-20℃ + + + + + + + + + 分析上述实验过程,回答下列问题:
(1)该探究性实验课题名称是 。
(2)第二步中”缓缓地”搅拌,这是为了减少 。 (3)根据实验结果,得出结论并分析。
①结论1:与20℃相比,相同实验材料在-20℃条件下保存,DNA的提取量较多。[来源:学科网] 结论2: 。
②针对结论I.请提出合理的解释: 。
(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性.在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是: ,然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
题型攻略 【知识储备】1.生物体内DNA复制与PCR反应的区别
比较项目 解旋 体内复制 在解旋酶作用下,细胞提供能量,部分解开 引物
PCR反应 加热至90℃,双链全部解开,不需要解旋酶 可以是RNA或单链DNA分子一小段RNA[来 源:Zxxk.Com] 特点 制 边解旋边复制,半保留复片段 体外迅速扩增 TaqDNA聚合酶 循环次数 相同点 不需要(只需DNA聚合酶) 需要 受生物体自身控制 30多次 生物体内的DNA复制或PCR体外DNA扩增都需要模板,四种脱氧核苷酸,且都需要在一定的缓冲液中进行,都遵循半保留复制。 2.血红蛋白的分离方法及相关原理 方法 凝胶色谱法 电泳法 离 3. DNA粗提取与鉴定不同试剂用途及原理比较
试剂 浓度 2mol/L 0.14mol/L NaCl 在2mol/L时最大、0.14mol/L时最溶液 小 0.015mol/L 鉴定时的溶媒 酒精 95%(体积分数) 除杂以提纯DNA 二苯胺 鉴定剂 该浓度下也能溶解DNA DNA不溶于酒精,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液 DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色 柠檬酸钠 0.1g/mL 抗凝剂 除去血液中的钙离子,防止血液凝固 △ △
用 途 溶解DNA 析出DNA 原理(“△”为实验的主要原理) DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变,溶解度△
根据各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同进行分原理 根据相对分子质量的大小分离蛋白质 【方法技巧】①不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。②材料不同,所采用的提取方法不同:a植物组织,取材→研磨→过滤→沉淀。b鸡血,
制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较纯净的DNA。