2 槐米
槐米广义是为豆科植物槐（Sophora japonica L.）的干燥花蕾及花。中国各地区
产，以黄土高原和华北平原为多。夏季花未开放时采收其花蕾，称为“槐米”；花开放时采收，称为“槐花”。采收后除去花序的枝、梗及杂质，及时干燥，生用、炒用或炒炭用。
3 芦丁
芦丁，又名芸香苷，广泛存在于槐花、桑叶、水芹、银杏叶、苦荞麦、小蓟、红松松针、新疆雪莲等大多药用植物中[1-5]，具有抗心肌缺氧、缺血、抗心律失常、降低血清胆固醇、抑制血小板集聚、抗溃疡、抗肿瘤、抗炎、抗过敏、抗衰老、抗辐射、抗病毒和增强免疫力等功能，是治疗缺血性心脏病、心绞痛、慢性心功能不全、高血脂和预防动脉硬化、心机梗塞、脑血栓等疾病的天然绿色药物[4]。
芦丁属于黄酮类化合物[8]，从槐米中提取而来，即具有维生素P一样的作用及抗菌抗炎和抗辐射作用，又有调节毛细血管壁的渗透作用，能降低血管的脆性，有防止血管
超声强化碱法从槐米中提取芦丁的工艺研究
破裂和止血作用，并对紫外线具有极强的吸收作用，而且具有很好的抗氧化作用，是一种非常好的保健食品原料[9]。现在关于芦丁在护肤品中的使用研究越来越多，工艺制作已经相当成熟。利用芦丁的还原性将提取液添加在特制的雪花膏膏体内，制成了皮肤保健化妆品，经试验证明，人体涂抹后，强光下可免受紫外线辐射带来的危害，对日晒红斑、日晒性皮炎及多种色斑状均有明显的保健治疗作用[10]。
临床上芦丁主要用于高血压病的辅助治疗和用于防治因芦丁缺乏所致的其他出血症，如防治脑出血、高血压、视网膜出血、紫癜、急性出血性肾炎、慢性气管炎、血液渗透压不正常等症，同时还用于预防和治疗糖尿病及合并高血脂症[11]。国内外医药工业中用芦丁作原料生产芦丁片、维脑路通(羟乙芦丁) 、芦丁镁铬盐、多维葡萄糖羟丁芦丁、槲皮素等心血管药物[12]。特别是羟乙基芦丁片(曲克芦丁、维脑路通)[13]，因其由梁克军[14 ] 等用氯乙醇-醇介质法首先制得,并通过药品鉴定并投料生产。羟乙基芦丁的制备不仅增大了芦丁的溶解度,而且扩大了其药理作用和临床应用范围[15 ] ，从而扩大了芦丁的需求量。
芦丁及其衍生物具有广泛的药理活性[17-18]，马伯良将芦丁与阿斯匹林和硫酸镁制成芦丁复合物,药理实验表明其可减轻缺血性脑损伤等[19,20 ]。芦丁和金属离子可以形成稳定的配合物，具有抗菌、抗肿瘤活性，配合物与DNA的作用可以改变DNA的复制，从而阻碍肿瘤分子的增长[16]。故近年来芦丁金属配合物的研究是药学研究中的一个热点
[21]
。
4 超声波强化碱法提取槐米中芦丁的意义
目前多采用碱提酸沉工艺进行提取，但该工艺提取周期需时较长，而且提取率不
理想。有机溶剂提取率高，但由于有机溶剂的不安全性质，故不易利用。水提和碱提酸沉产率不尽人意。然而超临界流体的提取有着特殊的溶解能力，可设备是昂贵和应用范围是狭窄的，所以有必要进行研究。近年来，超声波辅助提取广泛应用于有机污染物、天然化合物及生物活性成分的提取，具有许多优点，可以取代目前既耗能源、时间，又造成环境污染，又无法进行有效提取的技术，是一项“可持续发展”的“绿色技术”，具有
良好的发展前景和巨大的应用潜力[6-7]。 本次实验用的是超声波强化碱法，综合利用超声波和碱提取。方法是考察单因素水
超声强化碱法从槐米中提取芦丁的工艺研究
平基础上进行正交设计提取槐米中芦丁；比较不同条件下提取的芦丁含量，确定槐米中芦丁用超声波强化碱法提取的最佳条件，为槐米花中芦丁的进一步分离提纯提供一定的理论依据，也为深入开发和利用槐米提供理论依据。
5 试验方法
5.1 供试材料、试剂及仪器 5.1.1 原料
槐米：在邵阳市红旗路中心大药房购买。
芦丁标准品：中国药品生物制品检定所，使用前不需要干燥处理，按C27H30O16计算，供UV法测定，本品含量为92.5%。
5.1.2 试剂
NaOH：分析纯，长沙分路口塑料化工厂 无水乙醇：分析纯，湖南江虹试剂有限公司 NaNO2：分析纯，长沙市国营延风化学试剂厂 Al(NO3)3:分析纯，天津市恒兴化学试剂制造有限公司
5.1.3 仪器
WFZ UV-4802H紫外可见分光光度计、7200分光光度计、电热恒温水浴锅、恒温箱、电子天平、容量瓶、试管、刻度试管、量筒、锥形瓶、玻璃棒、滤纸、烧杯等
5.2 实验方法及过程 5.2.1 超声波萃取原理
超声波细胞粉碎机是一种利用强超声在液体中产生空化效应，对物质进行超声处理的多功能、多用途的仪器，能用于动植物组织、细胞、细菌、芽胞菌种的破碎，同时可用来乳化、分离、分散、匀化、提取、脱气、清洗及加速化学反应等等。本实验所用仪器由超声波发生器和超声波换能器组件两大部分组成。超声波发生器（电源）是将220VAC、50HZ的单相电通过变频器件变为20-25Hz、约600V的交变电能,并以适当的阻抗与功率匹配来推动换能器工作，作纵向机械振动，振动波通过浸入在样品溶液中的钛合金变幅杆对被破碎的各类细胞产生空化效应，从而达到破碎细胞之目的。
超声强化碱法从槐米中提取芦丁的工艺研究
5.2.2 物料预处理
取槐米50g，置恒温箱30~40℃干燥24h后粉碎，槐米粉碎后，取过40~80目筛的槐米粉作为样品。
5.2.3 超声波强化碱法提取槐米中芦丁的简易流程
槐米称取2g置于锥形瓶配置对应PH的溶液用超声波处理（保护温度设为40℃，时间和功率根据实验方案设过滤吸取1ml显色并测定吸光度
5.2.4 芦丁含量的测定
分光光度法是鉴定黄酮类化合物结构的一种重要技术[16]，作为黄酮类物质中的一种，此方法对芦丁也适用，本文采用分光光度法测定槐花中的芦丁[]。根据我系实验室的情况，本文首先是使用WFZ UV-4802H紫外可见分光光度计确定芦丁在400-600nm处的最大吸收波长，然后使用7200分光光度计在最大波长处测定芦丁的吸光度（因为WFZ UV-4802H紫外可见分光光度计不能经常给我们学生使用，所以在做论文的时候不能统一时间，经与实验室老师商量，吸光度测定改用7200分光光度计）。
（1）芦丁标准曲线的制作 ①标准溶液的制备
准确称取芦丁标准品0.0100g，用30%乙醇水浴微热溶解，并完全转入50mL容量瓶中，用30%乙醇定容，得芦丁标准溶液。 ②测定波长的选择