4X=194 X=48.5
答：该蛋白质分子中α－螺旋体占分子的48.5％
2、测得一个蛋白质中色氨酸的残基占总量的0.29%，计算蛋白质的最低分子量。（色氨酸残基的分子量为186）（2分）
解：M=186*100/0.29=64138
3、肌红蛋白含铁量为0.335%，其最小分子量是多少？血红蛋白含铁量也是0.335%。试求其分子量。
解：肌红蛋白的分子量为：
100：0.335=M：56 M=100*56/0.335=16716.4 血红蛋白的分子量为： 100：0.335=M：（4*56） M=66865.7
6
4、一个大肠杆菌的细胞中含10个蛋白质分子，假设每个蛋白质分子平均分子量约为40000，并且所有的分子都处于α-螺旋构象，计算每个大肠杆菌细胞中的蛋白质多肽链的总长度。（假设氨基酸残基的平均分子量为118）
6-7
解：（10*40000/118）*0.15*10=5.08（cm）
5、测得一个蛋白质的样品的含氮量为10克，计算其蛋白质含量。
解：1克氮=6.25克蛋白质 10*6.25=62.5克
6、试计算油100个氨基酸残基组成的肽链的α.－螺旋的轴长长度。（2.5分） 解：0.15nmx100=15nm
7、下列氨基酸的混合物在pH3.9时进行电泳，指出哪些氨基酸朝正极移动？哪些氨基酸朝负极移动？（3分）
Ala（pI＝6.0） Leu（pI=6.02） Phe（pI=5.48） Arg（pI=10.76 ） Asp（pI=2.77） His（pI=7.59） 解：朝负极移动者：Ala， Leu， Phe， Arg， His。
朝正极移动者：Asp
8、计算100个氨基酸残基组成的肽链的α—螺旋的轴长度。15nm
9、已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%(按重量算),色氨酸分子量为204。 (1)计算最低分子量；
(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白分子量大约为7万,问该分子中含有几个Trp残基。 解答：（1）设：当该牛血清白蛋白只含一个Trp时的最低分子量为M 则:204/M=0.58%
M=0.58%/204=35172(约35000为计) （2）该分子中应含Trp残基个数为： 70000/35000=2
答：(1)该牛血清白蛋白最低分子量约是35000。
(2)当分子量为70000时，该分子含有二个Trp残基。
六、问答
1、一个A肽：经酸解分析得知由Lys, His, Asp, Glu2, Ala, 以及Val, Tyr和两个NH3分子组成。当A肽与FDNB试剂反应后,得DNP-Asp; 当用羧肽酶处理后得游离缬氨酸。如果我们在试验中将A肽用胰蛋白酶降解时, 得到二肽, 其中一种( Lys, Asp, Glu, Ala, Tyr)在pH6.4时, 净电荷为零, 另一种(His,Glu,以及Val)可给出DNP-His, 在pH6.4时,带正电荷. 此外, A肽用糜蛋白酶降解时,也得到二种肽, 其中一种(Asp, Ala, Tyr)在pH6.4时呈中性, 另一种(Lys, His, Glu2,以及Val)在pH6.4时,带正电荷，问A肽的氨基酸顺序如何?（10分） 答：由题意可知A肽为八肽，由Lys、His、Asp、Glu2、Ala、Val、Tyr组成。且其中包括
二个酰胺；
由FDNB及羧肽酶反应可知N端为Asp，C端为Val； 由胰蛋白酶解、pH＝6.4时电荷情况、生成DNP-His知所得二个肽段应为： Asp－Glu、
Ala、Tyr、Lys－ （Glu、Asp 其中有一个酰胺）
－His－Gln－Val
再由糜蛋白酶解、pH＝6.4时电荷情况知所得肽段应为： Asn－Ala－Tyr－
－Glu－Lys－His－Gln－Val 所以整个八肽的氨基酸顺序应为：
Asn－Ala－Tyr－Glu－Lys－His－Gln－Val
2、将含有Asp(pI=2.98), Gly(pI=5.97), Thr(pI=6.53), Leu(pI=5.98)和Lys(pI=9.74)的pH＝3.0的柠檬酸缓冲液,加到预先用同样缓冲液平衡过的Dowex-50阳离子交换树脂中,随后用该缓冲液洗脱此柱,并分部的收集洗出液,,这五种氨基酸将按什么次序洗脱下来?（8分） 答：氨基酸在离子交换层析中被洗脱下的次序取决于氨基酸在该条件下所带电荷的种类、大小以及分子本身的极性等。因此以上五种氨基酸在pH＝3.0缓冲液洗脱，洗脱下来的次序是：
Asp－Thr－Glu－Leu－Lys
先????????后
3、有一个七肽, 经分析它的氨基酸组成是: Lys, Gly, Arg, Phe, Ala, Tyr, 和Ser. 此肽未经糜蛋白酶处理时, 与FDNB反应不产生α-DNP-氨基酸. 经糜蛋白酶作用后, 此肽断裂成两个肽段, 其氨基酸组成分别为Ala, Tyr, Ser, 和Gly, Phe, Lys, Arg. 这两个肽段分别与FDNB反应, 可分别产生DNP-Ser和DNP-Lys. 此肽与胰蛋白酶反应, 同样能生成两个肽段, 它们的氨基酸组成分别是Arg, Gly, 和Phe, Tyr, Lys, Ser, Ala. 试问此七肽的一级结构是怎样的?
