C. 多数原生动物，所有细菌和真菌 D. 所有真菌和细菌，部分原生动物 E. 以上都不对 （ ）7.用于选择培养真菌的培养基是 。
A. EMB培养基 B. 马丁氏培养基 C. 查氏培养基 D. 高氏培养基 E. 牛肉膏蛋白胨培养基 三、填空题
1.微生物6大营养元素为 、 、 、 、 和 。 2.化能自养型微生物生活的碳源是 ，能源是 。 3.自养生物的碳源是 。
4.根据碳源不同，可将微生物分为 和 。 5.根据能源不同，可将微生物分为 和 。 6.根据电子供体不同，可将微生物分为 和 。
7. 自1998年发现以来，可替代琼脂（Agar）作为培养基固化剂的是 ，它能提高一些菌的可培养性。 四、判断题
（）1.豆饼加一定量的葡萄糖等分析纯的化学物质构成的培养基是合成培养基。 （）2.营养物质进入微生物细胞的主要障碍是细胞壁。 （）3.营养物质的跨膜运输多需要蛋白载体和能量。 五、问答题
1.高氏一号培养基成分如下：可溶性淀粉，KNO3、NaCl、K2HPO4、MgSO4、FeSO4，琼脂、水。请回答下列问题：
a)这种培养基用于培养哪类微生物？
b)分别指出淀粉、琼脂、水和无机盐的作用。 2.简述微生物吸收营养物质的机制。
3.在微生物培养过程中，培养基的pH变化的原因是什么？如何维持所需的pH？ 4.如何从自然环境中分离光合细菌，明确分离的生态环境、培养条件与分离过程。 5.如何从自然环境中分离自生固氮细菌，明确分离的生态环境、培养条件与分离过程。
6.某实验中用酪素培养基平板筛选产胞外蛋白酶细菌，在酪素培养基平板上发现有许多均的菌落周围有蛋白质水解圈，是否能根据水解圈与菌落直径比大小，就断定该菌株产胞外蛋白酶的能力就大，为什么？ 7.设计实验从自然环境中分离以苯作为碳源和能源的细菌。
8.某些微生物对生长因子有很高的专一性，根据此可通过“微生物分析”对样品中的某维生素或氨基酸等进行定量。试设计实验利用某微生物对某样品中维生素B12的含量进行定量。
第6 章 微生物的生长及其控制
一、名词解释
1. 石碳酸系数 (phenol coefficient)
2. CFU (colony formation unit)
3. PRAS培养基（pre-reduced anaerobically sterilized medium） 4. 同步生长（synchronous growth） 5. 巴斯德效应（Paster effect） 6. 连续培养 (continuous culture ) 7.二次生长 （diauxie growth） 8. 干扰素 （interferon） 二、选择题
（ ）1. 某细菌悬液经100倍稀释后，在血球计数板上，计得平均每小格含菌数为7.5个，则每毫升原菌
悬液的含菌数为 个。
A. 3.75×107 B. 2.35×107 C. 3.0×109 D. 3.2×109 E. 3.75×109 （ ）2. 典型单细胞微生物分批培养时，在延迟期的最突出特点是 。 A. 代谢活跃 B. 生长迅速 C. 体积增大 D. 衰亡增加 E.无变化 （ ）3.消毒效果最好的酒精浓度为 。
A. 100% B. 90% C. 80% D. 70% E. 60% （ ）4.判断灭菌是否彻底的最主要依据是 。
A. 核酸是否被破坏 B. 真菌孢子是否完全杀死 C. 内生孢子是否被完全杀死 D. 蛋白是否被完全破坏 E. 培养后是否有菌
（ ）5.选择处于 生长时期的微生物作为种子可缩短培养延迟期。
A. lag phase B. logarithm phase C. steady phase D. death phase E. none of above （ ）6.常用于灭菌的光波波长为 。
A. 700~900 nm B. 600~700 nm C. 400~500 nm D. 300~500 nm E. 250~280 nm （ ）7. 以下环境因子对微生物生存起决定作用的是 。 A. 温度 B. 盐度 C. 湿度 D. 酸碱度 E. 光照度
（ ）8. 以下灭菌条件适合用于对含有葡萄糖和磷酸盐等液体培养基进行灭菌的是 。 A. 150℃,15磅/英寸 B. 130℃,15磅/英寸 C. 121℃,10磅/英寸 D. 115℃,10磅/英寸 E. 121℃,15磅/英寸
（ ）9. 升汞用于对实验室非金属器皿消毒的浓度是 。 A. 0.01% B. 0.1% C. 1% D. 10% E. 100% （ ）10. 巴氏消毒法的温度一般控制在 。
A. 115~155℃ B. 105~125℃ C. 95~115℃ D. 60~85℃ E. 45~55℃ （ ）11. 适合于对空气和不耐热的液体就行灭或除菌的方法是 。
A. 滤膜过滤法 B. 湿热法 C. 紫外照射 D. 超声波法 E. 加盐至合适浓度 （ ）12. 专性厌氧微生物是由于其细胞内缺少 ，从而不能解除分子氧对细胞的毒害。 A. BOD B. COD C. NOD D. SOD
