最后，无论是一台多好的酶标仪，脱离了良好的售后服务体系也是难以正常运作的。今年，各家厂商都在中国国内设立了办事处甚至亚太区总部，有些产品还专门研发了中文版的软件和说明书。这都说明了厂家对中国市场的重视。而正因为这种重视，无论是厂家直销还是选择代理分销，都会对国内的售后服务提出各自的要求和期望，最基本的就是普及仪器的应用工程师和维修工程师网络体系。
可以说，国内的各大城市里面，基本已经做到了部分品牌总有一个工程师在你身边。选购之前多与工程师交流，充分了解各家的性能特长和售后情况，反复对比，总能找到最适合自己需要的一款多功能酶标仪。
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍 浏览次数：1365 荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在生物学研究、农业科学、食品和环境科学以及临床检验工作中，目前市场市场上有多种支持荧光检测功能的多功能酶标仪，如TECAN(M1000，M200等)、Thmeral(Varioskan Flash)、Bio-tek（Synergy 2，Synergy 4等、MD（M2, M5）等多个厂商出品的多功能酶标仪都可以应用于荧光检测。
1.概述
常温下，荧光生色团分子处于基态最低振动能级，处于基态的分子吸收能量（光能、化学能、电能或热能）后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快重新衰变回到基态，衰变过程中释放的能量以光的形式释放出来，产生发光现象。分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。
由于发光物质不同，荧光有分子荧光和原子荧光之分，分子荧光为带光谱，原子荧光为线光谱，通常所说的荧光为分子荧光。通过测定所发射荧光的特性和强度，可以对物质进行定性、定量分析。
2.荧光检测技术
2.1荧光强度(FI)
荧光强度与荧光物质的浓度成正比，这是荧光分析法是量分析的依据。在生物学上的应用非常广泛，可以进行生物大分子定量，酶活性分析，荧光免疫分析，细胞学分析（细胞增殖，细胞毒理，细胞吸附等）和分子间相互作用。
FI检测在细胞凋亡检测中的应用
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小 亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。
活化的Caspase-3能够特异切割D1E2V3D4-X底物，水解D4-X肽键。根据这一特点，设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD- AMC,在共价偶联时，AMC不能被激发荧光，短肽被水解后释放出AMC，自由的AMC才能被激发发射荧光。根据释放的AMC荧光强度的大小可以测定 caspase-3的活性，从而反映Caspase-3被活化的程度。
在细胞毒性检测
体外细胞毒性研究对于检测新的生物来源或人工合成的细胞毒素以及例行的临床相关的检测都有着重要的意义。细胞膜非渗透性的核染料 Propidium iodide能穿透损伤的细胞膜，荧光密度越高反映出其受损细胞越多。
钙流检测
Fura-2，indo-1，Quin-2是Ca2+荧光指示剂，可以灵敏地反映细胞内钙离子浓度的变化，当结合钙离子时，最大激发波长会发生改变，发射荧光的强度和结合的Ca2+浓度有着定量的关系。
2.2荧光偏振(FP)
1926年Perrin首先描述了荧光偏振理论，溶液中的荧光分子在受到偏振光照射时，可吸收并释放出相应的偏振荧光，如果在激发时荧光物质处于静止状态，发射光将保持原有激发光的偏振性，如果其处于运动状态，发射光电偏振偏振平面将不同于原有激发光的偏振特性，这就是荧光偏振现象，荧光分子与其它因子的相互作用，例如相互结合或排斥；其所处环境的性质，例如溶液的粘度、温度等，这些因素都有可能对这个荧光因子受激发后发出的发射
光的发射平面产生影响。因此以荧光偏振为基础发展的技术可用来研究生命科学中分子之间的相互作用，如受体配体结合分析，DNA－蛋白质结合分析，SNP分析，酶活性分析。
荧光偏振分析所需的样品量少，灵敏度高，可达亚纳摩尔级范围，重复性好，操作简便，也更为安全可靠，不会在实验过程中生成有害的放射性废物，此外荧光偏振是真正均相的，允许实时检测（动力学检测），对于浓度变化不敏感，是均相检测形式（中间不含洗涤步骤）的最佳解决方案。
目前市场上多款酶标仪都可以用来做荧光偏振检测，Invitrogene公司专门利用Predictor? hERG对多款酶标仪进行荧光偏振测试分析（表1）。
2.3时间分辨荧光(TRF)
在做荧光测定的时候，由于背景荧光信号干扰，使用传统的生色团进进行荧光检测方式进行检测时，灵敏度会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的，因此使用长衰减寿命的标记物就可以使瞬时荧光对检测信号产生的干扰减到最小化。
时间分辨荧光是用稀土元素作为标记物，稀土三价离子的电子云的结构会一定程度上限制了电子的迁移，这类元素发生的荧光的衰减周期通常很长，从而可以基本消除背景荧光的干扰大大提高检测的灵敏度（表2）。应用稀土元素作标记物的另一个好处是激发光与发射光峰值Stoke 位移大。这就可消除激发光和散射光的干扰，同时, 被激发的荧光光带极窄, 荧光的发射峰非常尖锐, 可使仪器调整在极窄的波长范围内测定, 极大地降低了来自背景的各种干扰。
荧光团 非特异荧光背景 人血清白蛋白 球蛋白 细胞色素C 异硫氰酸荧光素(FITC) 丹磺酰氯 稀土螯合物 荧光寿命（ns） 1～10 4.1 3.0 3.5 4.5 14 103～106 表2.常见荧光生色团队荧光寿命
时间分辨荧光灵敏度高、特异性强、稳定性好、标记物制备简便、检测重复性好、操作流程短，适用于生物学、医学上的超微量分析、像激素检测、病毒性肝炎标志物检测、靶向细胞的标记检测以及药物筛选等方面。