壁分离，因为动物细胞没有细胞壁。
（4）细胞发生质壁分离时，液泡变小，紫色加深；当细胞质壁分离复原时，液泡变大，紫色变浅。
（5）细胞已经死亡（可能是外界溶液浓度过大，细胞失水过多或质壁分离时间过长） （6）若要把视野中上方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向上移动。若要把视野中左方的物像移到视野的正中心，则要将装片继续向左方移动，因为显微镜视野 中看到的是倒像。
（7）换高倍物镜后，应调节细准焦螺旋使物像变得清晰；视野会变暗，可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。
（8）目镜越长，放大倍数越小；物镜越长，放大倍数越大。 （9）物镜与载玻片之间的距离越小，放大倍数越大。
（10）总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积；放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。
（11）放大倍数越大，视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。
（12） 更换目镜，若异物消失，则异物在目镜上；更换物镜，若异物消失，则异物在物镜上、移动载玻片，若异物移动，则异物在载玻片上。
（13）①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液 ②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片 ③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。
实验七 探究影响酶活性的因素（必修一P78、P83） 一．实验目的：
1．探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。 2．培养实验设计能力。 二．方法步骤：
提出问题→作出假设→设计实验→（包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格）→实施实验→分析与结论→表达与交流。
实例1：比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率 一）．实验原理：
鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算，质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。 二）方法步骤： 步骤 注意问题 解释 取4支洁净试管，编号，分不让H2O2H2O2有一定的腐蚀性 别加入2mL H2O2溶液 接触皮肤 0 将2号试管放在90C左右的 水浴中加热，观察气泡冒出情况，与1号对照 向3号、4号试管内分别滴入不可用同由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研一支滴管 有少量的过氧化氢酶，会影响实验准确性 磨液，观察气泡产生情况 肝脏研磨因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细液必须是菌作用而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，新鲜的 活性降低 肝脏要制研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出成研磨液 来，增加酶与底物的接触面积 2-3min后，将点燃的卫生香放卫生香现象：4号试管产生气泡多，冒泡时间短，卫分别放入3号和4号试管内时，动作要生香猛烈复燃，3号试管产生气泡少，冒泡时液面的上方，观察复燃情况 快，不要插间长，卫生香几乎无变化 到气泡中 避免卫生香因潮湿而熄灭 注意问题： ①实验时必须用新鲜的、刚从活的动物体中取出的肝脏作实验材料。肝脏如果不新鲜，肝细胞内的过氧化氢酶等有机物就会在腐生细菌的作用下分解，使组织中酶分子的数量减少且活性降低。
②实验中使用肝脏的研磨液，可以加大肝细胞内过氧化氢酶与试管中过氧化氢的接触面积，从而加速过氧化氢的分解。 考点提示：
（1）为何要选新鲜的肝脏？
（2）该实验中所用试管应选较粗的还是较细的？为什么？
（3）为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗？ （4）相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好？为什么？ （5）滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管？为什么？
（1）因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。
（2）应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。 （3）因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富；其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。
