实验十三：抗生素产生菌的初筛
一、 实验目的
1. 从已分离到的放线菌中筛选出能产生生理活性物质的菌株。 2. 学习抗生素产生菌的筛选方法。
二、 实验原理
抗生素是生物在生命活动过程中产生的一类次生代谢产物或与之相似的人工合成衍生物质，它们在低浓度时就可抑制其他一些生物的生命活动。因为抗生素在极低浓度下就能抑制或杀死微生物，因此在抗生素产生菌的筛选中，常以其发酵产物对这些指示微生物产生的抑菌圈大小来衡量抗菌作用的强弱和抗生素的有效浓度 。
三、 实验器材与试剂 1. 菌株
实验一分离到的微生物菌株。 2. 培养基
（1） 目的菌株培养基同实验八的分离培养基。
（2） 指示细菌培养基：蛋白胨0.25%，酵母提取物0.1%，牛肉膏0.06%，葡萄
糖0.5%，琼脂2%，pH7.0～7.2。
（3） 指示霉菌培养基：蛋白胨0.5%，酵母提取物0.01%，MgSO4·7H2O 0.05%，
K2HPO4 0.1%，葡萄糖1%，琼脂2%，pH自然。
（4） 指示酵母菌培养基：葡萄糖2%，酵母提取物1%，蛋白胨2%，琼脂2%，pH
自然。 3.器材
高压蒸汽灭菌锅，恒温干热灭菌箱，超净工作台，天平，电炉，1 mol/L HCL, 1 mol/LNaOH, pH试纸、量筒，玻棒，三角瓶，玻璃珠，试管，培养皿，移液管等
四、 实验步骤 1. 指示菌培养基的配制
配制细菌、霉菌、和酵母菌的指示培养基，分装于三角瓶中，0.08MPa灭菌30min，冷至60℃左右倒平板，每皿约20ml. 2. 指示菌悬液的制备
本实验选取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌分别作为革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性杆菌和含芽孢细菌的指示菌，黑曲霉作为丝状真菌的指示菌，啤酒酵母作为单细胞真菌的指示菌。
以无菌操作法挑取3环细菌或酵母指示菌菌苔，或霉菌的孢子至装有3ml无菌水的试管中，制成菌悬液，吸取0.1ml涂布在相应培养基的平板上。 3. 抑菌实验 （1） 琼脂块法
用无菌打孔器在长满分离所得菌株的培养皿中无菌操作垂直钻取连有培养基的菌块，用灭菌镊子移至涂有指示菌的平板上，每个平板放四块，做好标记。将平板正放在37℃温箱中培养1～2d，观察菌块周围的透明圈大小。透明圈越大，表示抑菌能力越强。 （2） 滤纸片法
用滤纸蘸取发酵液少许，贴于指示菌平板上，30℃温箱中培养1～2d后观察菌块周围的抑菌圈大小。