制药工程专业毕业论文 - 图文(3)

2019-01-19 18:29

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37 11.0fF 菌落不规则形、灰白至浅褐色,菌丝稀疏,棉絮状,未产孢。 注:差异显著性使用LSR法计算,小写字母代表α=0.05水平差异显著性;大写字母代表α=0.01水平差异显著性。

2.4 不同光照对菌丝生长影响

不同光照下,菌丝生长有所不同(图3),从菌丝生长速率和菌丝颜色上来看:24h光照处理组的菌落直径最大,其次是12h光暗交替处理组,24h黑暗处理组的菌落直径相对较小;24h光照处理组的菌落深褐色、表面有大量白色菌丝,12h光暗交替处理组菌落深褐色、表面有少量白色菌丝,24h黑暗处理组菌落深黄褐色。(表3)

表3光照对菌丝生长影响

处理 24h全光照 菌落直径(6d/mm) 57.3aA 菌落特征(6d) 菌落较规则圆形、深红褐色,表面有大量白色菌丝,周围菌丝灰白色,未产孢。 12h光暗交替 24h全黑暗 52.0bB 53.5bB 菌落不规则形、深红褐色,表面有少量白色菌丝,周围菌丝灰白色,未产孢。 菌落不规则形、深黄褐色,周围菌丝灰白色,未产孢。 注:差异显著性使用LSR法计算,小写字母代表α=0.05水平差异显著性;大写字母代表α=0.01水平差异显著性。

2.5 不同pH值对菌丝生长的影响

试验结果表明:pH值在4~10的范围内,菌丝均能良好生长,除pH=4处理组外,其他组生长速率没有显著差异,但各pH值对菌丝疏密程度及颜色有明显影响。其中,pH=6、7、8三处理组无显著差异但对pH=4处理组生长速率有极显著差异,pH=5、9处理组对pH=4处理组生长速率有显著差异,所以菌丝生长最适pH值是在pH=6~8。(表4)

表4 pH值对病原菌菌丝生长的影响

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菌落直径pH值 4 菌落特征(6d) (6d/mm) 43.7aA 菌落形状规则、边缘整齐,菌丝较密、较长、浅红褐色,未产孢。 5 51.0bAB 菌落形状规则、边缘整齐,菌丝较密、较长、红褐色略带紫色,未产孢。 6 55.0bB 菌落形状规则、边缘整齐、中部隆起,菌丝较密、较长、红褐色,未产孢。 7 53.3bB 菌落形状规则、边缘整齐、中部隆起,菌丝较密、较长、红褐色,未产孢。 8 55.3bB 菌落形状规则、边缘整齐、中部隆起,菌丝较密、较长、浅褐色,未产孢。 9 50.7bAB 菌落形状规则、边缘整齐,菌丝较密、较长、浅褐至灰白色,未产孢。 10 48.3abAB 菌落形状规则、边缘整齐,菌丝较密、较长、灰白色,未产孢。 注:差异显著性使用LSR法计算,小写字母代表α=0.05水平差异显著性;大写字母代表α=0.01水平差异显著性。

2.6 不同碳源对菌丝生长的影响

从菌落5d生长直径来看(图4),在供试的含有不同碳源的Czapek固体培养基上,该菌在只含有葡萄糖或麦芽糖做碳源的培养基中生长状况最好,显著优于在只含有乳糖、蔗糖、D-果糖、D-甘露糖或D-木糖的培养基上的生长状况,而在只含有D-甘露糖做碳源的培养基上生长状况最差,显著差于在只含有其他六种糖类培养基上的生长状况。(表5)

