岛津LC-10A液相色谱使用规程（紫外检测器）
1. HPLC样品必须经过0.45μm微孔滤膜过滤（最好用进口的，油膜可过滤水溶剂和有机溶剂，水膜只能过滤水溶剂）。
2. 左边一列的仪器从上到下分别是：荧光检测器，A泵，B泵，脱气装置。 中间一列的仪器从上到下分别是：示差检测器，主控器，自动进样器。 右边一列的仪器从上到下分别是：紫外检测器，柱温箱。
3. 估算本次测定所需的流动相体积，检查一下与A泵连接的瓶中的有机相和与B泵连接的瓶中的水相是否能够完成本次测定，体积不够补足之。
4. A泵永远连接有机相（甲醇和乙腈），B泵永远连接水相（去离子水，超纯水？，盐溶液）。
5. 如果所用的流动相为有机相与盐溶液的混合，建议取一小烧杯，按有机相和盐溶液的比例混合，看是否产生混浊或者沉淀，如果有此现象建议重新查找新的流动相，以免堵塞仪器管路。
6. 按自动进样器门上的“push”，打开自动进样器的门，拉出自动进样器的样品盘，将待测样品瓶放在样品盘中，样品盘的0号放第1个样品，1号放第2个样品，以此类推。样品瓶的装液量建议1-1.5mL？。如果样品中有挥发的物质，样品瓶要加上带胶垫或者铝箔的瓶盖。
7. 打开A泵，B泵，脱气装置，自动进样器，紫外检测器，柱温箱的开关，顺序无严格要求，但要最后打开主控器开关。
8. 拧松A泵和B泵的阀（DRAIN），阀上标明了拧松（OPEN）和拧紧(CLOSE)的方向，轻轻拧一下，拧松即可。
9. 分别按下A泵和B泵上的purge键，此时A泵和B泵的显示屏显示PURGING LINE，说明此时正在冲洗A泵和B泵，待冲洗结束，A泵和B泵的显示屏重新显示流速和压力，此时拧紧A泵和B泵的阀（DRAIN），即向CLOSE方向旋转阀，不用太用力，拧紧即可。
10. 冲洗A泵和B泵的时候，两泵从瓶子中抽出的液体应不夹杂着气泡。如果夹杂着气泡，则此次冲洗完毕后，再purge一次。如果还有气泡，将插入瓶中的滤头拔下，垂直放入小烧杯正中央，加入去离子水没过滤头，超声清洗30s，重新装在管路上，再重新按泵上的purge键观察，一般会恢复正常。
11. 打开柱温箱的门，检查里边是否有色谱柱，所安装的色谱柱是否为我们想用的（一般应为C18柱），柱子是否安装正确，柱温箱内上部有三个管路，左边两个分别连接示差检测器（上有标签RID）和荧光检测器，右侧连接紫外检测器（柱子应该连在这根管路上）。
12. 打开电脑，双击CLASS-VP→双击Instrument 1，此时如果电脑与仪器成功连接上了，应该听到一声长鸣。
13. Control→LC Setup Assistant 调出LC设备控制界面（有时候双击Instrument 1就有该界面，不用调取），界面上有图形化的泵，自动进样器样品盘，色谱柱，紫外检测器。
14. File→Method→New，点击LC设备控制界面中泵的图形。点击Pumps，A.Flow处输入A泵流速，B.Flow处输入B泵流速，P.Max处输入最大压力（超过该压力，仪器自动停泵，保护仪器和柱子，一般设定为？）。点击CTO-10Avp，Oven temp处输入柱温。点击SPD-10Avp，Wavelength Ch1处输入检测波长，Acquisition Channel On前打勾，Run Time处输入运行时间。如果需要梯度洗脱，点击Time Program进行设定。关掉该界面，注意不要关掉Instrument1的界面，点击屏幕右上角的×，这里有两个×，上边的×是Instrument1的，别点错了。
15. File→Method→Save，File name处输入Method名称，一般格式为：“年月日+自己名字”，例如：20110825lzm。Save in处点击下拉菜单选择Local Disk(C:)\\CLASS-VP\\Methods\\年的文件夹，例如：Local Disk(C:)\\CLASS-VP\\ Methods\\2011。点击LC设备控制界面中的Download，载入该方法。 16. File→Sequence→New，Data path处输入：C:\\CLASS-VP\\Data\\data年\\年-月\\年月日+自己姓名。例如：C:\\CLASS-VP\\Data\\data2011\\11-08\\20110825lzm。Data file处输入：年月日a(00)。例如：110825a(00)。Start vial处输入第一个样品在自动进样器样品盘中的位置编号，一般为0。End vial处输入最后一个样品在自动进样器样品盘中的位置编号+1。Injection volume处输入：进样量，单位μL。Repetitions create multiple records签名打勾。全设定完，点击对话框右上部的OK。电脑会用英语询问该文件夹不存在，是否创建之，点Yes。 17. 点击Yes后，会出现Sequence界面，将第一行Reps处的“1”修改为“2”，
意为第一个样品进样两次。第一个样品多走一针是为稳定机器？。最后一行vial处改为-1，Volume改为1，Method处改为C:\\CLASS-VP\\Method\\C18protect. Met（是用这个方法保护C18柱子吗？），也有其他的保护C18柱的方法，酌情选之，或者自己按照14、15中的步骤创建之，但是保护色谱柱的这一步在Sequence最后必须要有。