（4）研磨液效果好；因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。 （5）不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。 酶的专一性
（1）方案一：用同一种酶催化两种不同物质
淀粉（非还原糖） 淀粉酶 麦芽糖（还原糖） ① 蔗糖（非还原糖） 淀粉酶 蔗糖 ②用淀粉酶分别作用于淀粉和蔗糖后，再用斐林试剂鉴定，根据是否有砖红色沉淀生成来判断淀粉酶对二者是否有催化作用，从而探索酶的专一性。 （2）方案二：用两种不同酶催化同一种物质
淀粉（非还原糖） 麦芽糖（还原糖） 淀粉酶
① 淀粉（非还原糖） 淀粉酶 淀粉
②再用斐林试剂鉴定，从而探究酶的专一性。 疑难点拔：这三个实验为探索类实验。
①探索酶的高效性时，应合理设计对照实验，严格控制实验变量。
②探索酶的专一性时，设计实验首先要从已知入手，确定何为实验变量（自变量），何为因变量，何为控制变量。淀粉、蒸糖水解的产物，水解的速率等为变化的结果，即因变量，从因变量入手我们将推知自变量（实验变量）即淀粉酶对其的影响程度或它们之间的关系。淀粉、蔗糖在实验过程中的浓度、用量，淀粉酶的浓度、用量。水解过程的温度等都为控制变量，需遵循同时等量原则，以排除控制变量对2个水解反应的影响。
③探索温度对酶活性的影响时，通过研究某一因素，如温度（实验变量）对某一特定反应的影响时，要在其他因素（控制变量）相同的条件下进行。观察不同的实验变量（如不同的温度）对特定反应的影响结果（因变量），以便对实验结果（实验变量与因变量关系）进行科学的分析。
实例2：温度对酶活性的影响 一）实验目的：
1．初步学会探索温度对酶活性的影响的方法。 2．探索淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。
二）实验原理：
1．淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。
2．淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖（淀粉水解过程中，不同阶段的中间产物遇碘后，会呈现红褐色或红棕色。）麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。 注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C 三）方法步骤： 操作 注意问题 解释 取3支试管，编上号，然后分 别注入2mL可溶性淀粉溶液 另取3支试管，编上号，然后 分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液 将装有淀粉溶液和酶溶液的试不能只用不同温度防止混合时，由于两种溶液的温度不管分成3组，分别放入热水（约处理淀粉溶液或酶同而使混合后温度发生变化，反应温600C）、沸水和冰块中，维持各溶液 度不是操作者所要控制的温度，影响自的温度5min 实验结果。 分别将淀粉酶溶液注入相同温保持各自温度时间淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间 度下的淀粉溶液中，摇匀后，不能太短 维持各自的温度5min 在3支试管中各滴入1-2滴碘碘液不能滴加太多 防止影响实验现象的观察 液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录 用表格的形式显示实验步骤 序号 加入试剂或处理方法 试管 A B C a b c 1 2mL 2mL 2mL / / / 可溶性淀粉溶液 / / / 1mL 1mL 1mL 新鲜淀粉酶溶液 2 600C 1000C 00C 600C 1000C 00C 保温5min 3 将a液加入到A试管，b液加入到 B试管，c液加入到C试管中，摇匀 4 600C 1000C 00C 保温5min 5 滴入碘液，摇匀 2滴 2滴 2滴 6 观察现象并记录 实例3：PH值对酶活性的影响
操作步骤：用表格开式显示实验步骤：（注意操作顺序不能错） 序号 加入试剂或处理方法 试管 1 2 3 1 1mL 1mL 1mL 注入新鲜的淀粉酶溶液 2 1mL / / 注入蒸馏水 3 / 1mL / 注入氢氧化钠溶液 4 / / 1mL 注入盐酸 5 2mL 2mL 2mL 注入可溶性淀粉溶液 6 600C水浴保温5min 7 2mL 2mL 2mL 加入斐林试剂，边加边振荡 8 水浴加热煮沸1min 9 观察3支试管中溶液颜色变化变记录
实验八 叶绿体色素的提取和分离（必修一P97） 一．实验目的：
1．尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。 2．分析实验结果，探究叶绿体中有几种色素，以及各自所呈现的颜色。 二．实验原理：
1．叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙酮、乙醇等能提取色素。
2．层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析法来分离四种色素。
