察豚鼠反应。若豚鼠全身瘫软几乎不动为麻醉成功。若注射过量麻醉剂易造成豚鼠死亡。
4、豚鼠心脏釆血
将麻醉后的豚鼠以仰卧位放置，用指腹触摸观察确定豚鼠心脏的位置（为搏动为剧烈处，通常在胸骨左缘）。右手持注射器，左手在左侧固定心脏，在三四肋间进针以30度角向左上刺入2.5cm左右，边进针边回抽针管，可见血液借心脏搏动的力量进入注射器内。此时固定针管及心脏的位置，继续采血。采血完成后拔出针头，用干棉球按压住针头的位置。（每次采血量可达4~5ml）。 5、豚鼠解剖
将通过心脏采血处死后的豚鼠放至在鼠板上，仰卧位放置，充分暴露颈部、胸部和腹部。用酒精棉球将豚鼠腹部的皮肤消毒。 用手术剪沿腹中线将豚鼠腹部和胸部的皮肤剪开，然后用手术剪将腹腔和胸腔剪开，仔细观察豚鼠腹腔和胸腔的各内脏器官。
内部脏器观察：1）肺：共七叶，右肺四叶，左肺三叶；
2）心脏：呈圆锥状，位于近胸骨端，心尖位于第六肋间。（乳白色胸腺附于主动脉弓前部）；
3）肝：紧邻隔下，呈暗红色，分四个主叶和四个小叶，可见一光亮的胆囊附着于肝下；
4）胃：分两部，贲门部和幽门部，胃容量约20-30g； 5）肠：分小肠和大肠。小肠包括回肠、空肠和十二指肠，大肠包括结肠、盲肠和直肠。盲肠特别发达，占腹腔容积的1/3，占体重的15%；
6）脾：脾斜卧在胃的左侧，呈深红色，长条扁平状； 7）胰：一端紧贴脾脏，一端邻近十二指肠，不规则状且呈粉红色；
8）肾：为黄豆大小，右肾比左肾位置稍高 ，肾脏前方有肾上腺（米粒大小），每肾内侧各有一根输尿管，开口于膀胱背侧；
9）卵巢和子宫：在肾脏前方见肉色带有颗粒样突起的腺体为卵巢，两侧卵巢下方各连有一条输卵管，输卵管连接于下方子宫，两侧子宫结合形
成“V”字形，经阴道开口于体外。 6、家兔的抓取和固定
自笼内取出时，用手抓住家兔颈部被毛与皮肤，另一手托住其臀部，将其中心承托在掌上。切忌强提兔耳或某一肢体。用兔盒将家兔的头部及四肢固定，使其头部无法向后缩即为固定成功。 7、家兔的性别鉴定
家兔的性别鉴定类似于豚鼠的性别鉴定。将家兔抓取后使其腹面朝上，用手按压家兔的会阴部，观察是否有阴茎出现即可判断雌雄。雄性家兔可观察到阴茎，雌性家兔可观察到会阴部。 8、家兔耳缘静脉采血
用兔盒固定家兔后，先拔去耳缘静脉注射部位的被毛，用手指轻弹兔耳使静脉充盈。或者用酒精棉擦拭耳缘静脉注射区使静脉充盈后，左手食指与中指夹住静脉的近心端，阻止静脉回流，用拇指和无名指固定耳缘静脉远心端，右手持5ml注射器从远端刺入，然后移动左手拇指固定针头，回抽注射器，若有血液进去注射器即为采血成功，继续缓慢采血。一次最多可采5ml。 9、家兔灌胃给药
兔灌胃系用导尿管配以一根粗的棉绳，用棉绳固定家兔开口，将导尿管从家兔牙齿外侧缓慢沿上颚插入食道。插入约导尿管的2/3的位置。回抽针管，观察到无气体进去针管后注射药物。灌胃完毕后先取出导尿管后松开棉绳。 10、家兔麻醉
以耳缘静脉采血的方式在耳缘静脉处进针，回抽针管后若有回血，则可将适量麻醉剂（按10%水合氯醛4ml/kg的用量）。将适量的麻醉剂注射入家兔体内，等待几分钟后观察家兔反应。若家兔全身瘫软几乎不动为麻醉成功。 11、家兔处死（空气栓塞法）
以耳缘静脉采血的方式在耳缘静脉处进针，向耳缘静脉中注入一定量的空气（5ml即可），使之发生空气栓塞而致死。观察到注入空气的家兔挣扎了两下后瞳孔扩散。 12、家兔解剖
将通过空气栓塞法处死后的家兔放至在兔板上，仰卧位放置，充分暴露颈部、
胸部和腹部。用水将家兔的胸腹部的被毛充分润湿。 用手术剪沿腹中线将家兔腹部和胸部的皮肤剪开，然后用手术剪将腹腔和胸腔打开，仔细观察家兔腹腔和胸腔的各内脏器官。
内部脏器观察：1）肺：共七叶，右肺四叶，左肺三叶。胸腔中间有纵膈将胸腔分为左右两部，互不相通。
2）心脏：呈圆锥状，位于近胸骨端，由左心房、左心室、右心
