7、假设所需条件全部具备，如何得到s期间同化的hela细胞群体？如何证明该细胞群体处于s期间 8、何为p53蛋白，举例说明p53蛋白在细胞周期调控中的作用。 略
9、解释癌基因、原癌基因并简述它们与细胞癌变的关系
癌基因是指人类或其他动物细胞（以及致癌病毒）固有的一类基因。又称转化基因，它们一旦活化便能促使人或动物的正常细胞发生癌变。原癌基因（proto-oncogene）是细胞内与细胞增殖相关的基因，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 (1)原癌基因的激活途径及其与细胞癌变的关系：
a.原癌基因的激活途径：基因突变（点突变，插入突变，缺失突变）；基因扩增；染色体重排（移位）。 b.与细胞癌变的关系：
i)原癌基因的编码产物为癌蛋白、蛋白质激酶、生长因子及其受体，对细胞增殖具有促进作用； ii)基因突变：会引起基因序列的改变，基因序列的改变都会导致其编码产物的性质改变，从而引起细胞恶性增殖(癌变) ；
iii)基因扩增：造成原癌基因拷贝数大量增加，合成过量的编码产物，引起细胞恶性增殖(癌变) ； iv)染色体重排（移位）：引起原癌基因编码产物的性质发生改变或合成过量的编码产物，也会引起细胞恶性增殖(癌变) 。
(2)抑癌基因的失活途径及其与细胞癌变的关系：
a. 抑癌基因的失活途径：点突变、基因缺失、基因转换、有丝分裂重组、不分离(染色体丢失或加倍)（答出4个以上即可给满分，少于4个时按实际答出个数给分）。 b.与细胞癌变的关系：
i)抑癌基因的编码产物为调节或抑制细胞周期通过特定阶段的细胞内蛋白、对细胞增殖起抑制作用的信号受体和信号转导物、可使细胞周期停止的监控点调控蛋白、促凋亡蛋白以及参与DNA修复的酶，对细胞增殖均具有拮抗作用。
ii)点突变和基因缺失都会引起基因序列的改变，从而导致其编码产物的性质改变，进而失去拮抗细胞增殖的作用，故可引起细胞癌变。
iii)基因转换、有丝分裂重组、不分离(染色体丢失或加倍)均能引起正常抑癌基因的丢失，从而丧失编码拮抗细胞增殖产物的功能，故可引起细胞癌变。
(3) 原癌基因、抑癌基因与细胞癌变的关系：
a.正常条件下，原癌基因和抑癌基因既相互拮抗又相互配合，处于一个动态平衡的状态，共同控制着细胞的增殖活动；
b.原癌基因的激活，或抑癌基因的失活，均能打破二者之间的动态平衡，使细胞增殖失控而发生恶性癌变。 10、简述程序性细胞死亡在个体发育过程中的作用。
、在细胞凋亡一词出现之前，胚胎学家已观察到动物发育过程中存在着细胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）现象，近年来PCD和细胞凋亡常被作为同义词使用，但两者实质上是有差异的。首先，PCD是一个功能性概念，描述在一个多细胞生物体中，某些细胞的死亡是个体发育中一个预定的，并受到严格控制的正常组成部分，而凋亡是一个形态学概念，至于细胞坏死不同的受到基因控制的细胞死亡形式；其次，PCD的最终结果是细胞凋亡，但细胞凋亡并非都是程序化的。
论述题
1.解释下列概念并说明他们在小肠上皮吸收葡萄糖过程中的作用 A、Active transport主动运输
B、Facilitated diffusion（协助扩散）协助扩散即促进扩散。
促进扩散又称易化扩散、协助扩散，或帮助扩散。是指非脂溶性物质或亲水性物质， 如氨基酸、糖和金属离子等借助细胞膜上的膜蛋白的帮助顺浓度梯度或顺电化学浓度梯度， 不消耗ATP进入膜内的一种运输方式。
C、Co transport协同转运，是指专一转运一种溶质（以ATP为能源)的泵又间接地推动其他电解质的主动转运。（是一类由Na+—K+泵(或H+泵)与载体蛋白协同作用，靠间接消耗ATP所完成的主动运输方式。）
被泵过膜的物质，再扩散回来时又能做功，就好像被泵上山的水再流下来时又能做功一样。 另一类特殊的转运蛋白与泵蛋白不同，他把一种物质的“顺势”转运偶联起来。例如植物细胞利用质子泵所产生的H+浓度梯度来推动糖类、氨基酸等养分被吸收进入细胞的活动。