18. File→Sequence→Save，Save in处点击下来菜单，选择Local Disk(C:)\\ClASS-VP\\Sequence\\年\\年-月，例如：Local Disk(C:)\\ ClASS- VP \\ Sequence\\2011\\11-08。File name处输入：年月日+自己名字，例如20110825lzm。 点击Save。点击LC设备控制界面中的Download，载入该Sequene。 19. 看Instrument 1主界面，最上边一行为File、Edit、View等。第二行为新建，打开，保存等命令的图标。第三行为柱温箱开关，基线归零，自动冲洗进样器，冲洗自动进样器（两个按钮全是冲洗自动进样器吗？），泵的开关等的图标，点击第一、三、四、五个图标。
20. 打开柱温箱的门，检查一下色谱柱的上下是否漏液。如果漏液则需要点击泵开关的图标，关掉泵，重新安装色谱柱。
21. Control→preview，调出正在运行的图谱，跑流动相30min，然后点击Instrument 1主界面第三行中图标的第二个（基线归零）。（这步操作的对不对？） 22. 最小化preview界面，回到LC设备控制界面，点击Sequence Run→start。 23. 仪器会按Sequence编辑的序列逐一进样，点击LC设备控制界面中，形象化的样品盘图标可进入Sequence界面，跑完的样品会在Status处显示为“Completed”。没有Completed的样品可在Sequence界面上修改，例如：删除或者插入样品，更改Method等。
24. 更改正在运行的样品运行时间的方法：Control→ Extend，输入数字。例如：Control→ Extend，输入5，则延长5min，输入-5则缩短5分钟。
25. 中断当前运行样品和当前Sequence的方法：看上数第二行的命令按钮，在运行Sequence后，有一个红色圆形按钮，鼠标点击之，电脑会用英语询问：“是否停止当前样品，点Yes；是否停止当前Sequence，点No。”此时当前样品就停止了，直接运行下一个样品。如果要停止当前的Sequence，就这两次询问都点Yes。
26. 看跑完样品的图谱的方法：点击CLASS-VP→ offline processing→ Instrument 1→ File→ Data（按年月日和自己的名字找文件夹） → Open→选择要看的图谱，点Open，谱图即被打开，如果谱图上没有积分的峰高和峰面积，就点击屏幕最上边一行的命令按钮中的Analyze。点击Reports → view→ Area%，则能得到更清楚全面的数据报告。
27. 如果梯度洗脱不会设定，即设定方法时，Time Program表格不会填写，点击CLASS-VP→ offline processing→ Instrument 1→ File→Method，随便点击别人的方法，打开，看看有没有设定梯度洗脱的，仿照别人Time Program表格的填法，自己设计自己的Time Program表格。注：设定梯度洗脱，开始时间只能从0.1开始，不能从0开始。
28. 整个Sequence跑完后，关闭软件，如果此时仪器与电脑成功断开连接，也会听到一声长鸣。
29. 关掉各种设备，最先关掉主控器，其他设备关闭的顺序无严格要求。
岛津LC-10A液相色谱使用规程（示差检测器）
1. HPLC样品必须经过0.45μm微孔滤膜过滤（最好用进口的，油膜可过滤水溶剂和有机溶剂，水膜只能过滤水溶剂）。
2. 左边一列的仪器从上到下分别是：荧光检测器，A泵，B泵，脱气装置。 中间一列的仪器从上到下分别是：示差检测器，主控器，自动进样器。 右边一列的仪器从上到下分别是：紫外检测器，柱温箱。
3．估算本次测定所需的流动相体积，所配流动相是否能够完成本次测定，体积不够补足之，将B泵的滤头从DI水的瓶子中取出，放入配好的流动相的瓶子中。
4．A泵永远连接有机相（甲醇和乙腈），B泵永远连接水相（去离子水，超纯水？，盐溶液）。
5．按自动进样器门上的“push”，打开自动进样器的门，拉出自动进样器的样品盘，将待测样品瓶放在样品盘中，样品盘的0号放第1个样品，1号放第2个样品，以此类推。样品瓶的装液量建议1-1.5mL？。如果样品中有挥发的物质，样品瓶要加上带胶垫或者铝箔的瓶盖。
6．打开A泵，B泵，脱气装置，自动进样器，示差检测器，柱温箱的开关，顺序无严格要求，但要最后打开主控器开关。
7．拧松B泵的阀（DRAIN），阀上标明了拧松（OPEN）和拧紧(CLOSE)的方向，轻轻拧一下，拧松即可。
8．按下B泵上的purge键，此时B泵的显示屏显示PURGING LINE，说明此时正在冲洗B泵，待冲洗结束，B泵的显示屏重新显示流速和压力，此时拧紧B泵的阀（DRAIN），即向CLOSE方向旋转阀，不用太用力，拧紧即可。 9．冲洗B泵的时候，两泵从瓶子中抽出的液体应不夹杂着气泡。如果夹杂着气泡，则此次冲洗完毕后，再purge一次。如果还有气泡，将插入瓶中的滤头拔下，垂直放入小烧杯正中央，加入去离子水没过滤头，超声清洗30s，重新装在管路上，再重新按泵上的purge键观察，一般会恢复正常。
10. 打开柱温箱的门，检查里边是否有色谱柱，一般里边安装的应为C18柱，取下C18柱，安装上一个小铁柱？，将上下的管路连接起来，柱温箱内上部有三个管路，左边两个分别连接示差检测器（上有标签RID，小铁柱应该连在