房、右心室组成。
3）肝：紧邻隔下，呈暗红色，可见一墨绿色的胆囊附着于肝下。 4）胃：分两部，贲门部和幽门部。
5）肠：分小肠和大肠，其总长度为体长的10倍。盲肠非常大，
长约0.5米。在回肠和盲肠相接处膨大呈一个后壁，呈圆形，为圆小囊。
6）脾：脾斜卧在胃的左侧，呈深红色，长条扁平状。 7）胰：一端紧贴脾脏，一端邻近十二指肠，为分布零散而不规
则状且呈粉红色，与脂肪相似但颜色不同。
8）肾：为扁豆大小，右肾比左肾位置稍高 ，肾脏前方有肾上腺
（米粒大小），每肾内侧各有一根输尿管，开口于膀胱背侧。
9）雄兔睾丸下降到阴囊，两侧阴囊为乳白色。
实验四：孕鼠剖腹取胎、近交系小鼠皮肤移植及小鼠卵巢和
睾丸切除手术技巧操作
一、实验目的
1、小鼠的睾丸及卵巢切除是目前实验动物手术操作中最基础的技巧，要求初步掌握手术操作的基本流程、术中的细节及了解术后护理； 2、掌握尾尾直皮的操作方法；
3、通过实际操作，了解通过剖腹取胎术得到幼鼠的基本原理、操作和用途；
二、实验材料
1、实验动物：试验用孕鼠、清洁级小鼠（雌雄各一只）；
2、实验器械与试剂：鼠笼、鼠板、5ml注射器、眼科剪、弯头镊、10%水合氯醛、手术剪、干棉球、酒精棉球；
三、实验内容
1、小鼠的睾丸切除手术
小鼠常规麻醉，采用俯仰卧位，置于固定台上。尿道口上5mm处脱毛，常规消毒。在腹白线左或右2-3mm处平行于腹白线开一个5-8mm手术口直达腹腔。进入腹腔可见包裹在睾丸周围的脂肪组织。将脂肪组织拉至腹腔，分离附睾并结扎相关血管，即可切除睾丸。将腹膜与肌层一起缝合，缝合皮肤。 2、小鼠卵巢切除手术
小鼠卵巢切除术多采用背部切口。小鼠常规麻醉，采用俯卧或侧卧位，置于固定台上，以肋下0.5cm，脊柱处1cm为中心剪除或拔出长毛，常规消毒，切口约0.5cm，切开皮肤，一边扩张一边钝性分离，用眼科镊夹住创口看到的肌层，在离脊柱肋下剪开腰肌，长约0.5切口，立即可见两侧包绕卵巢的脂肪组织及紧密相连的子宫角，用弯镊带环镊轻轻夹住脂肪组织将其拉出创口，在子宫角上部及下部的输卵管的部位做两个结扎，结扎后用环形镊或眼科剪切断子宫角，将卵巢摘除，检查有无出血，把脂肪组织推回腹腔内，将腹膜与肌层一起缝合，缝合皮肤。背部切口创伤小，直观，视野清楚，易操作，不需牵拉其它脏器，手术时
间短。
3、近交系小鼠皮肤移植实验
尾尾植皮法是在一组近郊系内，将小鼠尾部的皮肤轮换移植到另外一个小鼠的尾部。此方法一个可以同时做几只，省时间。而且有自体移植，可以用于鉴别植皮的脱落是排斥反应，还是手术失败造成的。麻醉动物，用75%的酒精棉球，消毒动物的尾部以及手术者的双手，随后用左手食指与中指夹住小鼠尾根，拇指与无名指夹紧鼠尾的尖部。右手用手术刀在尾皮上割一块长约0.75cm长的尾皮，刀口深度应露出白色的健，但又不割坏血管。这样即提供了一块供体植皮，又得到一处受体植床。取下皮片后，将皮片手术刀从右手方向转到左手方向，这样皮片也就旋转了180度，使皮片上的毛与尾部的毛长向相反，然后用眼科镊将植皮镶嵌到异体的尾部植床上，用滤纸轻轻地来回按几下皮片，使其尽可能紧贴在上面，本次实验由于时间限制，不进行结果观察。 4、孕鼠剖腹取胎实验
1）以颈椎脱臼法将孕鼠处死后，取仰卧位固定小鼠于动物固定板上，暴露腹部手术部位进行酒精消毒；（注意处死动作要快，勿用力按压腹部，防止胎儿受损。） 2）用剪刀沿腹中线剪开腹部皮肤、腹肌和腹膜，暴露子宫，用止血钳分别夹住子宫颈部和两侧卵巢韧带，剪断后取出子宫。取下子宫用盐水冲洗下，剪开子宫尽快将胎儿连胎盘一同取出。
3）用棉球擦拭幼鼠，轻轻按摩腹腔和腹部促使新生鼠开始呼吸，待新生鼠呼吸，血循环正常后，以止血钳扎断脐带。
4）本组孕鼠经剖腹产手术得到18只小鼠。新生小鼠体表无毛，皮肤红润，眼闭，胸前有一个深红色胎盘附于其上，体表略湿。