D、Symport（共运输中的同向运输）是主动转运中继发性主动转运的一种，如果被载体转运的分子或离子都向同一方向运动，即称为同向转运。其载体成为同向转运载体。如葡萄糖-钠同向转运体。
是主动转运中继发性主动转运的一种，如果被载体转运的分子或离子都向同一方向运动，即称为同向转运。其载体成为同向转运载体。如葡萄糖-钠同向转运体。
2.何为蛋白质的分选？叙述滞留于内质网腔的可溶性蛋白、分布于细胞质膜上的整合蛋白和最终分泌出细胞外的蛋白从合成起始到完成分选整个过程的异同点。
蛋白质是由核糖体合成的，合成之后必须准确无误地运送到细胞的各个部位，此过程称为蛋白质的分选。
蛋白质分选途径大体可分为两种：
1）翻译后转运途径：在细胞质基质游离核糖体上完成多肽链的合成，然后转运至膜周围的细胞器，如线粒体、叶绿体、过氧化物酶体及细胞核，或者成为细胞质基质的可溶性驻留蛋白和支架蛋白
2）共翻译转运途径：蛋白质合成在游离核糖体上起始后由信号肽引导移至糙面内质网，然后新生肽边合成边转入糙面内质网中，在经高尔基体加工包装运输到溶酶体、细胞质膜或分泌到细胞外，内质网与高尔基体本身的蛋白质分选也是通过这一途径完成的。
影响因素：1.分选信号 2.核糖体的存在部位 蛋白质分选的四种基本类型：
1、蛋白质的跨膜转运：主要指在细胞质基质合成的蛋白质转运至内质网、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体等细胞器。
2、膜泡运输：蛋白质通过不同类型的转运小泡从其糙面内质网合成部位转运至高尔基体进而分选运至细胞不同的部位。
3、选择性的门控转运：指在细胞质基质中合成的蛋白质通过核孔复合体选择性地完成核输入或从细胞核返回细胞质。
4、细胞质基质中的蛋白质的转运。 苏州大学 2013细胞生物学 一．名词解释
1. luxury gene奢侈基因(Luxury gene)：即组织特异性基因（tissue-specific genes），是指不同类型细胞中特异性表达的基因，其产物赋予各种类型细胞特异的形态结构特征与功能。
2.gap junction间隙连接是动物细胞中通过连接子(connexons)进行的细胞间连接。
所谓“间隙”,有两层含义,其一是在间隙连接处, 相邻细胞质膜间有2～3nm的间隙;其二是在间隙连接的连接点处,双脂层并不直接相连, 而是由两个连接子对接形成通道，允许小分子的物质直接通过这种间隙通道从一个细胞流向另一个细胞。
[1]
3.cadherin钙粘蛋白是一种同亲型结合、Ca依赖的细胞粘着糖蛋白，对胚胎发育的细胞识别、迁移和组织分化以及成体组织器官构成具有重要作用。不同细胞及其发育不同的阶段其表面的钙粘蛋白的种类与数量均有所不同
4.checkpoint细胞周期检查点 （checkpoint）是细胞周期（cell cycle）中的一套保证DNA复制和染色体（chromosome）分配质量的检查机制。是一类负反馈调节机制。当细胞周期进程中出现异常事件，如DNA损伤或DNA复制受阻时，这类调节机制就被激活，及时地中断细胞周期的运行。待细胞修复或排除故障后，细胞周期才能恢复运转。
5.cell fusion细胞融合(cell fusion)，细胞遗传学名词，是在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备，膜蛋白的研究。
6.contact inhibition接触抑制(contact inhibition)是指细胞在生长过程中达到相互接触时停止分裂的现象，1954年，由艾伯克龙比(Aberchrombie)等首先发现。由于培养基中的生长因子耗尽时也会产生生长抑制，所以将正常细胞因相互接触而抑制分裂的现象改称为密度依赖性的生长抑制(density-dependent inhibition of growth)。在相同条件下培养的恶性细胞(malignant cells)对密度依赖性生长抑制失去敏感性，因而不会在形成单层时停止生长，而是相互堆积形成多层生长的聚集体，这种现象也说明恶性细胞的生长和分裂已经失去了控制，调节细胞正常生长和分裂的信号对于恶性细胞不再起作用。