答 因为此肽未经糜蛋白酶处理时与FDNB反应不产生α-DNP-氨基酸可推断为：环七
肽
从经糜蛋白酶水解成的两个片段及它们与FDNB的反应产物可知该两片段可能
为：－Ser－Ala－Tyr－ （1）
－Lys－Gly、Arg、Phe－ （20） 此肽与胰蛋白酶反应生成的两个片段应是： －Gly－Arg－ （3）
－Phe、Tyr、Ser、Ala、Lys－ （40）
（20）肽段结合（3）肽段综合分析应为：－Lys－Gly－Arg－Phe－（2）
（40）与（1）肽段综合分析应为－Phe－Ser－Ala－Tyr－Lys－（4）
综合（2）与（4）肽段， 此肽应为： Gly－Arg－Phe－Ser－Ala ? ? Lys ________________Tyr
4、下列氨基酸的混合物在pH3.9时进行电泳，指出哪些氨基酸朝正极移动？哪些氨基酸朝负极移动？
Ala（pI＝6.0） Leu（pI=6.02） Phe（pI=5.48） Arg（pI=10.76 ） Asp（pI=2.77） His（pI=7.59） 解：向负极移动者：Ala， Leu， Arg， Phe， His.
向正极移动者：Asp
5、某多肽的氨基酸顺序如下:
Glu-Val-Lys-Asn-Cys-Phe-Arg-Trp-Asp-Leu-Gly-Ser-Leu-Glu-Ala-Thr-Cys-Arg- -His-Met-Asp-Gln-Cys-Tyr-Pro-Gly-Glu-Glu-Lys. 如用胰蛋白酶处理,此多肽将产生几个小肽?（假设无二硫键存在）
答：产生四个小肽
1. Glu－Val－Lys
2. Asn－Cys－Phe－Arg
3. Trp－Asp－Leu－Gly－Ser－Leu－Glu－Ala－Thr－Cys－Arg 4. His－Met－Asp－Glu－Cys－Tyr－Pro－Gly－Glu－Glu－Lys
6、比较下列各题两个多肽之间溶解度的大小
（1）〔Gly〕20和〔Glu〕20， 在pH7.0时 （2）〔Lys－Ala〕3和〔Phe－Met〕3，在pH7.0时 （3）〔Ala－Ser－Gly〕5和〔Asn－Ser－His〕5，在pH9.0时 （4）〔Ala－Asp－Gly〕5和〔Asn－Ser－His〕5，在pH3.0时
答：多肽在水中的溶解度主要取决它们侧链R基团大概相对极性，特别是离子化基团的数目，离子化基团愈多，多肽在水中的溶解度就愈大。因此在下列各题中：
（1）pH7.0时，〔Gly〕20的溶解度大于〔Gly〕20 （2）pH7.0时，〔Lys－Ala〕3的溶解度大于〔Phe－Met〕3 （3）pH9.0时，〔Asn－Ser－His〕5 溶解度大于〔Ala－Ser－Gly〕5 （4）pH3.0时，〔Asn－Ser－His〕5 溶解度大于〔A la－Asp－Gly〕5
7、一种酶分子量为360,000, 在酸性环境中可解离为二个不同成分, 其中一个成分分子量为120,000, 另一个为60,000. 大的占总蛋白的三分之二, 具有催化活性; 小的无活性. 用β-巯基乙醇处理时, 大的颗粒即失去催化活性, 并且它的沉降系数减小, 但沉降图案上只呈现一个峰. 关于该酶的结构可做出什么结论? 答：从题中已知酸水解结果可初步推测:
该酶有具有催化活性的大亚基，分子量为120000,
并含有二个（360000x2/3＝240000，240000/120000=2）, 还有分子量为6000无催化活性的小亚基，
个数也为二个,因（360000-120000x2）/6000=2
再从β－巯基处理结果又知在两个大亚基内有二硫键。
第四章 酶
一、名词解释
#1、Kcat：酶的转换数，即每秒钟每个酶分子，转换底物的微摩尔数。
