1997年第2期冯克宽等:酵母菌的分离及鉴定 1997 No12Theisolationandidentificationofyeast57牛奶培养基.
1.3 步骤
分离纯化试验,根据生态条件采集土样,富集培养.纯化采用稀释分离和平板划线,性能测定采用形态学特征和生理生化实验相结合的方法.
2 结果与讨论
2.1 形态学特征
1)细胞形态学观察.将分离菌种接种于麦芽汁液体培养基,25~28℃培养3d观察(见表1).
2)特征的培养观察.将分离菌种分别接种于麦芽汁液体培养基、固体培养基,28℃培养3d观察(见表1).
3)子囊孢子的形成.将鉴定菌株接种于Mcclary,25~283~5d,涂片在显微镜下观察(见表1).
4)假菌丝形成.3~5d观察(见表1).
5)(见表1).
2.2进行下列各项试验:
1)糖发酵试验.在Durhauistabe分装12.5%豆芽汁为糖发酵基础培养基,灭菌加10%糖液使糖浓度达2%,棉子糖4%,接种,25~28℃培养2~10d.
2)碳源同化.生长谱法测碳源同化,28℃培养1~2d,液体培养基测醇的同化,28℃培养3~7d.
3)氮源同化.基础培养基分别加入0.78%KNO3(NH4)2SO4,接种,28℃培养2~3d.
4)分解杨梅苷试验.将菌种接入杨梅苷培养基,28℃培养5~7d.
5)产类淀粉化合物测定.采用固体法,28℃培养7d.
6)产酯测定.用5%葡萄糖培养基,28℃培养3~5d.
7)牛奶冻化.脱脂牛奶培养基接种,28℃培养7~14d.
8)无维生素培养基中生长试验.将菌种接入无维生素培养基,28℃培养1~2d.
9)需维生素测定.生长谱法28℃培养1~2d.
10)耐渗透压.制50%、60%葡萄糖、1%酵母膏琼脂培养基划线接种,25~28℃培养7~14d.
11)尿素分解试验.制备尿素分解培养基,接种,25~28℃培养3~5d.
12)明胶液化试验.制备明胶培养基,穿刺接种,25℃以下培养7d.
13)37℃培养试验.最高、最适、最低温度常为某些菌种的鉴定特征之一,一般常以37℃作为测定酵母生长的温度.将菌种接种于固体培养基,37℃培养1~2d.
上述试验结果见表1和表2.
由表1和表2所示的各项试验结果来看,可知Sy952001菌株细胞卵圆形,为两端芽殖,无子囊孢子;它发酵葡萄糖,不发酵乳糖、半乳糖、麦芽糖、蜜二糖、蔗糖和棉子糖;碳源同化葡