显微镜技术
第一节 光学显微镜技术概述
第二节 常规光学显微镜技术
一、普通光学显微镜
二、荧光显微镜
三、倒置显微镜
V型与U型倒置显微镜
四、相差显微镜
及相差装置进展: 第三节 特殊光学显微镜技术
1
(一)显微镜的几何光学成像原理 (二)物镜(三)显微镜的照明聚光镜(四)视场光阑与孔径光阑(五)目镜(六)普通光学显微镜的操作要点:(一)荧光的基础知识(二)荧光显微镜(三)荧光显微镜的基本操作步骤(四)荧光显微镜的操作注意事项(五)荧光显微镜标本制作特点和观察要求(一)用途:(二)(三)倒置显微镜的光学与结构特点:(一)基本原理(二)配置(三)操作(四)相差图像特点
一、暗视野显微镜
(一)暗视野显微镜的基本原理: (二)暗视野显微镜的组成 (三)图像特点: (四)安装与调试 (五)应用
二、近场光学显微镜
(一)近场光学显微镜的基本原理 (二)近场光学显微镜的基本结构 (三)近场光学显微镜的应用
三、原子力显微镜
(一)原子力显微镜的基本原理 (二)原子力显微镜的组成 (三)原子力显微镜的工作模式 (四)原子力显微镜的应用
第四节 激光扫描共聚焦显微镜 一、激光扫描共聚焦显微镜的基本原理 二、激光扫描共聚焦显微镜的主要特点 三、激光扫描共聚焦显微镜的主要应用 四、激光扫描共聚焦显微镜的基本结构 五、激光扫描共聚焦显微镜的主要操作步骤 六、双光子(多光子)激光共聚焦显微镜
第五节 显微镜摄影与显微摄影技术
一、显微摄影的基本原理 二、显微镜摄影中CCD的选择 三、显微摄影技术应用 四、CCD成像的操作步骤
2
第六节 图像分析技术 一、图像分析处理的基本概念
(一)图像处理和计算机图形 (二)计算机图像分析处理的特点 (三)图像处理的算法形式 (四)图像的特征提取
二、图像分析系统的基本配置
(一)图像分析系统的构成 (二)图像分析系统的基本软件
三、图像分析的医学应用
(一)图像分析的图像来源 (二)图像分析的基本内容 (三)医学图像分析的常用分析软件
主要参考文献
《组织学与胚胎学实验技术》第二章 显微镜技术
3
第一节 光学显微镜技术概述
显微镜是观察组织微细结构不可缺少的精密仪器。显微镜的种类很多、型号各异。除普通光学显微镜外,还有各种功能的显微镜,如荧光、倒置、相差、暗视野等各大类。
第二节 常规光学显微镜技术
一、普通光学显微镜
普通光学显微镜(light microscope)是最常用的观察组织切片的工具,机体各部分的微细结构必须用显微镜才能进行观察。显微镜包括光学、照明和机械三个系统,光学系统主要决定显微镜的质量好坏,它由目镜、物镜和聚光镜等组成。
(一)显微镜的几何光学成像原理 1. 有限远光学系统成像原理
图2-1 有限远光学系统成像原理图 尼康YS100教学显微镜
图2-1为有限远光学系统成像原理图及其相应产品,图中L1为物镜,L2为目镜,AB为标本,A′B′为物镜放大的实像,A〞B〞为眼睛看到的由目镜放大的虚像。A〞B〞离眼睛的距离为250mm至∞,该距离因人而异,通过微量调节物镜
4
L1与标本AB的距离,以达到A〞B〞离眼睛最舒适的距离要求。
2. 无限远光学系统成像原理
图2-2 无限远光学系统成像原理图 尼康研究级80i万能显微镜
图2-2 无限远光学系统成像原理图及其相应产品,图中标本AB所发出光线经物镜L1后,不再会聚成像而以平行光束射向LT, A′B′为光线经LT后放大的实像,A〞B〞为眼睛看到的由目镜放大的虚像。
无限远光学系统可以得到很好的平坦图像,由此目镜视野得以放大,又由于平行光路中加入各类附件方便,功能延展性好,因此高档显微镜均采用此光学系统。
LT称为镜筒透镜,安装于显微镜双目观察镜筒光线入口处。 有限远光学系统物镜与无限远光学系统物镜不能互换。
无限远光学系统明场图像
(二)物镜
物镜(objective)是显微镜最重要的光学部件,它直接影响成像质量和各项
5