#2、限制酶：在细菌的细胞内有一类识别并水解外源DNA的酶，称为限制性内切酶。 3、活性中心和必需基团
活性中心：是指酶分子中直接和底物结合，并和酶催化作用直接有关的部位。 必需基团：酶分子中有很多基团，但并不是所有基团都与酶的活性有关。其中有些基团若经化学修饰使其改变，则酶的活性丧失，这些基团称必需基团。
4、酶原：某些酶，特别与消化有关的酶，在最初合成和分泌时，没有催化活性，这种没有催化活性的酶的前体称为酶原。
5、同工酶：是指能催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构、组成却有所不同的一组酶。
#6、巯基酶：某些含有巯基的酶，在体内需要有自由的巯基存在时，才能发挥催化活性，若自由巯基发生改变，则酶的活性受到抑制或失去活性，这类酶叫巯基酶。
7、酶原激活：酶原在一定的条件下经适当的物质作用，可转变成有活性的酶。酶原转变成酶的过程成为酶原激活。这个过程实质上是酶活性部位形成或暴露的过程。 8、酶工程：指酶制剂在工业上的大规模生产及应用。
9、固定化酶：通过吸附、偶联、交联和包埋或化学方法做成仍具有酶催化活性的水不溶
酶。
#10、中间产物学说：酶在催化反应，酶首先与底物结合成一个不稳定的中间产物，然后中间产物再分解成产物和原来的酶，此学说称中间产物学说。 11、金属酶：酶分子中含有金属元素的酶类
12、别构效应剂：能够与酶分子中的别构中心结合，诱导出或稳定住酶分子的某种构象，使酶活动中心对底物的结合与催化作用受到影响，从而调节酶的催化反应速度及代谢过程的物质。
13、诱导酶：某些物质能促进细胞内含量极微的酶迅速增加，这种是诱导生成的，称为诱导酶。
14、比活性： 指单位重量样品中的酶活力，即U数/mg蛋白质或Kat数/kg蛋白质。 15、协同效应：在别构酶参与的酶促反应中，底物与酶结合后，引起了调节酶分子构象发生了变化，从而使酶分子上其它与底物结合部位与后继的底物的亲和力发生变化，或结合更容易，称为正协同效应，相反称为负协同效应。 #16、KNF模型：称为别构酶的序变模型，该学说认为酶分子中的亚基结合小分子物质（底物或调节物）后，亚基构象各个依次变化，从而实现催化功能。
17、别构酶：由于酶分子构相的变化而影响酶的催化活性，从而对代谢反应起调节作用的酶。
18、全酶与蛋白酶： 一些结合蛋白质酶类，除蛋白组分，还含有一对热稳定的非蛋白小分子物质，前者称为酶蛋白，后者称为辅因子，只有两者结合成完整体系才具有活力，此完整酶分子称为全酶。
19、共价修饰调节：一类调节酶可由于其它酶对其结构进行共价修饰，而使其在活性形式与非活性形式之间相互转变，称为共价修饰调节。
20、多酶体系：在完整的细胞内的某一代谢过程中，由几个酶形成的反应链体系，称为多酶体系。
21、辅基：结合酶中与酶蛋白结合较紧的，用透析法不易除去的小分子物质称为辅基。 22、诱导契合学说：该学说认为酶分子活性中心的结构原来并非和底物的结构互相吻合，但酶的活性中心不是僵硬的结构，它具有一定的柔性，当底物与酶相遇时，可诱导酶蛋白的构象发生相应的变化，使活性中心上有关的各个基团达到正确的排列和定向，因而使酶和底物契合而结合成中间络合物，并引起底物 发生反应。 23、核糖酶：具有催化功能的RNA分子称为核糖酶。 24、酶原：没有活性的酶的前体称为“酶原”。
25、酶的反馈抑制：酶作用的产物对酶本身的活性产生抑制作用，称为酶的反馈抑制。 #26、MWC模型：称为别构酶的齐变模型或对称模型，该模型认为别构酶的所有亚基，或者全部呈坚固紧密、不利于结合底物的“T”状态，或全是松散的、有利于结合底物的“R”状态，这两种状态的转变对于每个亚基是同时、齐步发生的。
二、选择
1、核酶的化学本质是 （ A ）
Ａ、核糖核酸 Ｂ、粘多糖