舒筋活络胶囊抗类风湿性关节炎作用及机理研究(4)

2021-09-24 17:34

表7舒筋活络胶囊对醋酸致小鼠扭体反应的影响(x±sD)

与空白对照组比较:料‘木p<O.001,料:p<O.01,术p<0.05

表7结果表明:舒筋活络胶囊高、中剂量组明显抑制醋酸所致的小鼠疼痛,延长潜伏期。

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2.3影响免疫功能的实验

2.3,1对2,4一二硝基氯苯(DNcB)诱导小鼠皮肤迟发性过敏反应(DTH)的影晌拈1

取健康昆明种小鼠50只,雌雄各半,称重,随机分为5组。第

一组灌胃蒸馏水作为空白对照组;第二至四组分别灌胃舒筋活络胶囊高、中、低浓度的药液,作为给药组;第五组隔天皮下注射0.049/kg环磷酰胺作为阳性对照组。其余各组每天给药1次,连续灌胃给药7天。操作步骤如下:l、DNcB配制:致敏或攻击前以丙酮和麻油1:1为溶剂新鲜配制;2、致敏:给药前1d每鼠腹部脱毛3×3cm2;给药当日将50p11%DNcB溶液均匀涂抹于小鼠腹部,于次日再强化1次;3、DTH的产生与测定:致敏7d后,将1%DNcB溶液20肛1均匀涂抹于每只小鼠右耳进行攻击,24h后脱颈处死动物,称重,以8mm打孔器取两耳同一部位耳片,称重,并取胸腺、脾脏称重,以左右耳片重量之差表示肿胀度,计算脾指数=脾重(mg)/体重(g);胸腺指数一胸腺重量(mg)/体重(g)。对结果进行统计处理,结果见表8。

表8舒筋活络胶囊对DNCB诱导小鼠DTH的影响(X±sD)

与空白对照组比较::Ic料p<o.001,:l:术p<0.0l,半p<O.05

表8结果表明:舒筋活络胶囊高、中剂量组能明显抑制DNCB诱导的小鼠DTH反应。其高剂量组对小鼠胸腺生长有抑制作用。

2.3.2对小鼠溶血素抗体生成的影响n01

2.3.2.1鸡血细胞的制备:无菌条件下,取鸡血于盛有A1sever’s

溶液的灭菌锥形瓶中,鸡血与A1sever’s溶液比例为l:5,混匀。4℃冰箱保存。使用时以生理盐水洗涤3次,前两次离心速度1500r/min,离心5min,弃上清液和界面白细胞层,最后应连续两次离心(2000r/min,5min),直至红细胞压积值恒定,按比值用生理盐水配成所需浓度的红细胞悬液。

2.3.2.2免疫及给药:取昆明种小鼠50只,雌雄各半,按体重

随机分为5组。给药后第1天每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞悬液O.5m1/只进行免疫。第一组给等体积生理盐水作为空白对照组;第二至四组灌胃舒筋活络胶囊高、中、低浓度的药液作为给药组,连续给药7天;阳性对照组分别于第2、4、6天皮下注射环磷酰胺O.049/kg,免疫后7天即摘除眼球取血进行溶血素抗体测定。

2.3.2.3溶血素抗体测定:取血约1h后,2000r/min离心10min,

取血清lOm用生理盐水1m1稀释100倍,然后取稀释血清lml于试管内,与5%鸡红细胞悬液0.5ml和1:lO稀释后的新鲜豚鼠血清O.5ml混合,混匀,立即放入37℃恒温水浴锅恒温30min,然后立即取出放入冰浴中终止反应,离心,取上清液于540nm处比色,以1m1生理盐水加5%鸡红细胞悬液O.5ml,10%豚鼠血清0.5ml作为空白对照,分别测定各管光密度值(OD)。结果见表9。14

表9舒筋活络胶囊对小鼠溶血素抗体生成的影响(x+sD)

与空白对照组比较:,木木p<0.0l,术p<0.05

表9结果表明:舒筋活络胶囊高、中剂量组能明显抑制小鼠溶

血素抗体生成。

2.4大鼠佐剂-陛关节炎(AA)的实验

2.4.1造模

取健康雄性sD大鼠(150一1809)60只,按体重随机分为6组,

每组10只,第一组为正常对照组;第二组为造模对照组;第三组为阳性对照组(正清风痛宁40mg/kg);第四至六组舒筋活络胶囊高、中、低剂量组。予致炎前3天灌胃给药。用容积法测定正常大鼠双侧后肢足容积,参照文献“¨方法造模,除空白对照组外,其余各组每鼠右后足趾皮内注射O.1Ⅲl弗氏完全佐剂(10mg/m1)。

2,4.2对AA大鼠原发性关节肿胀的影响

造模后6、12、24、30、48、54、60、72h测定致炎侧足容积,

以其致炎前后差值表示其肿胀度,观察药物对AA大鼠急性免疫炎症的影响。结果见表10。

2.4.3对AA大鼠继发-胜关节肿胀的影响

造模后12、15、18、21、24、30d测定非致炎足(左足)的容积变化,以观察药物对从大鼠继发性关节肿胀的影响。结果见表1l。

继发症状见附图一至六。

2.4.4对AA大鼠体重的影响

造模后每7天测一次体重并记录体重变化(体重变化=每次所测

体重一第1天所测体重)。结果见表12;

表12舒筋活络胶囊对从大鼠体重的影响(x±sD)

与模型对照组比较:料p<0.Ol,木p<O.05,

表12结果表明:舒筋活络胶囊高剂量组在第2l天左右对从大鼠体重有明显增加作用。

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