（本文编辑：章洛秋）
人骨髓间充质干细胞定向诱导分化为脂肪细胞
作者：作者单位：
李海红， 付小兵， 张庆红， 周岗， 孙同柱
李海红(解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室,北京,100037;郧阳医学院附属太和医院,湖北,十堰,442000)， 付小兵,周岗,孙同柱(解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室,北京,100037)， 张庆红(郧阳医学院附属太和医院,湖北,十堰,442000)创伤外科杂志
JOURNAL OF TRAUMATIC SURGERY2006，8(1)1次
刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
相似文献(10条)
1.期刊论文 李海红.付小兵.周岗.白晓东.陈伟.朱国俊.蔡存良.孙同柱 人骨髓间充质干细胞体外分离培养、鉴定及标记 -创伤外科杂志2005,7(4)
目的探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)体外分离培养、鉴定和标记的方法以及生物学特性.方法无菌条件下穿刺人髂后上嵴抽取骨髓,采用直接贴壁法分离纯化hMSCs,体外扩增,用免疫细胞化学法及流式细胞仪分别对培养的hMSCs进行鉴定,同时检测第3代和同代溴脱氧尿嘧啶(5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)标记的hMSCs细胞周期.结果体外培养的原代hMSCs在培养24小时内可见少量贴壁细胞,7天达到融合,免疫细胞化学示CD44和CD105表达阳性,CD34表达阴性,流式细胞仪示CD44阳性率为89.64%,CD34为0.11%.大部分hMSCs核抗BrdU染色阳性,阳性率达90%.细胞周期显示第3代和同代BrdU标记的hMSCs约有90%的细胞处于G0/G1期,第10代为80%.结论 hMSCs在体外很容易分离培养和扩增,但随着传代次数的增加,hMSCs变得宽大扁平且增殖速度减慢,出现衰老现象;用BrdU标记hMSCs对其细胞周期无明显影响,可作为标记细胞的一种有效手段.
2.学位论文 郭新 人骨髓间充质干细胞体外分离培养和向内皮细胞诱导分化的研究 2003
该实验从人骨髓中分离纯化MSCs,采用联合鉴定和反向证明法,确定为高度同源细胞群.体外联合应用生长因子和不同细胞外基质,对其进行内皮诱导分化.采用免疫组化、细胞化学、免疫荧光、电镜、流式细胞分析及RT-PCR技术,在蛋白及核酸水平检测其分化标志,探讨其分化机制.结果显示,诱导分化后的细胞群为hMSCs和EPC之间的过渡细胞类型,具有内皮分化趋势,由此类型细胞再分化为内皮细胞.hMSCs的内皮诱导分化受局部微环境(细胞外基质ECM和生长因子)——干细胞小生境影响,ECM-整合素受体和生长因子-受体之间相互作用,调控hMSCs分化.该研究首次系统地探讨hMSCs的最适内皮分化条件,为将来体外大量产生内皮细胞提供实验依据,并为最终应用于缺血性疾病治疗,促进组织工程化器官的血管再生,达到微血管替代治疗目的,提供重要的实验和理论基础.
3.会议论文 王忠.高毅.汪艳.潘明新 人骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定 2007
目的:建立一种简便可行的人骨髓间充质干细胞的体外培养扩增方法，并就人骨髓间充质干细胞的表型、细胞周期、生长曲线、超微结构、核型等方面进行初步鉴定.
方法:应用密度梯度离心法分离人骨髓间充质干细胞，条件培养基培养.相差显微镜下观察HMSCs形态学变化；流式细胞仪检测HMSCs的表面标记以及细胞周期；绘制HMSCs的生长曲线，计算细胞倍增时间；扫描电镜和透射电镜观察HMSCs的超微结构；Giemsa染色检测HMSCs的细胞核型.
