园艺植物遗传学
实验指导书
2008年5月
《园艺植物遗传学》实验指导书
目录
实验室工作规程?????????????????????（1） 实验一 植物细胞有丝分裂的制片和观察??????????（5） 实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八
植物细胞减数分裂的制片及观察??????????（9） 染色体核型分析?????????????????（13） 分离规律的验证?????????????????（15） 独立分配规律的验证以及基因的互作观察??????（18） 连锁遗传现象的观察和交换值的测定????????（20） 遗传力的估算??????????????????（22） 染色体结构变异以及多倍体的观察和鉴定??????（24） 1
实验室工作规程
一、守则
为了获得准确的实验结果，避免在工作中发生差错和意外事故，实验者必须遵守下列规则。
(1) 实验前必须制订周密的工作计划，预习实习内容。进入实验室后要按照计划或指导教师的规定进行操作，并随时把实验中出现的情况和最后结果详细地记录下来。
(2) 遗传育种学实验中大多数是借助于光学显微镜，在细胞学水平上研究生物的遗传特性，所以实验室、工作台、各种仪器、用具、玻璃皿以及实验者的双手都必须保持洁净，做到无灰尘、无脏物，以免干扰镜下观察结果。
(3) 盛有化学药品、试剂、溶液的瓶上，必须贴有标签，注明名称、成分、配制日期，并分门别类，安放在一定位置上，排列整齐，便于取用。
(4) 挥发性药品、有毒药品、强酸、强碱等，使用时切勿靠近眼、鼻、口、衣服。酸类稀释时，只能将酸徐徐倒入水中，绝对不可将水倒入酸中。
(5) 取用液体药品时，所用各类量具必须分开，不可混用，用后必须马上冲洗干净；称量固体药品时，先在称盘上放清洁蜡光纸或白纸，调试平衡后再称，保护称具不受腐蚀和防止药品相混。
(6) 进行显微镜检查时，切勿使染料或药剂沾污镜头和镜台，如有沾污必须随时擦干净；并注意各种试剂不要洒在工作台上，以免腐蚀。
(7) 一切药品和化学试剂都必须按最低使用量配用，切勿浪费。用过的固体废物、酸类、碱类、染料等应倒入废缸内，不可直接倒入水槽中，废酒精、二甲苯、固定液等分别倒入一定的瓶中，以便回收再用。
(8) 实验中如有丢失、损失仪器设备及用具，应及时报告并填写报告单，凡不遵从教师指导违反操作规程以致造成不应有的损失者，按其情节轻重，态度好坏，给予处理，赔偿全部或一部分。
(9) 实验室必须保持安静整洁，不准高场喧闹、随地吐痰、乱扔纸屑和脏物。 (10) 离开实验室前，将所用过的仪器用具擦洗干净，并放回原处；关闭电源、水源，并指派人员打扫清洁。
2
二、显微镜的清洁与保养
显微镜是遗传育种学实验中最重要的工具，必须注意防尘、防湿、防高温、防药品侵蚀。
(1) 提取镜箱时，必须右手提着镜箱，左手托着箱底，镜箱门朝着胸前一面；取显微镜时，必须右手紧握镜臂，左手托着镜底，防止显微镜滑落损坏。
(2) 显微镜取出后，先用软毛刷、纱布拂擦镜身的灰尘污物，各处缝隙及镜头上的灰尘，纤维等用洗耳球吹去，然后用擦镜纸试擦物镜和目镜头。擦时只能顺着一个方向多次抹擦，不能旋转抹擦，最后用细白绸把镜头再擦一次。
(3) 镜检时，低倍物镜只能作粗调旋调焦距，转换高倍物镜时，只能用细调螺旋焦距，切勿损坏镜头。
(4) 如果发现镜头被药物或者脏物沾污，应立即用擦镜纸浸沾少许二甲苯（以刚湿润擦镜纸为度）擦掉脏物或药液，并随即用擦镜纸擦干。
(5) 使用完毕后，同（2）进行清洁工作；转动物镜不要对着聚光镜，并降至最低点，放回镜箱，归还原处。
(6) 镜箱内干燥硅胶，必须定期更换。
(7) 显微镜必须与化学药物分开放置，严禁混藏。
三、玻璃器皿的清洁
1、器皿的清洁
(1) 将玻璃器皿放在搪瓷盆内加入适量的洗衣粉煮沸80分钟； (2) 冷却后用清水洗干净，滤干水分； (3) 放在洗涤液中泡30分钟；
(4) 再用清水冲洗干净，蒸馏水荡涤一下，晾干。 2、新载玻片与盖玻片的清洁
将新载玻片与盖彼片分别放在盐酸酒精中（95％酒精100份＋浓盐酸2份）浸泡4小时，再用流水冲洗干净，蒸馏水荡涤一下，滤干水分，放入95％酒精中备用。 3、陈旧载玻片与盖玻片的清洁
用过的陈旧载片与盖片、不适用的石蜡切片，清洁方法如下： (1) 将以上各种玻片放在洗衣粉水中煮15分钟。
3
(2) 在热水中洗去残留的树胶和脏物，把载片和盖片分开，按下列步骤分别清洗。
(3) 清水冲洗。
(4) 洗涤液中浸泡30 分钟。 (5) 清水冲洗，蒸馏水荡涤一下。 (6) 95％酒精浸泡备用。
擦试盖片时要小心，一只手夹住盖片两个边缘，另一只手持清洁纱布同时擦试两面，两指着力要均匀一致。
4