大孔树脂柱色谱法分离纯化茶皂素的方法研究
由图2 可知,随着吸附时间的增加,吸附量逐渐增大,在吸附的前40min,吸附量可看作线性增加,当吸附时间大于90min 时,吸附量基本稳定。树脂对茶皂素吸附量随着吸附时间的延长而增加,达到一定时间后,吸附脱附达到平衡,所以吸附时间确定为90min。
3.3 动态脱附过程考察
3.3.1 脱附液中乙醇组成对脱附率的影响
表2、是HPD-100大孔树脂使用不同乙醇含量洗脱液洗脱试验结果,其中茶皂素回收率按
洗脱后固体物质量/g 茶皂素含量% 100 加入样品质量量/g 样品中茶皂素含量%下式计算:茶皂素回收率/%=
表2 HPD-100大孔树脂纯化茶皂素洗脱试验结果
乙醇的浓/%
洗脱前质量/g
洗脱后质量/g
茶皂素纯度/%
茶皂素回收率/% 0 14.82 6.06 26.78 18.02 20 15.23 7.39 34.25 27.34 50* 15.14 5.17 82.56 46.38 80* 15.16 6.78 97.44 71.70 90* 15.05 6.84 96.85 72.42 注:打*号的洗脱液洗脱前已经用0%、20%洗脱液进行了洗脱。
表2表明,纯水及20%乙醇浓度的洗脱液说分离出的物质量少,且茶皂素含量很低,表明洗脱出的物质大部分为糖类等杂质,乙醇含量达80%以上的洗脱液所得产品纯度已达97%左右,达到了纯化效果,茶皂素回收率也已达 72 %,乙醇浓度在90%时洗脱纯化效果及回收率并未由大的提高,所以使用乙醇含量为80%的乙醇/水混合溶剂作为洗脱液是适宜的。
3.3.2 不同大孔树脂分离纯化茶皂素总体实验效果分析
表3是三种大孔树脂分离纯化茶皂素的实验结果,洗脱过程是先经纯水和20%乙醇/水溶剂分别洗脱后,再用含乙醇80%的乙醇/水洗脱剂进行洗脱。
表3 茶皂素纯化影响结果
大孔树脂种类
粗茶皂素样品质量/g
纯化后茶皂素质量/g
纯化后茶皂素纯度/%
茶皂素回收率/% HPD-100 15.16 6.78 97.5 71.70 HPD-100A 15.30 6.02 96.8 62.66 AB-8 15.02 5.33 95.8 55.93
表3表明,不同种类的大孔树脂纯化粗茶皂素,纯化效果不同,在所用三种类型的大孔树脂中,HPD-100树脂纯化效果最佳,得率最高,所以在以后的纯化应用中,应选用HPD-100型树脂。