7.kinetochore着丝粒(centromere)是真核生物细胞在进行有丝分裂(mitosis)和减数分裂(meiosis)时，染色体分离的一种“装置”。着丝粒是染色体分离的一种装置，也是姐妹染色单体在分开前相互联结的位置，在染色体的形态上表现为一个缢痕(constriction)。
8.transdifferentiation一种类型的分化细胞转变成另一种类型的分化细胞的现象称转分化（trans-differentiation），如水母横纹肌细胞经转分化可形成神经细胞、平滑肌细胞、上皮细胞，甚至可形成刺细胞。分化程度低的神经干细胞也可形成骨髓细胞和淋巴样细胞。
9.SNAREs ？（SNARE学说：肉毒神经毒素 (botulinum neurotoxin) 是世界已知毒性最强的生物毒素，它通过酶切在递质释放过程中起关键作用的SNARE蛋白，抑制神经递质释放，阻断突触传递. 肉毒的结合位点有低亲和力的和高亲和力的两种. 肉毒的结合过程分两步，它首先与细胞表面的神经节苷脂结合，形成低亲和力的聚合体，然后再与高亲和力的蛋白受体———synaptotagmin结合，形成牢固的三聚体结构，并由内吞进入细胞. 这种解释肉毒结合过程的双受体学说得到了越来越多的支持
10. telomeraes端粒酶-简介细胞中有种酵素负责端粒的延长，其名为端粒酶。端粒酶的存在，算是把 DNA 克隆机制的缺陷填补起来，藉由把端粒修复延长，可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗，使得细胞分裂克隆的次数增加。端粒酶让人类看到长生不老的曙光。
11.s-PCC s期早熟凝集染色体：PCC。Prematurelycondensedchromosome，M期细胞与间期融合后，M期细胞中的MPF可诱导间期细胞的染色体发生凝缩，这种现象叫做早熟染色体凝集(prematurechromosomecondensation)。产生的染色体就叫做PCC。G1期PCC为单线状，因DNA未复制。S期PCC为粉末状，因DNA由多个部位开始复制。G2期PCC为双线染色体，说明DNA复制已完成。
12.antiport继发性主动转运中被转运的物质分子与Na+扩散的方向相反，则成为逆向转运。
13.dynein纤毛中的一种蛋白复合物。 其具有三磷酸腺苷酶(ATP酶)活性，能分解ATP产生蛋白结构型的变化，从而引起纤毛的运动。存在于上皮组织的假复层纤毛株状上皮中。 如呼吸道管腔的内表面有很多纤毛，依赖于动力蛋白，这些纤毛能将呼收分泌的黏液及其所黏附的细菌和灰尘等异物，借纤毛节律性运动而排出体外。
14.Colchicine秋水仙碱，一种生物碱，因最初从百合科植物秋水仙中提取出来，故名，也称秋水仙素。纯秋水仙碱呈黄色针状结晶，熔点157℃。易溶于水、乙醇和氯仿。味苦，有毒。秋水仙碱能抑制有丝分裂，
破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期。这种由秋水仙碱引起的不正常分裂，称为秋水仙碱有丝分裂。在这样的有丝分裂中，染色体虽然纵裂，但细胞不分裂，不能形成两个子细胞，因而使染色体加倍。自1937年美国学者布莱克斯利（A.F.Blakeslee）等，用秋水仙碱加倍曼陀罗等植物的染色体数获得成功以后，秋水仙碱就被广泛应用于细胞学、遗传学的研究和植物育种中。 15.Ras protein Ras是大鼠肉瘤(rat sarcoma,Ras)的英文缩写。Ras蛋白是原癌基因 c—ras的表达产物，相对分子质量为21kDa。Ras属单体GTP结合蛋白，具有弱的GTP酶活性。Ras蛋白的活性状态对细胞的生长、分化、细胞骨架、蛋白质运输和分泌等都具有影响，其活性则是通过与GTP或GDP的结合进行调节。 