蓬莱市疾病预防控制中心
作 业 指 导 书
版号：第2版 文件编号：PLCDCW031014
寄生虫检测作业指导书（除疟原虫）
2009年08月10日发布 2009年08月14日实施
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编写、修改记录
第1页共4页
编写人：张国英 完成编写日期：2009年08月01日 审核人：何茂祥 审 核 日 期：2009年08月03日 批准人：袁文兴 批准发布日期：2009年08月06日 版 号：第2版 修 订 次：第0次修订 修改处 修改内容 修改人 批准人 生效日期 蓬莱市疾病预防控制中心
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寄生虫检测作业指导书
文件编号：PLCDCW031014
版号：第2版 第2页共4页
索引：A蛔虫、鞭虫、蛲虫、钩虫、姜片虫、血吸虫、肺吸虫、华支睾吸虫检查方法
B 阿米巴痢疾病原学诊断方法
C 血吸虫检查（包括A的改良加藤厚涂片法） D 肺吸虫检验（包括A的改良加藤厚涂片法） E 华支睾吸虫检验（包括A的改良加藤厚涂片法） F 牛、猪肉绦虫检验： G 丝虫检验（厚血片法）
H 旋毛虫检查（压片法查幼虫包囊） I 蚧螨检查
J蠕形螨及其它螨类检查： H阴道毛滴虫检查(悬滴法)
A蛔虫、鞭虫、蛲虫、钩虫、姜片虫、血吸虫检查方法 1 采用改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法）进行病原学检查。 （一）、改良加藤厚涂片法（Kao-Katz法）操作步骤 1 材料的准备
1.1 塑料定量模板(统一供应)：规格为30mm×40mm×1mm的聚苯乙烯模板，中央孔为圆台形，其短径3mm，长径4mm，高1mm，容积为38.75mm3； 1.2 软性塑料刮片(统一供应)：两头刮片型；
1.3 尼龙绢片(统一供应):规格为80～100目，裁剪成8cm×8cm大小；
1.4 透明液的配制：取100ml蒸馏水、100ml纯甘油、3%的孔雀绿（或亚甲蓝）1ml，按此比例混合均匀；
1.5 亲水性透明玻璃纸(统一供应)：规格为30mm×25mm、厚40μm，使用前需在透明液中浸泡24小时以上，使玻璃纸显示绿色或蓝色；
1.6 载玻片：规格为75mm×25.5mm，厚1.0mm～1.2mm；
1.7 其它：原始登记表、镊子、剪刀、记号笔、标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。
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2 操作步骤
2.1 编号：每份粪样取1张载玻片进行编号（与待检粪样的编号相同）；
2.2 打开待检粪样的包装，将尼龙绢片置于待检粪样上，用塑料刮片轻压尼龙绢片并在其上轻刮，使细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面；
2.3 将定量板放在载玻片中部，然后用刮片将绢片表面的细粪渣填入定量板的中央孔内，使填满全孔并抹平；
2.4 小心移去定量板，使粪样留在载玻片上；
2.5 取一张浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸泡液，盖在粪样上，用橡皮塞或另一块较厚的载玻片覆于玻璃纸上垂直均匀用力压制，使粪便均匀地展开至玻璃纸边缘； 2.6 待粪便透明后及时镜检。 3 结果观察
3.1将透明后的加藤片置于光学显微镜的载物台上，在低倍（10×）镜下进行镜检。镜检时仔细检查每一视野，并特别注意受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵的鉴别。 3.2虫卵计数方法
每张涂片发现的蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵、其他吸虫卵都要计数。镜检所用显微镜统一目镜为10×的镜头。由于一些地区蛔虫感染度特别重，有时一张涂片虫卵数达数千甚至数万个，计数蛔虫卵比较费时，为此对蛔虫卵计数作以下规定：每张涂片首先随意粗查几个视野，若每个视野蛔虫卵数在10个以上，可以暂不计数蛔虫卵。先读完全片各视野的钩虫卵数和鞭虫卵数等，再用定视野抽查法推算全片蛔虫卵数。具体步骤是：
3.2.1按下图分布固定抽查10个视野，并算出抽查的10个视野蛔虫卵总数；
10个视野分布图
3.2.2计算出该涂片粪膜视野数，再推算出全片蛔虫卵数。
按一定的规律，如自左而右，自上而下，再自右而左，一行接一行，一个视野接一个视野地
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用推行器移动涂片，数出全片粪膜视野数，则：
全片粪膜蛔虫卵总数＝抽查的10个视野蛔虫卵数之和×全片粪膜视野数÷10 例：抽查的10个视野蛔虫卵数相加为366，全片粪膜视野数为78，则： 全片粪膜蛔虫卵总数＝366×78÷10＝2854.8≈2855
3.3 结果登记
观察的结果即时记录在原始登记表上，并及时转登附表1。 4 注意事项
4.1亲水性透明玻璃纸：使用前需全部浸入透明液中，浸泡24小时以上。
4.2把刮片上的细粪渣填入定量板时，必须填满中央孔全孔并抹平；压制涂片时尽量使粪便均 匀展开至玻璃纸边缘，但应避免粪渣溢出。
4.3涂片放置时间长短是确保镜检质量的关键。一般室温25℃、75%湿度以下，涂片放置时间不宜超过2小时；若温度低，空气湿度大，涂片放置时间可适当延长。总之，涂片放置时间取决于粪样透明度，只要透明了，就应及时镜检，否则透明过渡，薄壳虫卵易变形看不清楚，会造成漏检或误判。
4.4 用椭圆孔塑料定量板，每孔所容粪便重量平均41.7mg，每片所得虫卵数乘以24，即得每克粪便的虫卵数。粪检时每片虫卵数不必乘24，填在附表1的数值为实际数的虫卵数（不乘24）。
4.5 粪样一送三检，三片全计数后取平均值。
B 阿米巴痢疾病原学诊断方法 1.1 直接涂片法
1.1.1 取洁净载物玻片一张，在其中央滴生理盐水1～2滴。
1.1.2 用竹签挑取一小块粪便，在盐水中涂抹成一个直径为1cm粪便薄膜。其厚度以通过粪便薄膜 能看清书报上的字为宜。
1.1.3 盖上盖玻片后，显微镜下观察（天冷时注意玻片保温）。
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