Western Blot实验步骤(4)

2021-09-24 15:17

溶解后4℃保存。使用时,恢复室温,用量以盖过膜面即可,一次性使用。

洗脱抗体缓冲液(100mmol/L 2-Mercaptoethanol,2%SDS,62.5m mol/L Tris·HCl pH6.8)

14.4 mol/L 2- Mercaptoethanol(β-巯基乙醇) 700 l(通风厨里加)

SDS 2g

0.5mol/L Tris·HCl(pH6.8) 12.5ml

超纯水至 100ml

配制时,在通风厨内进行。4℃保存。可重复使用1次。

显影液(5X)

自来水(加热至50℃) 375ml (以下药品加到温水中) 米吐尔 1.55g

亚硫酸钠(无水) 22.5g

碳酸钠(无水) 33.75g

溴化钾 20.95g

补水至 500ml

配制时,上述药品应逐一加入,待一种试剂溶解后,再加入后一种试剂。4℃保存。使用时用自来水稀释至1倍。

定影液

自来水(50~60℃) 700ml (以下药品按顺序加入前者溶解后再加后者)

硫代硫酸钠 240g

亚硫酸钠(无水) 15g

冰乙酸 12.6ml

硼酸 7.5g

钾明矾 15g(水温冷至30℃以下时再加入)

加水定容至1000ml,室温保存

抗体

用TBST稀释至一定浓度使用,每张膜需0.5ml


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