许多真核细胞中，Ras在PTKs介导的信号通路中也是一种关键组分。Ras蛋白是ras基因表达产物，是由190个氨基酸残基 组成的小的单体GTP结合蛋白，具有GTPase活性，分布于质膜胞质一侧，结合GTP时为活化状态，而结合GDP时为失活态，所以Ras蛋白也是GTPase开关蛋白。 16.chaperone与一种新合成的多肽链形成复合物并协助它正确折叠成具有生物功能构象的蛋白质。伴娘蛋白可以防止不正确折叠中间体的形成和没有组装的蛋白亚基的不正确的聚集，协助多肽链跨膜转运以及大的多亚基蛋白质的组装和解体。 17.Ran-GTP小分子的单体G蛋白Ran具有鸟苷三磷酸酶活性,其结合形式Ran-GTP作为区分间期细胞的核质和胞质的一个分子标记,并参与调控核质运输、指导纺锤体形成以及引导核膜解体与装配。 18.cell transplantation 细胞移植 19.indirect immunofluorescence如检查未知抗原，先用已知未标记的特异抗体（第一抗体）与抗原标本进行反应，用水洗去未反应的抗体，再用标记的抗抗体（第二抗体）与抗原标本反应，使之形成抗原—抗体—抗体复合物，再用水洗去未反应的标记抗体，干燥、封片后镜检。如果检查未知抗体，则表明抗原标本是已知的，待检血清为第一抗体，其它步骤的抗原检查相同。 direct immunofluorescence直接免疫荧光将标记的特异性荧光抗体，直接加在抗原标本上，经一定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光抗体，室温下干燥后封片、镜检。 20.lamin 核纤层蛋白(nuclear lamina protein) 脊椎动物细胞中有三种类型的核纤层蛋白(A,B,C), 核纤层蛋白A和C是由同一个转录单位编码的, 只不过是通过可变剪接形成不同的mRNA。它们在肽链上的差别是:核纤层蛋白A的C末端比核纤层蛋白C的C末端多133个氨基酸残基。核纤层蛋白B是由另一个转录单位编码的, 通过转录后的修饰,在羧基端添加了疏水的异丙基, 添加的脂肪酸帮助核纤层蛋白B插入到核膜的内脂层。三种类型的核纤层蛋白都以二聚体的形式存在, 有球形的头和尾部结构域以及一个杆状的α螺旋中心。这些核纤层蛋白二聚体以头-头、尾-尾相接的方式形成核纤层。 二．问答题 1. 比较细胞凋亡和细胞坏死 细胞凋亡和细胞坏死的区别 区别点 起因 范围 细胞凋亡 生理或病理性 单个散在细胞 细胞坏死 病理性变化或剧烈损伤 大片组织或成群细胞 细胞膜 染色质 细胞器 细胞体积 凋亡小体 基因组DNA 蛋白质合成 调节过程 炎症反应 2. 讨论ips的应用前景 诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells, iPS cells）最初是日本人山中申弥（Shinya Yamanaka）于2006年利用病毒载体将四个转录因子（Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc）的组合转入分化的体细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎干细胞的一种细胞类型。随后世界各地不同科学家陆续发现其它方法同样也可以制造这种细胞。iPS细胞 iPS细胞的出现，在干细胞研究领域、表观遗传学研究领域以及生物医学研究领域都引起了强烈的反响，这不仅是因为它在基础研究方面的重要性，更是因为它为人们带来的光明的应用前景。 在基础研究方面，它的出现，已经让人们对多能性的调控机制有了突破性的新认识细胞重编程是一个复杂的过程，除了受细胞内因子调控外，还受到细胞外信号通路的调控。对于Oct4、Sox2和Nanog等维持于细胞自我新能力的转录因子的研究正在逐渐地展开；利用iPS细胞作为实验模型，只操纵几个因子的表达，这更会大大加速对多能性调控机理的深入研究。 