胞水平。
A.内周血B.外周血C.内环境D.外环境
3.红细胞生成素是一种(D),在胎儿体内由肾脏及肝脏产生,而成人体内由肾脏产生。 A.蛋白质B.脂肪C.糖类D.糖蛋白 填空题
1、红细胞素是调节红系祖细胞,对红细胞生成有特异性刺激作用的细胞因子 2、重组人红细胞生成素的临床应用是治疗慢性肾功能衰竭行血液透析和非透析 3、红细胞生成素反应器培养技术,灌流培养中,控制温度.DO.pH等培养条件,进行无血清培养基连续培养
4、将克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价.单一的特异性抗体,这种技术为单克隆抗体技术 简答题
1、如何建立重组人红细胞生成素表达细胞 ①构建红细胞生成素表达载体
有两种方式获得编码人红细胞生成素基因。一种是提取胎肝染色体DNA,然后以特异性寡核苷酸为引物,经聚合酶链式反应扩增出人红细胞生成素的基因片段,然后与克隆载体连接,克隆基因。另一种是提取人胎肝mRNA,逆转录合成cDNA文库,进行文库筛选,得到人红细胞生成素基因。
②构建表达红细胞生成素的细胞株
以二氢叶酸还原酶缺陷型的中国仓鼠卵巢细胞系为宿主细胞。将此细胞培养于100mm培养皿中,待细胞长满至50%~60%时,用无血清细胞培养基淋洗细胞,加入由5ml无血清培养基、10ugprEPO,10ugpDHFR,60ug脂质体组成的转染混合液,37℃培养4小时。吸出培养基,加入含10%胎牛血清的F12培养基,37℃培养过夜。随后在含青霉素、链霉素及10%胎牛血清的DEME中培养,获得抗性克隆。用胰酶消化,以1:5稀释细胞,在培养基中加入MTX至浓度为1nmol/L,继续培养10-14天,至抗性克隆出现。筛选抗性克隆。利用酶联免疫分析法确认所得到的细胞表达人红细胞生成素。
2、重组人红细胞生成素的分离纯化工艺过程 ①重组人红细胞生成素的分离
(1)CM-Sephrose亲和层析柱预先用Na-HAc-异丙醇活化,并用20mmol/LTrisHCl平衡缓冲液平衡。(2)收获培养基滤膜过滤后上CM亲和层析柱,平衡缓冲液平衡。(3)0~2mol/LNaCl,20mmol/LTris洗脱液梯度洗脱。(4)收集活性洗脱峰10mmol/LTris透析液透析过夜。 ②重组人红细胞生成素的纯化
(1)透析后的活性组分上预先平衡的DEAE离子交换柱。(2)0~1mol/LNaCl-Tris洗脱液梯度洗脱,收集活性洗脱峰。(3)上10%乙腈平衡的RP-HPLC柱(C4填料),10%~70%的乙腈溶液梯度洗脱,收集活性洗脱峰。(4)上凝胶柱(预先用20mmol/L柠檬酸盐缓冲液平衡),20mmol/L柠檬酸盐缓冲液平衡并洗脱,收集活性洗脱峰(红细胞生成素)
第十九章
1. 下列关于抗体的描述错误的是()
A. 能与相应抗原特异性结合的具有特定功能的免疫球蛋白 B. 抗体都是免疫球蛋白
C. 在抗原的刺激下,淋巴细胞增值和分化,并分泌抗体 D. 免疫球蛋白都具有抗体活性功能 2. 下列关于抗原的描述错误的是()
A. 抗原是能与抗体结合的物质
B. 抗原可分为蛋白抗原和非蛋白抗原
C. 对于蛋白抗原,在缺乏T淋巴细胞时,也能引起抗体产生反应,称为非T依赖性抗原 D. 抗原分子中与抗体结合的部位为抗原决定簇 3. 与抗原结合的部位是抗体的()
A. VL+CLB.VH+CH1C.VH+VLD.CH1+CH2 4. 血清中含量最高的Ig是()
A.IgMB.IgAC.IgED.IgG
