
～11]
，发现其含有挥发油、姜黄素类、多糖、生物碱，
微量元素和其它化学成分。现代药理学证实郁金内有保肝、利胆、抗癌，抗自由基损伤和对中枢神经抑制等作用，并对血液系统和消化系统有影响[12～18]。
中药指纹图谱是借助于波谱或色谱技术获得的中药主要是植物药次生代谢化学成分的光谱图或色谱图。中药指纹图谱分析是针对根据中医理论建立的中药方剂不仅多为复方，而且有效成分复杂，非任何单一活性成分所能表达，也不是多个化学成分作用的简单加合的非线性特点建立的一种新的质量控制模式。它强调的是多个成分以相对稳定的比例关系及位置顺序相互制约的完整的色谱或综合的光谱特征,即指纹图谱的整体性特征和在共同特征的基础上个体之间又互有差异的模糊性特征。可以在量的概念上判断产品质量的稳定性及批间质量的是否一致[19～22]。中药指纹图谱在国内仍为中药研究的一大热点，继现有的中药注射液指纹图谱的完成，对中药的药材、饮片、其它制剂的指纹图谱研究正方兴未艾。
尽管郁金的研究较为广泛，但其目前仍有一药多名、数药同名等状况，其临床应用时有混淆，另郁金与同属植物药材形态功用较相近。为更有效地控制该药材的质量、揭示郁金与相关药材内在的本质区别，为相关的药学研究提供了参考数据，有必要利用现有的中药指纹化学图谱技术，建立相应的色谱指纹图谱。根据现具备样品与实验条件，本文建立了温莪术Rhizoma Curcuma wenyujin Y. H. Chen et C. Ling的挥发油与姜黄素部分的色谱指纹图谱，对桂郁金Radix Curcumae kawangsiensis的化学指纹特征进行了初
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步的研究，取得了较满意的结果。
1 仪器、试剂与药品
1.1 仪器
美国安捷伦有限公司高效液相色谱仪（HPLC），包括： Agilent 1100四元泵，Agilent 色谱数据工作站，Agilent二极管阵列紫外检测器。Eclipse XDB-C18柱（250 mm ×4.0 mm ID，5μm），保护柱：Zorbax SB－C18柱（12.5 mm×4.6 mm ID，5μm）。 SHB-Ⅱ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司） Agilent 1100液相色谱仪（美国Agilent有限公司） FA2004电子天平（上海恒平科学仪器有限公司） RE-52A旋转蒸发器 （上海亚荣生化仪器厂） 玻璃仪器气流烘干器(长城科工贸有限公司)
KDM型调温电热套（山东鄄城华鲁电热仪器有限公司）
1.2试剂
甲醇（国药集团化学试剂有限公司）；乙醚（国药集团化学试剂有限公司）；无水硫酸钠（天津化学化工厂）；磷酸（国药集团化学试剂有限公司）以上试剂均为分析纯。
甲醇（天津市科密欧试剂开发中心）；乙腈（天津市科密欧试剂开发中心）均为色谱纯。
水为市售纯净水（杭州娃哈哈集团）
1.3 药品
牻牛儿酮对照品（111665-200401）；莪术醇对照品（100185-200）；标准莪术油(544-200202)均购自中国药品生物制品检验所
郁金药材：2006年3月购于佳木斯市金天药店，产地: 广西北京兴中中药饮片厂生产，批号：20051104。10批温莪术的来源见表1。
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表1 实验用温莪术来源
编号 来源 采集时间 炮制时间 06-1 浙江端安制药厂 2003.12 2004.3 06-2 浙江天端药业 2004.12 2005.1 06-3 浙江天端药业 2004.12 2005.1 06-4 浙江天端药业 2004.12 2005.1 06-5 浙江天端药业 2004.12 2005.1 06-6 浙江天端药业 2006.01 2006.4 06-7 浙江天端药业 2005.12 2006.4 06-8 浙江天端药业 2005.12 2006.4 06-9 浙江天端药业 2005.12 2006.4 06-10 浙江天端药业 2005.12 2006.4
2 实验方法
2.1 供试品的制备
2.1.1 挥发油的提取
分别取温莪术与郁金药材，经适当粉碎，分别在混合均匀的500 g中药材粉末中称取50.0 g，将药粉与8倍量的水，即400 ml置于1000 ml的圆底烧瓶中，振摇混匀，浸泡过夜，加入数粒玻璃珠，连接挥发油提取器与冷凝管。自冷凝管上端加水使充满挥发油提取器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止。置电热套中缓缓加热至沸，控制冷凝下的回流液每 s 内2～3滴，并保持微沸8 h；停止加热，放置片刻，待没有回流液滴下时，由挥发油提取器的上部将挥发油取出。
2.1.2 挥发油的精制
将挥发油置于梨形瓶内，加入无水硫酸钠适量，振摇，当瓶底有尚未结块的无水硫酸钠，且具有流动性的时，不再增加无水硫酸钠,静止2 min, 将液体取出，用乙醚反复5次冲洗残留在无水硫酸钠中的挥发油，合并乙醚，在旋转蒸发仪上于37 ℃回收乙醚，当
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