表5 不同碳源对病原菌菌丝生长的影响

碳源 葡萄糖 菌落直径(5d) 29.3aA 菌落特征(5d) 菌丝致密,红褐色,平铺,菌落不规则形,底部黑褐色,周围菌丝灰白色,未产孢。 11

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乳糖 25.7bAB 菌丝疏松,浅褐色,平铺,菌落圆形,周围辐射状菌丝灰白色,未产孢。 麦芽糖 29.7aA 菌丝致密,浅褐色至褐色,平铺,菌落不规则形,底部褐色,周围菌丝灰白色,未产孢。 蔗糖 23.0bB 菌丝致密,红褐色,平铺,菌落不规则形,底部黑褐色,周围菌丝致密、灰白色,未产孢。 D-果糖 23.0bB 菌丝致密,浅褐色至褐色,平铺,菌落近圆形形,底部褐色,周围菌丝灰白色,未产孢。 D-甘露糖 18.7cCB 菌丝致密,褐色,平铺,菌落近圆形,底部褐色,周围菌丝灰白色,未产孢。 D-木糖 23.0bB 菌丝致密,褐色,平铺,菌落近圆形,底部褐色,周围菌丝灰白色,未产孢。 注:差异显著性使用LSR法计算,小写字母代表α=0.05水平差异显著性;大写字母代表α=0.01水平差异显著性。

图4 不同氮源的对病原菌菌丝生长的影响

2.7 不同氮源对菌丝生长的影响

从图5可以看出,在供试的含不同氮源的Czapek固体培养基上,该菌

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在只含有肌氨酸做氮源的培养基上菌丝生长状况最好,极显著优于在只含有其它六种氮源的培养基上的生长状况;在只含有色氨酸或蛋白胨做氮源的培养基上菌丝生长状况较好,极显著优于只含有硝铵酸、磷酸二氢钾、L-苯丙氨酸或磷酸二氢铵的培养基上的生长状况。(表6)

图5 不同氮源对病原菌菌丝生长的影响 表6 不同氮源对病原菌菌丝生长的影响

氮源 硝酸铵 菌落直径(5d) 24.7aA 菌落特征(5d) 菌丝致密,浅褐色,平铺,菌落圆形,底部褐色,周围整齐、菌丝灰白色,未产孢。 硫酸铵 22.3aA 菌丝致密,浅褐色,平铺,菌落圆形,底部褐色,周围整齐、菌丝灰白色,未产孢。 色氨酸 35.7bB 菌丝致密,褐色,平铺,菌落圆形,底部褐色,周围整齐、菌丝灰白色,未产孢。 肌氨酸 45.7cC 菌丝较疏松,褐色至黄褐色,平铺,菌落圆形,底部褐色,周围菌丝辐射状、黄褐色,未产孢。。 蛋白胨 36.0bB 菌丝致密,褐色,平铺,菌落圆形,底部褐色,周围整齐、菌丝灰白色,未产孢。 L-苯丙氨酸 27.7aA 菌丝致密,褐色,平铺,菌落圆形,底部褐色,周围整齐、菌丝灰白色,未产孢。 13

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磷酸二氢铵 28.0aA 菌丝致密,褐色,平铺,菌落圆形,底部褐色,周围整齐、菌丝灰白色,未产孢。 注:差异显著性使用LSR法计算,小写字母代表α=0.05水平差异显著性;大写字母代表α=0.01水平差异显著性。

2.8 菌丝致死温度测定

经过45℃恒温水浴10min处理的病原菌菌丝生长状态良好,5d菌落平均直径达到41mm,且生长过程及菌落平均直径均与CK组并无明显差异(CK组菌丝1d后开始生长,5d菌落平均直径为42mm);经过50℃恒温水浴10min处理的病原菌生长较差,5d菌丝生长直径仅为14mm,约为CK的1/3,且在培养第4d才开始生长,较CK晚两天,说明50℃恒温水浴10min处理对菌丝生长产生了较大影响;55℃、60℃、65℃和70℃恒温水浴10min处理组菌丝5d不生长,说明该病原菌菌丝致死温度应该是55℃。

2.9 病原菌产孢诱导及病原菌鉴定

图6 分生孢子梗 图7 细而伸长的分枝端生球形膨大物

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