在实际应用方面，iPS细胞的获得方法相对简单和稳定，不需要使用卵细胞或者胚胎。这在技术上和伦理上都比其他方法更有优势，iPS细胞的建立进一步拉近了干细胞和临床疾病治疗的距离，iPS细胞在细胞替代性治疗以及发病机理的研究、新药筛选方面具有巨大的潜在价值。 此外，iPS细胞在神经系统疾病、心血管疾病等方面的作用也日益呈现，iPS细胞在体外已成功地被分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等。在临床疾病治疗中具有巨大应用价值。 3. p53蛋白如何获知并修复DNA损伤 研究表明，在健康的G1细胞中，P53蛋白的浓度很低。如果G1细胞受到遗传损伤（如受到紫外光照射或化学致癌物的作用），P53蛋白的浓度会快速上升。将含有断裂链的DNA注入细胞，可检测到P53蛋白浓度的这种变化。P53蛋白的浓度变化不是由于p53基因的表达的提高，而是由于P53蛋白降解速度的下降。P53蛋白的降解受MDM2蛋白的控制，该蛋白与P53蛋白结合，并将P53蛋白由细胞核输出到细胞质，并经遍在蛋白化途径被降解。DNA损伤如何导致P53蛋白的稳定？这与ATM基因有关。该基因编码一种蛋白激酶，该激酶是识别DNA损伤的多亚基复合物的组成部分，这种复合物一旦与受损伤的DNA结合，ATM激酶通过使一些靶蛋白磷酸化传递细胞周期停止的信号，而P53则是被ATM激酶磷酸化的靶蛋白之一。P53蛋白磷酸化之后不再与MDM2蛋白结合从而不再被输送到细胞质中被降解，因此DNA损伤后P53蛋白的浓度升高，从而激活p21基因和bax基因的表达，使细胞停止分裂进行修复或使细胞进入程序性死亡。如果p53基因突变，等于失去了分子警察，DNA损伤引起的突变会导致细胞癌变，也就肆无忌惮了。 4. 比较常染色质和异染色质并且说明和基因活化的关系 结构上： 常染色质折叠压缩程度低，处于伸展状态； 异染色质折叠压缩程度高，处于聚缩状态。 保持完整，一直到形成凋亡小体 凝聚在核膜下呈半月状 无明显变化 固缩变小 有，被邻近细胞或巨噬细胞吞噬 有控降解，电泳图谱呈梯状 有 受基因调控 无，不释放细胞内容物 破损 呈絮状 肿胀、内质网崩解 肿胀变大 无，细胞自溶，残余碎片被巨噬细胞吞噬 随机降解，电泳图谱呈涂抹状 无 被动进行 有，释放内容物。
功能上：
常染色质转录比较活跃；异染色质没有转录活性。 5. 比较离子通道和载体蛋白的异同
相同点：化学本质均为蛋白质、分布均在细胞的膜结构中、都有控制特定物质跨膜运输的功能 不同点：
1.通道蛋白参与的只是被动运输,在运输过程中并不与被运输的分子结合,也不会移动,并且是从高浓度向低浓度运输,所以运输时不消耗能量。
2.载体蛋白参与的有主动运输和协助扩散，在运输过程中与相应的分子结合，并且会移动。在主动运输过程中由低浓度侧向高浓度运动，且消耗代谢能量；在协助扩散过程中，由高浓度侧向低浓度侧运动，不消耗代谢能。（注;协助扩散也属于被动运输） 6.（共七个(￣_￣|||) 忘了俩）
三．论述题
MPF活性的调节机制和MPF的作用机制
MPF（成熟促进因子）是一种使多种底物蛋白磷酸化的蛋白激酶；
由M期Cyclin-Cdk(Cyclin-dependent protein kinase)周期蛋白依赖性激酶和周期蛋白形成的复合物。MPF=p34cdc2+cyclinB/A （cdc2=cdk1） Cyclin-Cdk复合物的多样性
Cyclin-Cdk---调控细胞周期的引擎：不同的周期蛋白与不同的CDK结合，构成不同的Cyclin-Cdk；不同的Cyclin-Cdk在不同的时相表现活性，影响不同的下游事件。 如：Cyclin C,D,E与CDK8,CDK4/6,CDK2结合，推动G1/S 转换； Cyclin A 与CDK2 ,作用于S期； Cyclin B/A+CDK1(cdc2), G2/M 转换；
G1 Cyclin-Cdk复合物对Rb蛋白磷酸化而调控细胞周期 不同的MPF调控细胞周期中的不同时相