摘要:L-丝氨酸是生物体内一种重要的中间代谢产物,现已广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。以E. coli W3110为出发菌株,首先以定点突变的方法解除了L-Ser对基因serA编码的磷酸甘油酸脱氢酶的反馈抑制作用,并将该突变基因与其它三个关键酶编码基因serB、serC和pgk进行串联表达;其次,通过随机突变方法,筛选获得了比酶活降低的丝氨酸羟甲基转移酶突变体GlyAm,并进一步考察了敲除丝氨酸脱水酶编码基因对菌株产L-Ser的影响;发酵结果表明,当同时敲除基因sdaA和sdaB时,菌体发酵约35 h后,L-Ser产量最高可达33 g/L,葡萄糖转化率约为18%。