结果:密度梯度离心法能分离出纯度较高的HMSCs.HMSCs贴壁生长，以长梭形为主.细胞存活率均大于95%.流式细胞仪检测HMSCs CD29、CD34、CD44、CD45、CD71、CD105、CD166、HLA-ABC、HLA-DR、UEA-1阳性表达细胞比率分别为95.3%、1.8%、94.7%、0.8%、96.2%、96.6%、92.7%、96.3%、1.1%、98.7%.HMSCs的生长曲线呈S形，在传代7代之前具有较好的生长特性.超微结构显示HMSCs表面较多突起，孔隙较多，胞质丰富，粗面内质网发达，囊腔扩张，可见大量蛋白分泌物.核
4.期刊论文 王忠.高毅.汪艳.潘明新.WANG Zhong.GAO Yi.WANG Yan.PAN Ming-xin 人骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定 -中华神经医学杂志2006,5(10)
目的 建立一种简便可行的人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)的体外培养扩增方法,并就hBMSCs的表型、细胞周期、生长曲线、超微结构、核型等方面进行初步鉴定.方法 应用密度梯度离心法分离hBMSCs,条件培养基培养.相差显微镜下观察hBMSCs形态学变化;流式细胞仪检测hBMSCs的表面标记以及细胞周期;绘制hBMSCs的生长曲线,计算细胞倍增时间;扫描电镜和透射电镜观察hBMSCs的超微结构;Giemsa染色检测hBMSCs的细胞核型.结果 密度梯度离心法能分离出纯度较高的hBMSCs.hBMSCs贴壁生长,以长梭形为主.细胞存活率均大于95%.流式细胞仪检测hBMSCsCD29、CD34、CD44、CD45、CD71、CD105、
CD166、HLA-ABC、HLA-DR、UEA-1阳性表达细胞比率分别为95.3%、1.8%、94.7%、0.8%、96.2%、96.6%、92.7%、96.3%、1.1%、98.7%.hBMSCs的生长曲线呈S形,在传代7代之前具有较好的生长特性.超微结构显示hBMSCs表面较多突起,孔隙较多,胞质丰富,粗面内质网发达,囊腔扩张,可见大量蛋白分泌物.核型分析显示第3、6代hBMSCs的染色体数量和形态均未发生变化.结论 应用密度梯度离心法可得到纯度较高的hBMSCs,能表达hBMSCs的表型特征.hBMSCs能在体外较长期培养,细胞染色体数目未发生改变.
5.学位论文 杨志刚 人骨髓间充质干细胞的分离培养和诱导分化为神经元样细胞的研究 2006
目的：探索成人骨髓间充质干细胞的分离培养及诱导分化为神经元样细胞的体外条件。
方法：采用Ficoll淋巴细胞分离液(1.077g／m1)密度梯度离心法从人的骨髓中分离出骨髓间充质干细胞进行体外扩增。收集第2代细胞流式细胞仪检测MSCs表面标志。逐渐加入EGF、BME和ATRA诱导骨髓间充质干细胞向神经元细胞分化，通过免疫细胞化学法鉴定诱导后细胞神经元烯醇化酶、神经巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白的表达情况。
结果：流式细胞仪检测结果显示培养后的MSCs强表达CD29;较强表达CD44、CDl 66和CDl05；不表达CD45、CD34和HLA-DR。诱导剂诱导后，骨髓间充质干细胞分化为具有典型的神经元形态的细胞，免疫细胞化学显示78％的细胞NSE表达阳性；大约51％细胞Nsetin表达阳性；所有细胞GFAP均阴性表达。 结论：成人MSCs在体外可定向诱导分化为神经元样细胞，且具有较高的阳性分化率。
6.期刊论文 张向荣.郭光华.刘德伍.彭燕.Zhang Xiang-rong.Guo Guang-hua.Liu De-wu.Peng Yan 人骨髓间充质干细胞的分离培养及BrdU标记鉴定 -中国组织工程研究与临床康复2009,13(19)