三、实验材料：幼嫩、鲜绿的菠菜叶 四、实验步骤： 步 骤 注 意 问 题 分 析 1．提取色素 加SiO2 加SiO2为了研磨得更充分。 5克绿叶剪碎，放入研钵，加CaCO3 加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。因为加SiO2、CaCO3和10mL 叶绿素含镁，可被细胞液中的有机酸产生的无水乙醇，迅速、充分研 氢代替，形成去镁叶绿素，CaCO3可中和液磨。（若没有无水乙醇，也 泡破坏释放的有机酸，防止叶绿体被破坏。 可用体积分数为95%的乙叶绿体色素易溶于无水乙醇等有机溶剂。 醇，但要加入适量的无水碳酸钠，除去水分） 2．收集滤液 尼龙布起过滤作用。 漏斗基部放一单层尼龙试管口用棉花塞塞紧是为了防止无水乙醇挥布，研磨倒入漏斗内挤压，发。 将滤液收集到小试管中，用棉花塞塞住试管口。 3．制备滤纸条 可吸收更多的滤液。 将干燥的滤纸，顺着纸纹干燥 剪成长6cm，宽1cm的纸顺着纸纹剪成层析时，色素分离效果好。 条，一端剪去二个角，并长条 在距这一端1cm处划一铅一端剪去二个可使层析液同时到达滤液细线。 角 笔线。 4．划滤液细线 用毛细吸管吸取少量滤滤液细线越细、防止色素带之间部分重叠。 液，沿铅笔线划出细、齐、越齐越好。 增加色素在滤纸上的附着量，实验结果更明直的一条滤液细线，干后重复三次。 显。 重复三次。 5．纸层析法分离色素 将3mL层析液倒入烧杯层析液不能没防止色素溶解在层析液中， 中，将滤纸条（划线一端及滤纸条。 朝下）插入层析液中，用烧杯要盖培养 层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发。 皿盖。 培养皿盖盖上烧杯。 6．观察实验结果 由上至下分别为： 胡萝卜素（橙黄色） 叶黄素（黄色） 叶绿素a（蓝绿色） 叶绿素b（黄绿色） 扩散最快是胡萝卜素，扩散最慢是叶绿素b，含量最多的是叶绿素a。 四种色素之所以能被分离，是因为四种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。溶解度越高扩散速度越快． 五：实验讨论：
1．滤纸条上的滤液细线，为什么不能触及层析液？
答：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中，实验就会失败。
2．提取和分离叶绿体色素的关键是什么？ 答：提取叶绿体色素的关键是：①叶片要新鲜、浓绿；②研磨要迅速、充分；③滤液收集后，要疑难点拔：四条色素带的分布与色素扩散速度有关，而扩散速度大小由分子量大小所决定，这四种色素的分子量分别是：胡萝卜素（C40H56）536、叶黄素（C40H56O2）568、叶绿素a（C55H72O5N4Mg）892、叶绿素b（C55H70O6N4Mg）906，所以色素带从上到下，即扩散从快到慢依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b。胡萝卜素与叶黄素分子量相差32，叶绿素a与叶绿素b的分子量相差14，故前二种色素的距离大于后二种色素的距离。色素带的粗细与色素的含量有关。通常叶绿素含量是类胡萝卜素的四倍，叶绿素a的含量是叶绿素b的三倍，叶黄素含量是胡萝卜素的二倍，含量越多，色素带就会越浓越粗，故由浓粗到淡细依次是：叶绿素a>叶绿素b>叶黄素>胡萝卜素。 考点提示：
（1）对叶片的要求？为何要去掉叶柄和粗的时脉？
（2）二氧化硅的作用？不加二氧化硅对实验有何影响？ （3）丙酮的作用？它可用什么来替代？用水能替代吗？ （4）碳酸钙的作用？不加碳酸钙对实验有何影响？
（5）研磨为何要迅速？要充分？过滤时为何用布不用滤纸？ （6）滤纸条为何要剪去两角？
（7）为何不能用钢笔或圆珠笔画线？
（8） 滤液细线为何要直？为何要重画几次？ （9） 滤液细线为何不能触到层析液？ （10）滤纸条上色素为何会分离？ （11）色素带最宽的是什么色素？
（12）滤纸条上相互间距最大的是哪两种色素？ （13）色素带最窄的是第几条色素带？为何？
（1）绿色、最好是深绿色。因为叶柄和叶脉中所含色素很少。
（2）为了使研磨充分。不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。
（3）溶解色素。它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于水。
（4）保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。不加碳酸钙，滤液会变成黄绿色或褐色。
（5）研磨迅速，是为了防止丙酮大量挥发；只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中来。色素不能通过滤纸，但能通过尼龙布。 （6）防止两侧层析液扩散过快。
（7）因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素，会影响色素的分离结果。 （8）防止色素带的重叠；增加色素量，使色素带的颜色更深一些。 （9）防止色素溶解到层析液中。
（10）由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。
（11）最宽的色素带是叶绿素a，它的溶解度比叶绿素b大一些。 （12）胡萝卜素和叶黄素。
（13）第一条色素带，因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。