（ ）10. 一般细菌、放线菌和霉菌分别 pH条件下生长良好。
A. 酸、碱和中性 B. 碱、酸和中性 C. 碱、中性和酸 D. 酸、中性和碱 E. 中性、碱和酸
三、填空题
1.细菌的个体生长包括 和 。
2.计算单细胞微生物时代时间应该在其生长时期的 。
3.酱油、墨汁和化妆品的防腐剂通常分别是 、 和 。 4.巴氏消毒法包括 和 。
5.利福平、卡那霉素和放线菌素抑制微生物的机制分别是 、 和 。 6.相同温度下，湿热灭菌效果优于干热灭菌，这是因为 。 7.在高碳氮比培养基中长时间培养微生物后其pH一般会 。
8.光合细菌可以分为 和 两种营养类型。 四、判断题
（）1.现代技术中常用FISH法在普通光学显微镜下对微生物进行计数。 （）2.紫外线杀菌主要是因光波和热对微生物的破坏作用。
（）3.平板菌落计数法所得到样品中微生物数量结果包括了所有活的微生物。 （）4.在细菌生长曲线中，稳定期的细胞不再增殖而表现出细胞数目处于稳定状态。
（）5.培养基pH影响微生物培养的重要因素之一。在对培养基进行高温灭菌过程中pH值常会升高0.2~0.4
左右，故在灭菌之前一般配置的pH比要求的稍低一些，并使用缓冲液。
（）6.连续灭菌可全部杀灭包括含有休眠结构的细菌，而间歇灭菌法不能达到完全灭菌的目的，只是适用
于不耐长时间高温的液体等中的普通不含休眠结构的细菌。 （）7.不同微生物间的所需最适生长条件通常有所不同，而同种微生物菌体生长的最适温度与积累代谢产
物的最适生长温度是相同的。
（）8.巴斯德在研究氧分压对酿酒酵母与葡萄糖消耗之间的关系时发现，氧浓度提高会降低糖的消耗，此
即巴斯德效应。 五、问答题
1.概述制作细菌生长曲线的操作过程，各阶段的特点，以及实践中的意义。此曲线适合于真菌么？为什么？ 2.微生物学实验室常用的灭菌方法有哪些？当对啤酒，培养皿，肉汁胨培养基，接种工具，无菌室空间进
行灭菌时，可分别采用何种方法，为什么？ 3.简述稀释平板计数法原理及操作过程。
4.从与氧气的关系角度可将微生物分为哪些种类？设计简单实验证明之。 5.欲从自然界中获得一株产生淀粉酶的细菌，如何设计分离、培养方案？
6.简述高压灭菌锅的工作原理，使用操作步骤及其注意事项？（注意区分手动和自动） 7.什么是FISH技术？简述其原理和过程。 六、计算题
大肠杆菌在37℃的牛奶中每12.5分钟繁殖一代，假设牛奶消毒后，大肠杆菌的含量为1个/100ml，请问按国家标准（30000个／ml），该消毒牛奶在37℃下最多可存放多少时间(分钟)？（说明：写出公式及式中符号代表意义、计算结果） 七、思考题
什么二次生长曲线（diauxic growth curve）？其生理生化和分子机制如何？
第7 章 微生物的新陈代谢
一、名词解释
1. Stickland反应 (Stickland reaction) 2. Park核苷酸 (Park nucleotides) 3. 硝化作用（nitrification） 4. 反硝化作用（denitrification） 5. 巴斯德效应（Paster effect） 6. 葡萄糖效应 (glucose effect ) 7.二次生长 （diauxie growth）
8.异型乳酸发酵 （heterolactic fermentation） 9.同型乳酸发酵 （homolactic fermentation）
10.酵母菌的I，II，III型发酵 （Type I, II, III fermentations of yeast） 11.混合发酵 (mixed acid fermentation) 12.硫酸盐呼吸 （sulfate respiration） 13. 类菌体 （bacteroids） 14.辅助色素 (accessory pigments) 二、选择题
（ ）1. 下列物质中不属于次生代谢产物的是 。
A. 纤维素 B. 抗生素 C. 生物碱 D. 生长素 E. 信息素 （ ）2. Nitrobacter进行呼吸产能是将电子最终传递给 。 A. O2 B. N2O C. NH3 D. NO2 E.N2
（ ）3.以下一般不能抑制细菌细胞壁合成的物质为 。
A. 青霉素 B. 万古霉素 C. 环丝氨酸 D. 短杆菌肽 E. 四环素 （ ）4.以下可与非豆科植物进行共生固氮的微生物是 。 A. Azotobacter B. Anabaena C. Rhodopseudomonas D. Frankia E. Beijerinkia （ ）5.ED途径的关键酶是 。
A. RuBisCo B. KDPG C. ATPase D. Pkase E. Nitrogenase
（ ）6.目前已知可固氮的微生物超过100多种，但都是原核微生物，它们生命活动的能量来源包括 。 A. 氧化磷酸化 B. 环式光合磷酸化 C. 非环式光合磷酸化 D. 底物水平磷酸化 E. 以上都可能