5.用胃蛋白酶可将IgG分子水解成
A.F(ab)2+FcB.2Fab+pFcC.2Fab+FcD.F(ab)2+pFc
6.①通过胎盘,②激活补体,③结合细胞,④递呈抗原,⑤与抗原决定簇结合,上述各项功能
中哪一种组合与抗体Fc段有关
A.①+②+③B.②+③+④C.①+③+④D.①+③+⑤ 8.抗体的独特型决定簇位于
A.VL+CLB.VH+CH1C.VH+VLD.CH1+CH2
9.关于血清型IgA,下列哪一项描述是错误的
A.有J链B.形成二聚体C.凝聚后通过旁路途径活化补体D.可抗蛋白酶的水解作用 10.在慢性寄生虫感染时,人体内明显升高的Ig是
A.IgAB.IgGC.IgED.IgM
11.决定免疫球蛋白型与亚型的抗原决定簇位于
A.J链B.H链C.L链D.g链
12.对于Ig分子结构的描述,哪一项是错误的
A.每个Ig分子具有两条相同的轻链
B.一条重链和轻链的组合在结构上与分子的另一半对称 C.每个Ig分子都有链内二硫键构成的功能区 D.每个Ig分子都有铰链区
13.对于抗体的描述下列哪项是正确的
A.VH区长度是VL区的2倍
B.轻链的V区和C区有类似的三级结构 C.铰链区起连接重链和轻链的作用
D.一个Ig分子的轻链有两种不同的V区序列 14.关于单克隆抗体,下列哪项是错误的
A.最早建立杂交瘤技术的是Kohler和Mistein
B.杂交瘤细胞产生的是识别单一抗原决定簇的均一性抗体 C.单克隆抗体可制备成导向药物用于肿瘤的治疗
D.诱导单克隆抗体形成的抗原必须具有单一抗原决定簇
15.①由单一抗原决定簇诱导形成的抗体;②由一个B细胞克隆分泌的抗体;③理化性质、分子结构、遗传标记完全相同的抗体。在上述关于单克隆抗体的描述中,哪些是正确的
A.①+②B.②+③C.①+③D.①
16.决定免疫球蛋白类与亚类的抗原决定簇位于
A.J链B.V区C.L链D.H链 17.具有4个CH功能区的抗体是
A.IgD、IgMB.IgA、IgMC.IgM、IgED.IgA、IgE 答案:1-5DCCDB6-10ACDCC11-15CDBDB16-17DC
2.填空题
1. 免疫球蛋白是指具有()和()与抗体相似的球蛋白。 2. 具有γ链的免疫球蛋白命名为()。
3. 抗体与抗原发生特异性结合的部位位于()区,又称()区。 4. 由λ链与μ链组成的免疫球蛋白称() 5. IgE较IgA多一个功能区是()
6. 免疫球蛋白多聚体的表达形式可写作() 7. 分泌片由()细胞分泌,分子量为70KD
8. 抗体通过()段与中性粒细胞,单核细胞,NK细胞结合,产生ADCC作用 9. 血清中抗体特异性的高度不均一称为() 10.Fab段含有的L链和的H链。 11.IgG的Fc段含有和两个功能区
12.F(ab’)2与Fab相比,前者具有()价抗体活性。 13.IgG是唯一能通过()的抗体。 14.不能固定补体的Ig是()。
15.()是在个体发育中最早合成的免疫球蛋白。 16.ADCC是()依赖的()介导的细胞毒作用。
17.免疫球蛋白L链N端1/2,H链N端1/4或1/5的肽段,称为()区
1.抗体活性,化学结构 2.IgG
3.超变区,互补决定区(CDR) 4.IgM 5.CH4
6.(H2L2)n 7.上皮细胞 8.Fc 9.异质性
10.完整,近N端1/2 11.CH2,CH3 12.两价(双价) 13.胎盘 14.IgG4 15.IgM
16.抗体,细胞 17.可变(V)